| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第13-19页 |
| 0.1 概述 | 第13-14页 |
| 0.2 影响抗菌肽抗菌活性的因素 | 第14-16页 |
| 0.2.1 螺旋度 | 第14-15页 |
| 0.2.2 疏水性 | 第15页 |
| 0.2.3 两亲性 | 第15页 |
| 0.2.4 正电荷数 | 第15页 |
| 0.2.5 特殊氨基酸残基及末端氨基酸的作用 | 第15-16页 |
| 0.2.6 氨基酸的构型 | 第16页 |
| 0.3 改造天然抗菌肽的方法 | 第16-18页 |
| 0.3.1 氨基酸残基替换 | 第16-17页 |
| 0.3.2 截取天然抗菌肽的部分序列 | 第17页 |
| 0.3.3 序列模板法 | 第17-18页 |
| 0.3.4 杂合肽的设计 | 第18页 |
| 0.3.5 组合化学库法 | 第18页 |
| 0.3.6 螺旋轮法 | 第18页 |
| 0.4 实验目的及意义 | 第18-19页 |
| 第1章 新型抗菌肽 AWRK6 的优化构建及生物信息学预测 | 第19-25页 |
| 1.1 引言 | 第19-20页 |
| 1.2 研究方法 | 第20页 |
| 1.3 抗菌肽 Dybowskin-2CDYa 的物化特性分析 | 第20-21页 |
| 1.4 预测二级结构 | 第21-23页 |
| 1.4.1 HNN 法预测二级结构 | 第21-22页 |
| 1.4.2 ArgusLab4.0 模拟二级结构 | 第22-23页 |
| 1.5 两亲性预测 | 第23-24页 |
| 1.6 讨论 | 第24-25页 |
| 第2章 新型抗菌肽 AWRK6 表达载体的构建 | 第25-35页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 菌种和载体 | 第25页 |
| 2.3 工具酶与生化试剂 | 第25-26页 |
| 2.4 主要仪器和设备 | 第26页 |
| 2.5 溶液与培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.6 方法 | 第27-31页 |
| 2.6.1 实验策略 | 第27页 |
| 2.6.2 引物设计 | 第27页 |
| 2.6.3 AWRK6 序列扩增 | 第27-28页 |
| 2.6.4 表达质粒的构建 | 第28-31页 |
| 2.6.5 阳性重组质粒的测序与分析 | 第31页 |
| 2.7 结果 | 第31-34页 |
| 2.7.1 AWRK6 序列扩增 | 第31-32页 |
| 2.7.2 AWRK6 基因及 pPICZα-A 黏性末端的制备结果 | 第32-33页 |
| 2.7.3 阳性重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第33页 |
| 2.7.4 阳性重组质粒的测序结果 | 第33-34页 |
| 2.8 讨论 | 第34-35页 |
| 第3章 抗菌肽 AWRK6 在毕赤酵母中表达 | 第35-47页 |
| 3.1 引言 | 第35-36页 |
| 3.2 材料与方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 实验菌种 | 第36页 |
| 3.2.2 工具酶与生化试剂 | 第36页 |
| 3.2.3 主要仪器和设备 | 第36页 |
| 3.2.4 溶液与培养基的配制 | 第36-38页 |
| 3.2.5 方法 | 第38-41页 |
| 3.3 结果 | 第41-45页 |
| 3.3.1 重组质粒线性化结果 | 第41-42页 |
| 3.3.2 酵母转化子的筛选及鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3.3 发酵上清液的纯化 | 第43-44页 |
| 3.3.4 抑菌活性鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 dybowskin-2CDYa 和 AWRK6 活性对比 | 第45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第52-53页 |
