| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 莲藕 | 第12-14页 |
| 1.1.1 莲藕概况 | 第12-13页 |
| 1.1.2 莲藕食用及药用价值 | 第13-14页 |
| 1.2 多酚氧化酶概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 PPO基本情况 | 第14页 |
| 1.2.2 PPO的定位与分布 | 第14-15页 |
| 1.2.3 PPO的结构 | 第15-16页 |
| 1.2.4 PPO的生理作用 | 第16页 |
| 1.2.5 酶促褐变机理 | 第16-17页 |
| 1.2.6 PPO活性抑制方法概述 | 第17-18页 |
| 1.3 酵母双杂交系统 | 第18-22页 |
| 1.3.1 酵母双杂交系统概述 | 第18页 |
| 1.3.2 酵母双杂交系统的完善 | 第18-19页 |
| 1.3.3 酵母双杂交系统的应用 | 第19-22页 |
| 第二章 试验方案 | 第22-24页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第22页 |
| 2.2 研究内容与技术路线 | 第22-24页 |
| 2.2.1 研究内容 | 第22-23页 |
| 2.2.2 技术路线 | 第23-24页 |
| 第三章 莲藕酵母双杂交诱饵载体PGBKT7-PPO的构建与检测 | 第24-37页 |
| 3.1 材料与方法 | 第24-26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 3.1.2 菌株及质粒 | 第24页 |
| 3.1.3 常用试剂及试剂盒 | 第24页 |
| 3.1.4 引物合成与测序 | 第24页 |
| 3.1.5 常用试剂及培养基的配制 | 第24-25页 |
| 3.1.6 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 3.2 试验方法 | 第26-31页 |
| 3.2.1 莲藕芽尖总RNA的提取（CTAB法） | 第26页 |
| 3.2.2 cDNA第一条链合成（反转录试剂盒） | 第26-27页 |
| 3.2.3 对合成的cDNA质量进行初步检测 | 第27页 |
| 3.2.4 目的基因的克隆 | 第27-28页 |
| 3.2.5 目的片段与T-vector PMD19（simple）的连接 | 第28页 |
| 3.2.6 连接产物的转化 | 第28-29页 |
| 3.2.7 菌落PCR检测 | 第29页 |
| 3.2.8 诱饵载体构建 | 第29-31页 |
| 3.3 结果分析 | 第31-35页 |
| 3.3.1 RNA提取 | 第31页 |
| 3.3.2 cDNA质量检测结果 | 第31页 |
| 3.3.3 莲藕PPO基因PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| 3.3.4 PMD19-T-PPO（simple）测序结果 | 第32-33页 |
| 3.3.5 提取PMD19-T-PPO（simple）及pGBKT7质粒与双酶切结果 | 第33-34页 |
| 3.3.6 诱饵质粒pGBKT7-PPO提取及双酶切鉴定结果 | 第34页 |
| 3.3.7 AH109中重组子PGBKT7-PPO的毒性检测及自激活试验 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 莲藕CDNA文库的构建 | 第37-45页 |
| 4.1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 4.1.2 菌株及质粒 | 第37页 |
| 4.1.3 常用试剂及试剂盒 | 第37页 |
| 4.1.4 常用试剂及培养基的配制 | 第37页 |
| 4.1.5 引物 | 第37-38页 |
| 4.1.6 主要仪器设备 | 第38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 4.2.1 整株莲藕RNA提取方法 | 第38页 |
| 4.2.2 cDNA的合成 | 第38-40页 |
| 4.2.3 酵母双杂交文库的构建 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-44页 |
| 4.3.1 整株莲藕RNA提取结果 | 第41页 |
| 4.3.2 ds cDNA的合成及纯化结果 | 第41-43页 |
| 4.3.3 cDNA文库构建及质量检测 | 第43-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-56页 |
| 附录 1 | 第56-58页 |
| 附录 2 | 第58-59页 |
| 缩略词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
