中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9页 |
1 前言 | 第10-19页 |
1.1 猪冠状病毒性腹泻的流行特征及其危害 | 第10-13页 |
1.1.1 猪流行性腹泻的流行特征及其危害 | 第10-12页 |
1.1.2 猪传染性胃肠炎的流行特征及其危害 | 第12-13页 |
1.2 猪腹泻冠状病毒病原学特征 | 第13-15页 |
1.3 猪腹泻冠状病毒感染诊断方法研究进展 | 第15-18页 |
1.3.1 常规病原学诊断 | 第15-17页 |
1.3.2 病原的快速检测方法 | 第17-18页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-26页 |
2.1 材料 | 第19-21页 |
2.1.1 临床样品 | 第19页 |
2.1.2 病毒及细胞 | 第19页 |
2.1.3 抗体制剂与酶制剂 | 第19页 |
2.1.4 质粒与工程菌 | 第19页 |
2.1.5 引物设计与合成 | 第19-20页 |
2.1.6 试剂 | 第20页 |
2.1.7 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-26页 |
2.2.1 病料样品的处理 | 第21页 |
2.2.2 培养液及培养基配制 | 第21页 |
2.2.3 猪腹泻冠状病毒核酸RT-PCR扩增及测序 | 第21-23页 |
2.2.4 PCR产物纯化与回收 | 第23页 |
2.2.5 目的基因片段与pMD18-T载体的连接与转化 | 第23-24页 |
2.2.6 PCR产物测序鉴定 | 第24页 |
2.2.7 TGEV病毒的分离培养 | 第24页 |
2.2.8 TGEV病毒的鉴定 | 第24-26页 |
3 结果与分析 | 第26-33页 |
3.1 临床腹泻样本RT-PCR扩增结果 | 第26-27页 |
3.2 腹泻粪便样品TGEV病毒分离培养 | 第27-28页 |
3.3 TGEV细胞培养物病毒鉴定 | 第28-33页 |
3.3.1 TGEV分离毒细胞病变特征 | 第28页 |
3.3.2 TGEV分离毒不同代次RT-PCR扩增结果 | 第28-29页 |
3.3.3 TGEV分离毒细胞培养物间接免疫荧光鉴定 | 第29页 |
3.3.4 TGEV分离毒电镜观察结果 | 第29-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
4.1 有关内蒙古地区部分养猪场仔猪腹泻病毒感染情况 | 第33-34页 |
4.2 有关PEDV和TGEV检测靶基因的选择 | 第34页 |
4.3 有关TGEV分离与鉴定 | 第34-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第41页 |