摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 引言 | 第12-23页 |
1.1 非洲猪瘟发生和流行概况 | 第12页 |
1.2 病原学 | 第12-13页 |
1.3 流行病学 | 第13-14页 |
1.3.1 宿主和传播途径 | 第13-14页 |
1.3.2 传播方式 | 第14页 |
1.3.3 分子流行病学 | 第14页 |
1.4 免疫与疫苗研究 | 第14-16页 |
1.4.1 ASFV非特异性免疫 | 第14-15页 |
1.4.2 ASFV特异性免疫 | 第15页 |
1.4.3 疫苗研究 | 第15-16页 |
1.5 检测诊断方法 | 第16-22页 |
1.5.1 重组酶聚合酶扩增技术(RPA) | 第16-22页 |
1.5.1.1 技术原理 | 第17页 |
1.5.1.2 引物、探针设计 | 第17-18页 |
1.5.1.3 扩增产物检测方式 | 第18-19页 |
1.5.1.4 RPA技术的应用 | 第19-22页 |
1.5.1.5 RPA技术与其他恒温扩增技术的对比 | 第22页 |
1.6 研究目的意义 | 第22-23页 |
2 非洲猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)基础检测方法的建立 | 第23-34页 |
2.1 材料 | 第23页 |
2.1.1 实验材料及试剂 | 第23页 |
2.1.2 实验设备耗材 | 第23页 |
2.1.3 病毒株与临床样品 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-27页 |
2.2.1 构建质粒 | 第23-24页 |
2.2.2 ASFV基础RPA引物和探针设计 | 第24-25页 |
2.2.3 ASFV基础RPA引物筛选及反应条件优化 | 第25-26页 |
2.2.4 ASFV基础RPA检测法的灵敏性试验 | 第26页 |
2.2.5 ASFV基础RPA检测法的特异性试验 | 第26-27页 |
2.2.6 ASFV基础RPA检测法的稳定性试验 | 第27页 |
2.2.7 ASFV基础RPA检测法样品检测 | 第27页 |
2.3 结果分析 | 第27-32页 |
2.3.1 拷贝数计算 | 第27页 |
2.3.2 ASFV基础RPA筛选引物结果 | 第27-28页 |
2.3.3 ASFV基础RPA反应条件的优化结果 | 第28-29页 |
2.3.4 ASFV基础RPA检测法的灵敏性试验结果 | 第29-30页 |
2.3.5 ASFV基础RPA检测法的特异性试验结果 | 第30-31页 |
2.3.6 ASFV基础RPA检测法的稳定性试验结果 | 第31-32页 |
2.3.7 ASFV基础RPA检测法样品检测结果 | 第32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
3 非洲猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)探针检测方法的建立 | 第34-45页 |
3.1 材料 | 第34页 |
3.1.1 实验材料及试剂 | 第34页 |
3.1.2 实验设备耗材 | 第34页 |
3.1.3 病毒株与临床样品 | 第34页 |
3.2 方法 | 第34-37页 |
3.2.1 构建质粒 | 第34页 |
3.2.2 ASFV探针法RPA引物和探针设计 | 第34-35页 |
3.2.3 ASFV探针法RPA引物筛选及反应条件的优化 | 第35-36页 |
3.2.4 ASFV探针法RPA检测方法灵敏性试验 | 第36页 |
3.2.5 ASFV探针法RPA检测方法特异性试验 | 第36-37页 |
3.2.6 ASFV探针法RPA检测方法重复性试验 | 第37页 |
3.2.7 探针法RPA样品检测 | 第37页 |
3.2.8 统计学分析 | 第37页 |
3.3 结果分析 | 第37-43页 |
3.3.1 拷贝数计算 | 第37页 |
3.3.2 ASFV探针法RPA引物筛选结果 | 第37-38页 |
3.3.3 ASFV探针法RPA反应条件优化结果 | 第38-39页 |
3.3.4 ASFV探针法RPA检测方法灵敏性试验结果 | 第39-41页 |
3.3.5 ASFV探针法RPA检测方法特异性试验结果 | 第41-42页 |
3.3.6 ASFV探针法RPA检测方法重复性试验结果 | 第42-43页 |
3.3.7 探针法RPA样品检测结果 | 第43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
4 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
作者简介 | 第53页 |