| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 蓝藻概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 蓝藻生产化学品 | 第10页 |
| 1.1.2 提高蓝藻生产化学品的策略 | 第10-13页 |
| 1.1.2.1 提高蓝藻固定CO_2效率 | 第10-11页 |
| 1.1.2.2 重新设计内源碳流的分配 | 第11-12页 |
| 1.1.2.3 调整藻细胞内氧化还原平衡 | 第12-13页 |
| 1.2 集胞藻PCC 6803概述 | 第13-14页 |
| 1.2.1 集胞藻PCC 6803基因组 | 第13页 |
| 1.2.2 集胞藻PCC 6803的诱变和突变株分离 | 第13-14页 |
| 1.2.2.1 转化和接合转移 | 第13-14页 |
| 1.2.2.2 突变株的构建和分离 | 第14页 |
| 1.3 聚羟基脂肪酸酯(PHA)概述 | 第14-19页 |
| 1.3.1 PHA的应用 | 第15页 |
| 1.3.2 PHA生产选用的菌株 | 第15-17页 |
| 1.3.2.1 野生型菌株生产PHA | 第16页 |
| 1.3.2.2 基因重组菌株生产PHA | 第16-17页 |
| 1.3.3 工业发酵生产PHA | 第17页 |
| 1.3.4 利用集胞藻PCC 6803生产PHB | 第17-19页 |
| 1.4 β-酮脂酰-酰基载体蛋白还原酶(FabG)的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4.1 FabG在医药方面的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.2 FabG调控PHA合成机制研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4.3 FabG酶促反应动力学研究 | 第21页 |
| 1.5 本论文的研究意义与内容 | 第21-23页 |
| 第二章 SpFabG反应动力学研究 | 第23-35页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2.2 实验试剂及耗材 | 第23-24页 |
| 2.2.3 培养基及相关溶液配制 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.3.1 SpFabG的表达和纯化 | 第24-26页 |
| 2.3.1.1 SpFabG大量诱导 | 第25页 |
| 2.3.1.2 Ni-NTA亲和层析初步纯化 | 第25页 |
| 2.3.1.3 FPLC进一步纯化 | 第25页 |
| 2.3.1.4 蛋白浓度和纯度检测 | 第25-26页 |
| 2.3.2 SpFabG催化乙酰乙酰CoA活性表征 | 第26-28页 |
| 2.3.2.1 测定最适反应温度 | 第26页 |
| 2.3.2.2 测定最适反应pH | 第26-27页 |
| 2.3.2.3 测定反应动力学参数 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第28-34页 |
| 2.4.1 FPLC纯化结果 | 第28页 |
| 2.4.2 蛋白浓度和纯度 | 第28-29页 |
| 2.4.3 最适反应温度 | 第29-30页 |
| 2.4.4 最适反应pH | 第30页 |
| 2.4.5 反应动力学参数 | 第30-34页 |
| 2.4.5.1 NADPH标准曲线 | 第31页 |
| 2.4.5.2 不同乙酰乙酰CoA浓度下反应速度 | 第31-32页 |
| 2.4.5.3 动力学参数的拟合 | 第32-34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 突变藻株构建和生理生化研究 | 第35-49页 |
| 3.1 前言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.2.2 实验试剂及耗材 | 第36页 |
| 3.2.3 培养基及相关溶液配制 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-43页 |
| 3.3.1 突变株的构建和鉴定 | 第37-39页 |
| 3.3.1.1 构建质粒 | 第37-39页 |
| 3.3.1.2 转化集胞藻PCC 6803 | 第39页 |
| 3.3.1.3 突变株的PCR鉴定 | 第39页 |
| 3.3.2 正常/缺氮培养条件下指标测定 | 第39-43页 |
| 3.3.2.1 绘制生长曲线 | 第40页 |
| 3.3.2.2 干重测定 | 第40页 |
| 3.3.2.3 脂肪酸含量测定 | 第40-41页 |
| 3.3.2.4 PHB含量测定 | 第41页 |
| 3.3.2.5 蛋白质含量测定 | 第41-42页 |
| 3.3.2.6 总糖含量测定 | 第42-43页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第43-48页 |
| 3.4.1 突变株分离鉴定 | 第43-44页 |
| 3.4.2 正常/缺氮培养藻株生理指标 | 第44-48页 |
| 3.4.2.1 基因改造对藻生长的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.2.2 脂肪酸含量 | 第45-46页 |
| 3.4.2.3 PHB含量 | 第46-47页 |
| 3.4.2.4 蛋白含量 | 第47-48页 |
| 3.4.2.5 总糖含量 | 第48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
