| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 引言 | 第9-17页 |
| 1.1 肺炎球菌(Streptococcus pneumoniae,SPN) | 第9-11页 |
| 1.1.1 肺炎球菌概述 | 第9页 |
| 1.1.2 肺炎球菌的表面结构及致病性 | 第9-11页 |
| 1.1.3 肺炎球菌表面蛋白A(pneumococci surface protein A,PspA) | 第11页 |
| 1.2 免疫球蛋白 | 第11-13页 |
| 1.2.1 免疫球蛋白概述 | 第12页 |
| 1.2.2 免疫球蛋白的发现 | 第12页 |
| 1.2.3 免疫球蛋白的结构与分类 | 第12-13页 |
| 1.2.4 免疫球蛋白的功能 | 第13页 |
| 1.3 Fc受体 | 第13-15页 |
| 1.3.1 Fc受体概述 | 第14页 |
| 1.3.2 Fc受体的种类 | 第14-15页 |
| 1.4 研究的理论与实际意义 | 第15页 |
| 1.5 本论文研究的主要内容及创新点 | 第15-17页 |
| 1.5.1 本论文的研究内容 | 第16页 |
| 1.5.2 本论文的主要创新点 | 第16-17页 |
| 第二章 重组蛋白Fc-PspA23F的制备 | 第17-44页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 肺炎链球菌的培养与鉴定 | 第19-20页 |
| 2.2.1.1 肺炎球菌的培养 | 第19页 |
| 2.2.1.2 鉴定方法 | 第19-20页 |
| 2.2.2 肺炎球菌基因组的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.3 小鼠脾脏细胞RNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.4 RNA逆转录成cDNA | 第21-22页 |
| 2.2.5 PCR扩增引物的设计 | 第22页 |
| 2.2.6 扩增目的基因 | 第22-23页 |
| 2.2.7 1.0%琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| 2.2.8 胶回收 | 第23-24页 |
| 2.2.9 双酶切 | 第24页 |
| 2.2.10 酶连反应及转化 | 第24-25页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.12 质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.2.13 菌落PCR验证 | 第27页 |
| 2.2.14 重组质粒的鉴定 | 第27页 |
| 2.2.15 重组菌的培养及重组蛋白的诱导表达 | 第27页 |
| 2.2.16 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 | 第27-28页 |
| 2.2.17 重组蛋白纯化方法 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-44页 |
| 2.3.1 肺炎球菌的培养及鉴定 | 第30-32页 |
| 2.3.1.1 菌落形态 | 第30-31页 |
| 2.3.1.2 革兰氏染色鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.1.3 胆汁溶血鉴定 | 第32页 |
| 2.3.2 小鼠抗体的Fc片段基因和肺炎球菌血清型23F的PspA基因的克隆 | 第32-33页 |
| 2.3.3 PspA23F-Fc-pET27b(+)重组质粒的构建与验证 | 第33-41页 |
| 2.3.3.1 PspA23F-Fc-pET27b(+)重组质粒的构建 | 第34页 |
| 2.3.3.2 PspA23F-pET27b(+)和Fc-pET27b(+)重组子验证 | 第34-37页 |
| 2.3.3.3 PspA23F-Fc-pET27b(+)重组子验证 | 第37-38页 |
| 2.3.3.4 重组质粒PspA23F-Fc -pET27b(+)基因序列分析 | 第38-41页 |
| 2.3.4 重组蛋白PspA23F-Fc的表达及纯化 | 第41-44页 |
| 第三章 PspA23F-Fc融合蛋白的免疫分析 | 第44-52页 |
| 3.1 材料和仪器 | 第44页 |
| 3.1.1 实验动物和实验菌种 | 第44页 |
| 3.1.2 主要实验试剂与仪器 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 重组蛋白PspA23F-Fc的小鼠免疫 | 第44页 |
| 3.2.2 血清中抗体滴度的ELISA检测 | 第44-45页 |
| 3.2.3 血清中蛋白抗血清对菌体外膜蛋白的亲和度 | 第45页 |
| 3.2.4 流式细胞术检测融合蛋白与免疫细胞的结合能力 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-52页 |
| 3.3.1 重组蛋白PspA23F-Fc的鉴定 | 第46页 |
| 3.3.2 血清中抗体滴度 | 第46-47页 |
| 3.3.3 血清中抗体对全菌体外膜蛋白的亲和度 | 第47-48页 |
| 3.3.4 融合蛋白与抗原呈递细胞的结合能力 | 第48-52页 |
| 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59页 |
