| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 马流感病毒的概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 马流感病毒的生物学 | 第12-13页 |
| 1.1.2 马流感病毒的基因组、蛋白质及其功能 | 第13-15页 |
| 1.1.3 流感病毒的生命周期 | 第15页 |
| 1.1.4 A/equine/Jilin/1/1989(H3N8) | 第15-16页 |
| 1.2 流感病毒的反向遗传学的研究现状 | 第16-21页 |
| 1.2.1 依赖辅助病毒的病毒拯救系统 | 第17-18页 |
| 1.2.2 不依赖辅助病毒的病毒拯救系统 | 第18-21页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 马流感病毒反向遗传系统的建立 | 第22-38页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 载体、病毒株、菌株、细胞和鸡胚 | 第22页 |
| 2.1.2 主要生化试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 常用缓冲液和培养基 | 第22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 细胞和鸡胚的培养 | 第23页 |
| 2.2.2 病毒培养 | 第23页 |
| 2.2.3 相向转录质粒pEZ的构建 | 第23-28页 |
| 2.2.4 pEZ的功能验证 | 第28-33页 |
| 2.2.5 病毒RNA的提取 | 第33页 |
| 2.2.6 JL89基因组全序列的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.7 8 个重组质粒的构建 | 第34页 |
| 2.2.8 HA蛋白的检测 | 第34-35页 |
| 2.2.9 病毒的拯救 | 第35页 |
| 2.2.10 病毒变异体的拯救及鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.11 拯救病毒的滴度测定 | 第36页 |
| 2.2.12 拯救病毒的生物学特性的研究 | 第36-37页 |
| 2.2.13 拯救病毒的遗传学研究 | 第37-38页 |
| 第三章 结果 | 第38-44页 |
| 3.1 成功构建载体PEZ且其具有相向转录的功能 | 第38-39页 |
| 3.2 获得JL89基因组全序列及序列分析 | 第39-40页 |
| 3.3 成功构建8个重组质粒且PEZ-HA的蛋白表达良好 | 第40-41页 |
| 3.4 成功拯救出EIV病毒 | 第41-42页 |
| 3.5 PEZ系统拯救病毒的滴度较PBD系统高 | 第42-43页 |
| 3.6 救获病毒和亲本毒生物学特性相似 | 第43页 |
| 3.7 救获病毒和亲本毒遗传学特性一致 | 第43-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 附录 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |