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中药提取物中毒蕈胆碱M1受体激动剂的高通量筛选

中文摘要第4-5页
英文摘要第5页
1 绪论第8-23页
    1.1 高通量药物筛选第8-14页
        1.1.1 药物筛选模型第8-11页
        1.1.2 高通量的样品库第11-13页
        1.1.3 自动化工作站第13页
        1.1.4 高效率的数据处理系统第13-14页
    1.2 G蛋白偶联受体是高通量筛选的重要药靶第14-15页
    1.3 G蛋白偶联受体高通量筛选第15-23页
        1.3.1 基于结合分析的检测方法第16-17页
        1.3.2 基于第二信使的检测方法第17-20页
        1.3.3 基于功能反应的报告基因检测第20-22页
        1.3.4 筛选方法的比较第22-23页
2 毒蕈胆碱M1受体第23-28页
    2.1 毒蕈胆碱M样受体家族第23-25页
        2.1.1 M受体的四个亚型第23-24页
        2.1.2 M1受体信号通路第24页
        2.1.3 M1受体激动剂第24-25页
    2.2 M1受体、阿尔茨海默(AD)病与中药第25-28页
3 毒蕈胆碱M1受体激动剂高通量筛选模型的建立第28-36页
    3.1 筛选模型设计第28-30页
        3.1.1 基本原理第28页
        3.1.2 响应元件及启动子的选择第28-29页
        3.1.3 报告基因的选择第29-30页
    3.2 毒蕈碱M1受体激动剂高通量筛选模型-M1细胞株的建立第30-36页
        3.2.1 材料第30页
        3.2.2 M1受体质粒(M1/pcDNA3.1(+))构建第30-33页
        3.2.3 报告基因质粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC/pGL3)第33页
        3.2.4 M1稳定细胞株的建立第33-34页
        3.2.5 阴性细胞株的建立第34-36页
4 筛选条件的优化及筛选模型的评估第36-42页
    4.1 筛选条件优化第36-38页
        4.1.1 96 孔板的细胞接种数目第36-37页
        4.1.2 荧光素酶的表达时间第37页
        4.1.3 Bright-Glo试剂用量第37-38页
    4.2 筛选模型的评估第38-40页
        4.2.1 Z′因子分析第38-39页
        4.2.2 Well-to-Well波动性检测第39-40页
        4.2.3 Plate-to-Plate波动性检测第40页
    4.3 M1细胞株内源性干扰检测第40-42页
5 中药提取库第42-45页
    5.1 中药的选择第42页
    5.2 中药提取第42-45页
        5.2.1 仪器装置第43页
        5.2.2 提取流程第43-45页
6 M1受体激动剂的筛选第45-47页
    6.1 M1细胞株的中药提取物的筛选第45页
    6.2 阴性细胞株的中药提取物的筛选第45-47页
7 中药活性成分的分离第47-49页
    7.1 实验材料及仪器第47页
    7.2 实验方法第47-48页
    7.3 讨论第48-49页
8 总结及展望第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-56页
附录第56页

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