摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
目录 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-26页 |
·番茄 | 第15页 |
·番茄病毒病及表现症状 | 第15-16页 |
·番茄病毒病的主要毒源及在我国的分布状况 | 第16-18页 |
·黄瓜花叶病毒 | 第18-21页 |
·黄瓜花叶病毒生物学特点 | 第18页 |
·黄瓜花叶病毒的结构及基因组功能 | 第18-20页 |
·黄瓜花叶病毒亚组分类及分布 | 第20-21页 |
·番茄花叶病毒与烟草花叶病毒 | 第21-22页 |
·病毒检测方法 | 第22-23页 |
·病毒序列测定与分析研究进展 | 第23-24页 |
·本文的研究目的与意义 | 第24-26页 |
·研究目的及意义 | 第24-25页 |
·研究内容 | 第25-26页 |
第二章 田间番茄样品的病毒检测 | 第26-40页 |
·同时检测多种病毒的多重RT-PCR 方法 | 第26-30页 |
·样品采集 | 第26页 |
·毒源保存及症状记录 | 第26-27页 |
·材料与方法 | 第27-30页 |
·酶联免疫检测(ELISA) | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第30-31页 |
·M-RT-PCR 和DAS-ELISA 灵敏性试验 | 第31-33页 |
·RT-PCR 灵敏性试验 | 第31-32页 |
·DAS-ELISA 灵敏性试验 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-37页 |
·转接后症状记录 | 第33-34页 |
·田间番茄样品的多重RT-PCR 检测 | 第34-35页 |
·ELISA 检测 | 第35-36页 |
·灵敏性试验 | 第36-37页 |
·讨论与小结 | 第37-40页 |
第三章 CMV 基因组亚组分类及天然假重组体鉴定 | 第40-52页 |
·引物及限制性内切酶 | 第40-43页 |
·引物设计 | 第40-41页 |
·限制性内切酶 | 第41-43页 |
·材料与方法 | 第43-46页 |
·酶与试剂 | 第43页 |
·样品 | 第43页 |
·总RNA 的提取 | 第43页 |
·RT-PCR 扩增基因组目的片段 | 第43-45页 |
·RT-PCR 目的产物回收 | 第45页 |
·限制性酶切及电泳分析 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·讨论与小结 | 第49-52页 |
第四章 黄瓜花叶病毒RNA3 序列测定与分析 | 第52-64页 |
·材料与方法 | 第52-58页 |
·样品 | 第52页 |
·酶与试剂 | 第52页 |
·双链RNA 的提取 | 第52-53页 |
·双链RNA 的回收 | 第53页 |
·M-SPAT 法获得dsRNA cDNA 及其PCR 产物 | 第53-55页 |
·连接反应 | 第55页 |
·CaCl_2 法感受态细胞制备 | 第55-56页 |
·重组质粒的转化 | 第56页 |
·碱法制备重组质粒DNA | 第56-57页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第57页 |
·序列测定及分析、同源性比较和进化树的构建 | 第57-58页 |
·确定RNA3 CP 基因MspⅠ酶切位点 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-62页 |
·dsRNA 提取及SPAT 扩增 | 第58-59页 |
·重组质粒克隆及酶切鉴定 | 第59页 |
·序列同源性比较 | 第59-60页 |
·核酸序列进化树分析 | 第60-62页 |
·酶切位点比对 | 第62页 |
·讨论与小结 | 第62-64页 |
总结与展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
附录:重要溶液的配制 | 第71-74页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第74页 |