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沪杭地区番茄上黄瓜花叶病毒基因多态性的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
目录第12-15页
第一章 文献综述第15-26页
   ·番茄第15页
   ·番茄病毒病及表现症状第15-16页
   ·番茄病毒病的主要毒源及在我国的分布状况第16-18页
   ·黄瓜花叶病毒第18-21页
     ·黄瓜花叶病毒生物学特点第18页
     ·黄瓜花叶病毒的结构及基因组功能第18-20页
     ·黄瓜花叶病毒亚组分类及分布第20-21页
   ·番茄花叶病毒与烟草花叶病毒第21-22页
   ·病毒检测方法第22-23页
   ·病毒序列测定与分析研究进展第23-24页
   ·本文的研究目的与意义第24-26页
     ·研究目的及意义第24-25页
     ·研究内容第25-26页
第二章 田间番茄样品的病毒检测第26-40页
   ·同时检测多种病毒的多重RT-PCR 方法第26-30页
       ·样品采集第26页
     ·毒源保存及症状记录第26-27页
     ·材料与方法第27-30页
   ·酶联免疫检测(ELISA)第30-31页
     ·材料与方法第30-31页
   ·M-RT-PCR 和DAS-ELISA 灵敏性试验第31-33页
     ·RT-PCR 灵敏性试验第31-32页
     ·DAS-ELISA 灵敏性试验第32-33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·转接后症状记录第33-34页
     ·田间番茄样品的多重RT-PCR 检测第34-35页
     ·ELISA 检测第35-36页
     ·灵敏性试验第36-37页
   ·讨论与小结第37-40页
第三章 CMV 基因组亚组分类及天然假重组体鉴定第40-52页
   ·引物及限制性内切酶第40-43页
     ·引物设计第40-41页
     ·限制性内切酶第41-43页
   ·材料与方法第43-46页
     ·酶与试剂第43页
     ·样品第43页
     ·总RNA 的提取第43页
     ·RT-PCR 扩增基因组目的片段第43-45页
     ·RT-PCR 目的产物回收第45页
     ·限制性酶切及电泳分析第45-46页
   ·结果与分析第46-49页
   ·讨论与小结第49-52页
第四章 黄瓜花叶病毒RNA3 序列测定与分析第52-64页
   ·材料与方法第52-58页
     ·样品第52页
     ·酶与试剂第52页
     ·双链RNA 的提取第52-53页
     ·双链RNA 的回收第53页
     ·M-SPAT 法获得dsRNA cDNA 及其PCR 产物第53-55页
     ·连接反应第55页
     ·CaCl_2 法感受态细胞制备第55-56页
     ·重组质粒的转化第56页
     ·碱法制备重组质粒DNA第56-57页
     ·重组质粒的酶切鉴定第57页
     ·序列测定及分析、同源性比较和进化树的构建第57-58页
     ·确定RNA3 CP 基因MspⅠ酶切位点第58页
   ·结果与分析第58-62页
     ·dsRNA 提取及SPAT 扩增第58-59页
     ·重组质粒克隆及酶切鉴定第59页
     ·序列同源性比较第59-60页
     ·核酸序列进化树分析第60-62页
     ·酶切位点比对第62页
   ·讨论与小结第62-64页
总结与展望第64-66页
参考文献第66-70页
致谢第70-71页
附录:重要溶液的配制第71-74页
攻读硕士学位期间的研究成果第74页

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