摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 汉防己甲素对胃癌细胞的抑制作用 | 第14-23页 |
1 实验材料 | 第14-15页 |
1.1 实验细胞 | 第14页 |
1.2 实验试剂 | 第14页 |
1.3 主要设备 | 第14-15页 |
2 实验方法 | 第15-17页 |
2.1 细胞常规培养 | 第15-16页 |
2.2 WST-1 实验检测细胞增殖能力 | 第16页 |
2.3 流式细胞仪检测汉防己甲素对胃癌细胞周期的影响 | 第16-17页 |
2.4 流式细胞仪检测汉防己甲素对胃癌细胞凋亡的影响 | 第17页 |
2.5 统计学数据分析 | 第17页 |
3 实验结果 | 第17-22页 |
3.1 汉防己甲素对胃癌SGC-7901、HGC-27 细胞增殖的抑制作用 | 第17-19页 |
3.2 汉防己甲素对胃癌SGC-7901、HGC-27 的细胞周期的影响 | 第19-20页 |
3.3 汉防己甲素对胃癌SGC-7901、HGC-27 的细胞凋亡的影响 | 第20-22页 |
4 讨论 | 第22-23页 |
第二部分 miRNA-mRNA差异表达与汉防己甲素抑制胃癌细胞增殖关系的研究 | 第23-34页 |
1 实验材料 | 第23-24页 |
1.1 实验细胞 | 第23页 |
1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
1.3 实验仪器 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-28页 |
2.1 总RNA的提取 | 第24页 |
2.2 琼脂糖凝胶电泳检测RNA的质量 | 第24-25页 |
2.3 样品miRNA文库构建、测序 | 第25-26页 |
2.4 样品RNA-Seq文库构建、测序 | 第26页 |
2.5 miRNA和miRNA-seq的综合分析 | 第26页 |
2.6 Real-time RT-PCR验证结果中部分差异表达的miRNA | 第26-27页 |
2.7 统计学数据分析 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-32页 |
3.1 样品的质量检测 | 第28-29页 |
3.2 miRNA的分析结果 | 第29页 |
3.3 Real-time RT-PCR验证差异表达的miRNA | 第29-30页 |
3.4 RNA-Seq的分析结果 | 第30页 |
3.5 共表达分析和相关性分析 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
第三部分 miR-1248 inhibitor、miR-193b-3p mimic在胃癌细胞系中的功能研究 | 第34-52页 |
1 实验材料 | 第34-35页 |
1.1 实验细胞 | 第34页 |
1.2 实验试剂 | 第34-35页 |
1.3 实验设备 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-40页 |
2.1 miRNA溶液的配制及保存 | 第35页 |
2.2 WST-1 实验检测细胞增殖能力 | 第35-36页 |
2.3 miRNA的瞬时转染 | 第36页 |
2.4 流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡的影响 | 第36-37页 |
2.5 细胞划痕实验 | 第37页 |
2.6 Transwell迁移实验 | 第37-38页 |
2.7 Transwell侵袭实验 | 第38-40页 |
2.8 统计学数据分析 | 第40页 |
3 实验结果 | 第40-51页 |
3.1 miRNA对胃癌细胞增殖的抑制作用 | 第40-41页 |
3.2 miRNA对胃癌细胞凋亡的影响 | 第41-45页 |
3.3 划痕实验--miRNA对胃癌细胞迁移能力的影响 | 第45-46页 |
3.4 Transwell实验--miRNA对胃癌细胞迁移能力的影响 | 第46-48页 |
3.5 Transwell实验--miRNA对胃癌细胞侵袭能力的影响 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
总结 | 第52-53页 |
论文研究的主要创新点 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
硕士期间发表的论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |