| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 内质网应激 | 第13-18页 |
| 1.1.1 内质网与内质网应激 | 第13-14页 |
| 1.1.2 未折叠蛋白反应的分子机制 | 第14-15页 |
| 1.1.3 内质网分子伴侣蛋白 | 第15-16页 |
| 1.1.4 内质网应激与病毒感染 | 第16-18页 |
| 1.2 P58IPK/DNAJC3 | 第18-20页 |
| 1.2.1 P58IPK的结构与功能 | 第18-19页 |
| 1.2.2 P58IPK与未折叠蛋白反应 | 第19页 |
| 1.2.3 P58IPK与病毒感染 | 第19-20页 |
| 1.3 细胞自噬 | 第20-22页 |
| 1.3.1 细胞自噬的分类和生物学功能 | 第20-21页 |
| 1.3.2 细胞自噬的信号调节 | 第21页 |
| 1.3.3 细胞自噬与病毒感染 | 第21-22页 |
| 1.4 内质网应激与细胞自噬概述 | 第22-25页 |
| 1.4.1 未折叠蛋白反应与细胞自噬 | 第22-23页 |
| 1.4.2 Ca~(2+)信号通路介导的自噬 | 第23-24页 |
| 1.4.3 内质网应激经由Bcl-2 家族蛋白调节自噬 | 第24-25页 |
| 1.5 猪圆环病毒2型（PCV2）研究进展 | 第25-27页 |
| 1.5.1 PCV2感染与内质网应激 | 第25页 |
| 1.5.2 PCV2感染与分子伴侣蛋白 | 第25-26页 |
| 1.5.3 PCV2感染与细胞自噬 | 第26-27页 |
| 2 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 3 材料与方法 | 第28-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-33页 |
| 3.1.1 细胞、毒株、菌株 | 第28页 |
| 3.1.2 载体与质粒 | 第28-29页 |
| 3.1.3 工具酶与主要试剂 | 第29-30页 |
| 3.1.4 抗体、siRNA及主要化学试剂 | 第30页 |
| 3.1.5 培养基与抗生素及其配制 | 第30-31页 |
| 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第31-32页 |
| 3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第32-33页 |
| 3.1.8 分子生物学分析软件 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 3.2.1 PK-15 细胞培养 | 第33页 |
| 3.2.2 病毒扩繁与感染 | 第33-35页 |
| 3.2.3 真核过表达质粒的构建 | 第35-40页 |
| 3.2.4 药物处理 | 第40页 |
| 3.2.5 免疫印迹 | 第40-41页 |
| 3.2.6 siRNA及质粒转染 | 第41-43页 |
| 3.2.7 实时荧光定量PCR | 第43-44页 |
| 3.2.8 统计学方法 | 第44-45页 |
| 4 结果与分析 | 第45-60页 |
| 4.1 PCV2感染诱导内质网应激并激活PERK/eIF2α 通路 | 第45-48页 |
| 4.1.1 PCV2感染PK15细胞上调GRP78蛋白表达 | 第45-46页 |
| 4.1.2 PCV2感染PK15细胞激活PERK/eIF2α 通路 | 第46-47页 |
| 4.1.3 PCV2感染PK15细胞后期P58IPK表达下调 | 第47-48页 |
| 4.1.4 PCV2感染PK15细胞不依赖caspase-12 途径介导的凋亡 | 第48页 |
| 4.2 PCV2感染诱导细胞自噬 | 第48-50页 |
| 4.2.1 PCV2感染PK15细胞上调Beclin1及LC3-Ⅱ蛋白表达 | 第48-50页 |
| 4.2.2 PCV2感染PK15细胞下调p62蛋白表达 | 第50页 |
| 4.3 PCV2感染通过激活PERK/eIF2α 通路诱导自噬 | 第50-55页 |
| 4.3.1 PERK抑制剂（GSK2606414）下调PCV2诱导的p-e IF2α 及LC3-Ⅱ蛋白表达 | 第50-52页 |
| 4.3.2 siRNA干扰PERK下调PCV2诱导的p-eIF2α、ATG5-ATG12、LC3-Ⅱ蛋白表达 | 第52-54页 |
| 4.3.3 siRNA干扰PERK下调PCV2诱导的CHOP蛋白表达 | 第54-55页 |
| 4.4 过表达P58IPK抑制PCV2感染诱导的细胞自噬 | 第55-60页 |
| 4.4.1 猪P58IPK真核过表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 4.4.2 过表达P58IPK下调PCV2诱导的p-eIF2α 蛋白表达 | 第56-58页 |
| 4.4.3 过表达P58IPK下调PCV2诱导的ATG5-ATG12及LC3-Ⅱ蛋白表达 | 第58-60页 |
| 5 讨论 | 第60-64页 |
| 5.1 PCV2感染诱导内质网应激 | 第61页 |
| 5.2 PCV2感染激活PERK/eIF2α 通路 | 第61-62页 |
| 5.3 PCV2感染后期抑制P58IPK表达 | 第62页 |
| 5.4 PCV2感染通过激活PERK/e IF2α 通路诱导细胞自噬 | 第62-63页 |
| 5.5 过表达P58IPK抑制PCV2感染诱导的细胞自噬 | 第63-64页 |
| 6 小结 | 第64-65页 |
| 6.1 结论 | 第64页 |
| 6.2 研究特色与创新 | 第64页 |
| 6.3 进一步研究内容 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
