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菊芋乙醇发酵策略及菊粉酶表达调控机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
主要符号表第23-25页
引言第25-26页
1 文献综述第26-65页
    1.1 燃料乙醇第26-36页
        1.1.1 燃料乙醇产业现状第26-28页
        1.1.2 燃料乙醇发展历程第28-36页
    1.2 菊芋乙醇第36-48页
        1.2.1 菊芋概述第36-38页
        1.2.2 两步法菊芋乙醇发酵第38-41页
        1.2.3 一步法菊芋乙醇发酵第41-45页
        1.2.4 全植株菊芋乙醇发酵第45-46页
        1.2.5 菊芋乙醇生产面临的机遇与挑战第46-48页
    1.3 马克斯克鲁维酵母第48-59页
        1.3.1 马克斯克鲁维酵母生理代谢特性第48-50页
        1.3.2 马克斯克鲁维酵母在产酶方面的应用第50-54页
        1.3.3 马克斯克鲁维酵母在燃料乙醇生产方面的应用第54-58页
        1.3.4 马克斯克鲁维酵母在其他工业领域的应用第58-59页
    1.4 菊粉酶及其表达调控机制概述第59-63页
        1.4.1 菊粉酶研究现状第59-61页
        1.4.2 菊粉酶的表达调控机制第61-63页
    1.5 研究工作主要思路第63-65页
        1.5.1 选题依据第63页
        1.5.2 存在问题第63页
        1.5.3 研究内容及技术路线第63-65页
2 不同通气策略下的乙醇发酵第65-80页
    2.1 引言第65页
    2.2 实验材料与方法第65-69页
        2.2.1 菌种第65页
        2.2.2 培养基第65页
        2.2.3 培养条件第65-66页
        2.2.4 乙醇发酵策略第66页
        2.2.5 实验试剂第66页
        2.2.6 仪器设备第66-67页
        2.2.7 两阶段通气策略调控下的菊芋乙醇生料发酵第67页
        2.2.8 分析方法第67-69页
    2.3 结果与讨论第69-79页
        2.3.1 不同通气量对乙醇发酵过程的影响第69-70页
        2.3.2 初始菊粉酶活力和接种生物量对乙醇发酵过程的影响第70-71页
        2.3.3 两阶段通气策略对乙醇发酵过程的影响第71-73页
        2.3.4 乙醇发酵过程中的甘油和乙酸第73-75页
        2.3.5 两阶段通气策略调控下的菊芋乙醇生料发酵第75-79页
    2.4 本章小结第79-80页
3 氧化还原电位控制下的乙醇发酵第80-92页
    3.1 引言第80页
    3.2 实验材料与方法第80-82页
        3.2.1 菌种第80页
        3.2.2 培养基第80页
        3.2.3 培养条件第80页
        3.2.4 ORP调控策略第80-81页
        3.2.5 实验试剂第81页
        3.2.6 仪器设备第81页
        3.2.7 分析方法第81-82页
        3.2.8 代谢通量分析第82页
    3.3 结果与讨论第82-91页
        3.3.1 不同控制策略总通气量与ORP变化的分析第82-84页
        3.3.2 不同ORP控制策略下发酵情况的综合评价与比较第84-88页
        3.3.3 代谢通量分析第88-91页
    3.4 本章小结第91-92页
4 不同乙醇发酵条件下的全局转录组学分析第92-118页
    4.1 引言第92页
    4.2 实验材料与方法第92-97页
        4.2.1 菌种第92页
        4.2.2 培养基第92页
        4.2.3 培养条件第92-93页
        4.2.4 转录组学分析第93-96页
        4.2.5 实验试剂第96页
        4.2.6 仪器设备第96页
        4.2.7 分析方法第96页
        4.2.8 实时定量荧光PCR第96-97页
    4.3 结果与讨论第97-117页
        4.3.1 不同条件下的乙醇发酵性能概述第97-101页
        4.3.2 基因组注释第101页
        4.3.3 转录组分析总述第101-102页
        4.3.4 不同条件下的马克斯克鲁维酵母转录组学分析第102-105页
        4.3.5 中心碳代谢途径的基因表达差异分析第105-109页
        4.3.6 乙醇及甘油生成途径基因表达差异第109-111页
        4.3.7 氧化压力防御途径的基因表达差异第111页
        4.3.8 糖转运蛋白的基因表达差异第111-112页
        4.3.9 转录调控相关基因的差异表达情况第112-114页
        4.3.10 细胞自噬和线粒体氧化磷酸化相关基因的差异表达情况第114-117页
    4.4 本章小结第117-118页
5 基于转录组分析的关键基因功能表征第118-145页
    5.1 引言第118页
    5.2 实验材料与方法第118-125页
        5.2.1 菌种和质粒第118页
        5.2.2 培养基第118-119页
        5.2.3 培养条件第119页
        5.2.4 分子操作技术第119-122页
        5.2.5 实验试剂第122-123页
        5.2.6 仪器设备第123页
        5.2.7 过表达重组菌的构建第123-124页
        5.2.8 KmTPX1,KmTRX和KmTrxR基因的功能验证第124-125页
    5.3 结果与讨论第125-144页
        5.3.1 基因KmTPX1的生物学功能第125-135页
        5.3.2 基因KmTrxR的生物学功能第135-140页
        5.3.3 基因KmTRX和基因KmTrxR的协同作用第140-144页
    5.4 本章小结第144-145页
6 马克斯克鲁维酵母产菊粉酶表达调控机制探究第145-171页
    6.1 引言第145页
    6.2 实验材料和方法第145-151页
        6.2.1 菌株第145页
        6.2.2 培养基第145-147页
        6.2.3 实验试剂和仪器设备第147页
        6.2.4 培养条件对菊粉酶活力的影响第147页
        6.2.5 分子生物学操作第147-151页
        6.2.6 荧光强度测定第151页
        6.2.7 分析方法第151页
    6.3 结果与讨论第151-170页
        6.3.1 培养条件对菊粉酶活力和细胞生长的影响第151-157页
        6.3.2 菊粉酶启动子的启动活性第157-158页
        6.3.3 不同截断长度菊粉酶启动子的启动活性比较第158-161页
        6.3.4 菊粉酶启动子抑制区域探讨第161-164页
        6.3.5 菊粉酶启动子核心启动原件分析第164-165页
        6.3.6 随机突变筛选高启动活性的菊粉酶启动子第165-170页
    6.4 本章小结第170-171页
7 结论、创新点与展望第171-173页
    7.1 结论第171-172页
    7.2 创新点第172页
    7.3 展望第172-173页
参考文献第173-194页
附录第194-205页
作者简介第205-206页
攻读博士学位期间科研项目及参加科研项目第206-208页
致谢第208页

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