| 中文摘要 | 第3-6页 |
| 英文摘要 | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第14-26页 |
| 1.1 研究背景和意义 | 第14-15页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第15-23页 |
| 1.2.1 莱氏野村菌 | 第15-16页 |
| 1.2.2 斜纹夜蛾的免疫系统 | 第16-18页 |
| 1.2.3 斜纹夜蛾QM基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.4 斜纹夜蛾PDI基因的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.3 研究目标、内容和技术路线 | 第23-25页 |
| 1.3.1 研究目标 | 第23-24页 |
| 1.3.2 研究的主要内容 | 第24页 |
| 1.3.3 实验的技术路线 | 第24-25页 |
| 1.4 本研究的创新性 | 第25-26页 |
| 2. 斜纹夜蛾QM基因全长的克隆与序列信息学分析 | 第26-44页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要的仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-35页 |
| 2.2.1 斜纹夜蛾总RNA的提取以及cDNA的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.2 斜纹夜蛾QM基因的克隆与测序 | 第28-32页 |
| 2.2.3 斜纹夜蛾QM基因的测通 | 第32-33页 |
| 2.2.4 斜纹夜蛾QM基因生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 2.2.5 SpLQM基因组序列扩增 | 第34-35页 |
| 2.3. 实验结果及分析 | 第35-44页 |
| 2.3.1 斜纹夜蛾QM基因全长的克隆 | 第35-36页 |
| 2.3.2 斜纹夜蛾QM基因全长的测通 | 第36页 |
| 2.3.3. 斜纹夜蛾QM基因组结构分析结果 | 第36-37页 |
| 2.3.4 信息学分析结果 | 第37-44页 |
| 3 斜纹夜蛾SpLQM基因表达特性分析 | 第44-52页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂及配制 | 第44页 |
| 3.1.3 主要的仪器设备 | 第44-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 N.rileyi的诱导与斜纹夜蛾组织的选取 | 第45页 |
| 3.2.2 荧光定量引物的设计 | 第45-46页 |
| 3.2.3 斜纹夜蛾总RNA的提取以及cDNA的制备 | 第46页 |
| 3.2.4 SpLQM在斜纹夜蛾各个组织的表达差异 | 第46-48页 |
| 3.2.5 qPCR数据的处理 | 第48页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第48-52页 |
| 3.3.1 不同组织中SpLQM的mRNA表达分析 | 第48-49页 |
| 3.3.2 莱氏野村菌孢子在斜纹夜蛾血腔内的增殖情况 | 第49-50页 |
| 3.3.3 斜纹夜蛾SpLQM在莱氏野村菌诱导后表达变化 | 第50-52页 |
| 4. 斜纹夜蛾QM基因原核表达以及Western blot验证 | 第52-65页 |
| 4.1 试剂和材料 | 第52-54页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第52页 |
| 4.1.2 主要试剂及配制 | 第52-54页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-62页 |
| 4.2.1 重组表达质粒的构建 | 第54-59页 |
| 4.2.2 重组质粒pET30a-SpLQM的诱导表达 | 第59页 |
| 4.2.3 pET30a-SPLQM原核表达形式的确定 | 第59-60页 |
| 4.2.4 SpLQM-His的蛋白切胶回收纯化 | 第60-61页 |
| 4.2.5 SpLQM蛋白的Western blotting验证 | 第61-62页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第62-65页 |
| 4.3.1 SpLQM目的片段的扩增及重组质粒和测序鉴定 | 第62页 |
| 4.3.2 SpLQM蛋白表达形式的确定 | 第62-63页 |
| 4.3.3 SpLQM蛋白的纯化及Western blotting验证 | 第63-65页 |
| 5. 斜纹夜蛾PDI基因的克隆与序列的生物信息学分析 | 第65-76页 |
| 5.1 实验材料和试剂 | 第65页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第65页 |
| 5.1.2 主要试剂以及配制 | 第65页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-68页 |
| 5.2.1 斜纹夜蛾总RNA的提取以及cDNA的制备 | 第65页 |
| 5.2.2 斜纹夜蛾PDI基因的克隆与测序 | 第65-67页 |
| 5.2.3 斜纹夜蛾PDI基因的测通验证 | 第67-68页 |
| 5.2.4 斜纹夜蛾PDI基因的生物信息学分析 | 第68页 |
| 5.3 实验结果及分析 | 第68-76页 |
| 5.3.1 斜纹夜蛾SpLPDI的全长cDNA克隆 | 第68-69页 |
| 5.3.2 斜纹夜蛾PDI基因生物信息学主要分析结果 | 第69-76页 |
| 6. 斜纹夜蛾SpLPDI基因表达特性分析 | 第76-80页 |
| 6.1 实验材料与试剂 | 第76页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第76页 |
| 6.1.2 主要试剂及配制 | 第76页 |
| 6.1.3 主要仪器设备 | 第76页 |
| 6.2 实验方法 | 第76页 |
| 6.2.1 莱氏野村菌的诱导与斜纹夜蛾实验组织的选取 | 第76页 |
| 6.2.2 斜纹夜蛾SpLPDI基因荧光定量引物的设计 | 第76页 |
| 6.2.3 斜纹夜蛾的总RNA的提取以及cDNA的制备 | 第76页 |
| 6.2.4 SpLPDI基因在斜纹夜蛾所选组织的表达差异分析 | 第76页 |
| 6.2.5 RT-qPCR数据的处理 | 第76页 |
| 6.3 实验结果及分析 | 第76-80页 |
| 6.3.1 不同组织中SpLPDI的mRNA表达分析 | 第76-77页 |
| 6.3.2 斜纹夜蛾SpLPDI在莱氏野村菌诱导后表达变化 | 第77-80页 |
| 7. 斜纹夜蛾SpLPDI蛋白的原核表达与蛋白纯化 | 第80-86页 |
| 7.1 实验材料和试剂 | 第80-81页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第80页 |
| 7.1.2 主要试剂及配制 | 第80-81页 |
| 7.1.3 主要仪器设备 | 第81页 |
| 7.2 实验方法 | 第81-83页 |
| 7.2.1 重组表达质粒的构建 | 第81页 |
| 7.2.2 重组质粒pET30a-SpLPDI的诱导表达 | 第81-82页 |
| 7.2.3 pET30a-SPLPDI原核表达形式的确定 | 第82页 |
| 7.2.4 SpLPDI-His的蛋白过镍柱纯化 | 第82-83页 |
| 7.3 实验结果及分析 | 第83-86页 |
| 7.3.1 SpLPDI目的片段的扩增及重组质粒和测序鉴定 | 第83页 |
| 7.3.2 SpLPDI蛋白表达形式的确定 | 第83-84页 |
| 7.3.3 SpLPDI-His蛋白的Ni-NTA亲和层析柱纯化结果 | 第84-86页 |
| 8. 讨论 | 第86-90页 |
| 8.1 斜纹夜蛾SpLQM基因功能与表达分析 | 第86-87页 |
| 8.2 斜纹夜蛾SpLPDI基因功能与表达分析 | 第87-90页 |
| 9. 结论与后续工作 | 第90-92页 |
| 9.1 结论 | 第90页 |
| 9.2 后续工作建议 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 附录 | 第102页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文 | 第102页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第102页 |
