| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 1 绪论 | 第23-45页 |
| 1.1 细胞的脱附 | 第23-29页 |
| 1.1.1 传统细胞脱附法 | 第23-24页 |
| 1.1.2 流体剪切力介导的细胞脱附 | 第24页 |
| 1.1.3 刺激响应性聚合物介导的细胞脱附 | 第24-28页 |
| 1.1.4 其它细胞脱附方法 | 第28-29页 |
| 1.2 基于PNIPAAm的温敏基底 | 第29-37页 |
| 1.2.1 PNIPAAm的结构及其温敏机理 | 第29-30页 |
| 1.2.2 基于PNIPAAm的温敏基底的制备及优化 | 第30-34页 |
| 1.2.3 温敏基底上细胞的粘附与脱附 | 第34-37页 |
| 1.2.4 温敏基底上细胞降温脱附的优势 | 第37页 |
| 1.3 中空纤维膜 | 第37-43页 |
| 1.3.1 中空纤维膜在细胞培养和组织工程中的应用 | 第38-42页 |
| 1.3.2 中空纤维膜的温敏改性 | 第42-43页 |
| 1.4 立题依据及本文主要研究思路 | 第43-45页 |
| 2 PNIPAAm-g-HFMs的制备与表征 | 第45-58页 |
| 2.1 引言 | 第45-46页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第46-48页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第47页 |
| 2.2.3 药品与试剂 | 第47-48页 |
| 2.3 实验及表征方法 | 第48-50页 |
| 2.3.1 PNIPAAm-g-HFMs的制备 | 第48-49页 |
| 2.3.2 衰减全反射傅里叶变换红外光谱 | 第49页 |
| 2.3.3 元素分析 | 第49-50页 |
| 2.3.4 环境扫描电子显微镜 | 第50页 |
| 2.3.5 接触角分析 | 第50页 |
| 2.3.6 蛋白吸附量的测定 | 第50页 |
| 2.3.7 统计学分析 | 第50页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第50-57页 |
| 2.4.1 PNIPAAm-g-HFMs的红外光谱及元素分析 | 第50-52页 |
| 2.4.2 PNIPAAm-g-HFMs的表面形貌 | 第52-53页 |
| 2.4.3 PNIPAAm-g-HFMs的温敏特性 | 第53-57页 |
| 2.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 3 PNIPAAm-g-HFMs生物相容性的评价 | 第58-72页 |
| 3.1 引言 | 第58页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第58-60页 |
| 3.2.1 实验仪器与设备 | 第58-59页 |
| 3.2.2 药品与试剂 | 第59-60页 |
| 3.2.3 实验动物 | 第60页 |
| 3.3 试剂配制与实验方法 | 第60-65页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第60-61页 |
| 3.3.2 成骨细胞的原代培养 | 第61-62页 |
| 3.3.3 成骨细胞的鉴定 | 第62-63页 |
| 3.3.4 PNIPAAm-g-HFMs生物相容性的评价 | 第63-64页 |
| 3.3.5 统计学分析 | 第64-65页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第65-71页 |
| 3.4.1 成骨细胞的形态及鉴定 | 第65-66页 |
| 3.4.2 PNIPAAm-g-HFMs上成骨细胞的活性及增殖 | 第66-69页 |
| 3.4.3 PNIPAAm-g-HFMs上成骨细胞ALP活性及OCN的表达 | 第69-71页 |
| 3.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 4 贴壁型细胞在PNIPAAm-g-HFMs上的粘附与降温脱附 | 第72-88页 |
| 4.1 引言 | 第72-73页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第73页 |
| 4.2.1 实验仪器与设备 | 第73页 |
| 4.2.2 药品与试剂 | 第73页 |
| 4.2.3 实验动物 | 第73页 |
| 4.3 实验方法 | 第73-76页 |
| 4.3.1 试剂配制 | 第73页 |
| 4.3.2 PNIPAAm-g-HFMs的制备 | 第73页 |
| 4.3.3 成纤维细胞及成骨细胞的分离培养 | 第73-74页 |
| 4.3.4 成纤维细胞及成骨细胞的冻存与复苏 | 第74页 |
| 4.3.5 成纤维细胞和成骨细胞的鉴定 | 第74-75页 |
| 4.3.6 PNIPAAm-g-HFMs上成骨细胞及成纤维细胞的粘附与降温脱附 | 第75-76页 |
| 4.3.7 统计学分析 | 第76页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第76-86页 |
| 4.4.1 成纤维细胞的形态及鉴定 | 第76-77页 |
| 4.4.2 成骨细胞的形态及鉴定 | 第77页 |
| 4.4.3 贴壁型细胞在PNIPAAm-g-HFMs上的粘附 | 第77-79页 |
| 4.4.4 贴壁型细胞在PNIPAAm-g-HFMs上的降温收获 | 第79-86页 |
| 4.5 本章小结 | 第86-88页 |
| 5 成骨细胞在PNIPAAm-g-HFMs上的多次传代培养与鉴定 | 第88-105页 |
| 5.1 引言 | 第88页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第88-89页 |
| 5.2.1 实验仪器与设备 | 第88-89页 |
| 5.2.2 药品与试剂 | 第89页 |
| 5.2.3 实验动物 | 第89页 |
| 5.3 实验方法 | 第89-93页 |
| 5.3.1 成骨细胞的分离与培养 | 第89页 |
| 5.3.2 PNIPAAM-g-HFMs的制备 | 第89-90页 |
| 5.3.3 PNIPAAM-g-HFMs上成骨细胞的传代培养 | 第90页 |
| 5.3.4 成骨细胞的细胞外基质蛋白的检测 | 第90-91页 |
| 5.3.5 成骨细胞的活性与增殖活性的检测 | 第91-92页 |
| 5.3.6 成骨细胞的分化及矿化检测 | 第92页 |
| 5.3.7 统计学分析 | 第92-93页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第93-104页 |
| 5.4.1 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的成骨细胞的细胞外基质蛋白 | 第93-97页 |
| 5.4.2 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的成骨细胞的活性与增殖 | 第97-101页 |
| 5.4.3 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的成骨细胞的分化及矿化 | 第101-104页 |
| 5.5 本章小结 | 第104-105页 |
| 6 BM-MSCs在PNIPAAm-g-HFMs上的多代培养与收获 | 第105-123页 |
| 6.1 引言 | 第105-106页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第106页 |
| 6.2.1 实验仪器与设备 | 第106页 |
| 6.2.2 药品与试剂 | 第106页 |
| 6.2.3 实验动物 | 第106页 |
| 6.3 实验方法 | 第106-109页 |
| 6.3.1 BM-MSCs的分离与培养 | 第106-107页 |
| 6.3.2 PNIPAAM-g-HFMs上BM-MSCs的培养与降温收获 | 第107页 |
| 6.3.3 PNIPAAm-g-HFMs上BM-MSCs的传代培养 | 第107-108页 |
| 6.3.4 BM-MSCs表面抗原的表达 | 第108页 |
| 6.3.5 BM-MSCs的细胞外基质蛋白 | 第108页 |
| 6.3.6 BM-MSCs的活性与增殖 | 第108-109页 |
| 6.3.7 BM-MSCs的成骨及软骨分化能力 | 第109页 |
| 6.3.8 统计学分析 | 第109页 |
| 6.4 实验结果与讨论 | 第109-122页 |
| 6.4.1 原代及传代培养的BM-MSCs形态 | 第109-110页 |
| 6.4.2 BM-MSCs在PNIPAAm-g-HFMs上的降温脱附 | 第110-111页 |
| 6.4.3 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的BM-MSCs表面抗原的表达 | 第111-113页 |
| 6.4.4 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的BM-MSCs的细胞外基质蛋白 | 第113-115页 |
| 6.4.5 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的BM-MSCs的活性与增殖 | 第115-117页 |
| 6.4.6 PNIPAAm-g-HFMs和传统培养体系收获的BM-MSCs向成骨/软骨细胞定向分化 | 第117-122页 |
| 6.5 本章小结 | 第122-123页 |
| 7 结论与展望 | 第123-126页 |
| 7.1 结论 | 第123-124页 |
| 7.2 创新点 | 第124-125页 |
| 7.3 展望 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-142页 |
| 附录A 公式2.1推导 | 第142页 |
| 附录B 英文缩略词 | 第142-145页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第145-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 作者简介 | 第147页 |
