摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第11-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-33页 |
1.1 猪圆环病毒病的病原学研究 | 第13-14页 |
1.1.1 猪圆环病毒1型 | 第13页 |
1.1.2 猪圆环病毒2型 | 第13-14页 |
1.2 猪圆环病毒2型的基因与蛋白 | 第14-16页 |
1.2.1 PCV2的基因组特征 | 第14-15页 |
1.2.2 PCV2编码的蛋白质及功能 | 第15-16页 |
1.3 PCV2的复制机制 | 第16-18页 |
1.3.1 复制元件 | 第17页 |
1.3.2 滚环复制模型 | 第17-18页 |
1.4 猪圆环病毒病流行病学特征 | 第18-19页 |
1.5 猪圆环病毒相关性疾病 | 第19-22页 |
1.5.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第20页 |
1.5.2 猪皮炎肾病综合征(PDNS) | 第20-21页 |
1.5.3 猪呼吸系统综合征(PRDC) | 第21页 |
1.5.4 繁殖障碍 | 第21页 |
1.5.5 先天性震颤(CT) | 第21-22页 |
1.5.6 肠炎 | 第22页 |
1.6 PCV2的致病机理 | 第22-23页 |
1.7 PCV2诊断技术 | 第23-26页 |
1.7.1 病原学诊断方法 | 第23-25页 |
1.7.2 血清学诊断方法 | 第25-26页 |
1.8 PCV2疫苗研究进展 | 第26-31页 |
1.8.1 PCV2商品化疫苗 | 第26-28页 |
1.8.2 PCV2新型疫苗的研究 | 第28-30页 |
1.8.3 PCV2疫苗免疫策略 | 第30-31页 |
1.9 猪圆环病毒病的防制措施 | 第31-33页 |
第二章 研究目的与意义 | 第33-34页 |
第三章 猪圆环病毒2型感染性克隆的构建 | 第34-50页 |
3.1 实验材料 | 第34-35页 |
3.1.1 毒株及细胞 | 第34页 |
3.1.2 主要试剂及仪器 | 第34页 |
3.1.3 培养基与相关试剂的配制 | 第34-35页 |
3.2 实验方法 | 第35-42页 |
3.2.1 带Hind Ⅲ分子标记PCV2基因组重组质粒的构建 | 第35-39页 |
3.2.2 病毒基因组的自环化及克隆毒株的拯救 | 第39页 |
3.2.3 克隆毒株的传代 | 第39-40页 |
3.2.4 分子标记病毒H-PCV2的鉴定 | 第40-41页 |
3.2.5 分子标记病毒H-PCV2生物学特性的测定 | 第41-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-47页 |
3.3.1 PCV2全基因组的扩增及带Hind Ⅲ酶切位点PCV2基因组的构建 | 第42-44页 |
3.3.2 拯救毒株全基因组序列的测定及PCR限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP) | 第44-45页 |
3.3.3 H-PCV2生物学特性的测定 | 第45-47页 |
3.4 讨论 | 第47-50页 |
3.4.1 猪圆环病毒病DNA疫苗的研究 | 第47-48页 |
3.4.2 PCV2分子标记疫苗研究的必要性 | 第48-49页 |
3.4.3 感染性克隆技术的应用 | 第49-50页 |
第四章 基于猜圈环病毒2型ORF9间接ELISA方法的建立 | 第50-71页 |
4.1 实验材料 | 第50-51页 |
4.1.1 标准毒株、细胞与血清 | 第50页 |
4.1.2 实验动物 | 第50页 |
4.1.3 主要试剂 | 第50页 |
4.1.4 主要仪器及耗材 | 第50页 |
4.1.5 主要缓冲液的配制 | 第50-51页 |
4.2 实验方法 | 第51-55页 |
4.2.1 PCV2序列分析与短肽合成 | 第51页 |
4.2.2 验证短肽的反应原性 | 第51-52页 |
4.2.3 基于合成短肽的PCV2抗体检测间接ELISA方法的建立 | 第52-55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-68页 |
4.3.1 PCV2序列分析与短肽合成 | 第55-59页 |
4.3.2 合成短肽的反应原性分析 | 第59-60页 |
4.3.3 ORF9p-ELISA检测方法的建立 | 第60-68页 |
4.4 讨论 | 第68-71页 |
4.4.1 基于PCV2 Cap蛋白ELISA检测方法的应用 | 第68-69页 |
4.4.2 PCV2中新靶标的预测与鉴定 | 第69页 |
4.4.3 ORF9p-ELISA诊断方法的建立与优化 | 第69-71页 |
第五章 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-90页 |
致谢 | 第90页 |