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非洲猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增(RPA)方法的建立

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 引言第12-23页
    1.1 非洲猪瘟发生和流行概况第12页
    1.2 病原学第12-13页
    1.3 流行病学第13-14页
        1.3.1 宿主和传播途径第13-14页
        1.3.2 传播方式第14页
        1.3.3 分子流行病学第14页
    1.4 免疫与疫苗研究第14-16页
        1.4.1 ASFV非特异性免疫第14-15页
        1.4.2 ASFV特异性免疫第15页
        1.4.3 疫苗研究第15-16页
    1.5 检测诊断方法第16-22页
        1.5.1 重组酶聚合酶扩增技术(RPA)第16-22页
            1.5.1.1 技术原理第17页
            1.5.1.2 引物、探针设计第17-18页
            1.5.1.3 扩增产物检测方式第18-19页
            1.5.1.4 RPA技术的应用第19-22页
            1.5.1.5 RPA技术与其他恒温扩增技术的对比第22页
    1.6 研究目的意义第22-23页
2 非洲猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)基础检测方法的建立第23-34页
    2.1 材料第23页
        2.1.1 实验材料及试剂第23页
        2.1.2 实验设备耗材第23页
        2.1.3 病毒株与临床样品第23页
    2.2 方法第23-27页
        2.2.1 构建质粒第23-24页
        2.2.2 ASFV基础RPA引物和探针设计第24-25页
        2.2.3 ASFV基础RPA引物筛选及反应条件优化第25-26页
        2.2.4 ASFV基础RPA检测法的灵敏性试验第26页
        2.2.5 ASFV基础RPA检测法的特异性试验第26-27页
        2.2.6 ASFV基础RPA检测法的稳定性试验第27页
        2.2.7 ASFV基础RPA检测法样品检测第27页
    2.3 结果分析第27-32页
        2.3.1 拷贝数计算第27页
        2.3.2 ASFV基础RPA筛选引物结果第27-28页
        2.3.3 ASFV基础RPA反应条件的优化结果第28-29页
        2.3.4 ASFV基础RPA检测法的灵敏性试验结果第29-30页
        2.3.5 ASFV基础RPA检测法的特异性试验结果第30-31页
        2.3.6 ASFV基础RPA检测法的稳定性试验结果第31-32页
        2.3.7 ASFV基础RPA检测法样品检测结果第32页
    2.4 讨论第32-34页
3 非洲猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)探针检测方法的建立第34-45页
    3.1 材料第34页
        3.1.1 实验材料及试剂第34页
        3.1.2 实验设备耗材第34页
        3.1.3 病毒株与临床样品第34页
    3.2 方法第34-37页
        3.2.1 构建质粒第34页
        3.2.2 ASFV探针法RPA引物和探针设计第34-35页
        3.2.3 ASFV探针法RPA引物筛选及反应条件的优化第35-36页
        3.2.4 ASFV探针法RPA检测方法灵敏性试验第36页
        3.2.5 ASFV探针法RPA检测方法特异性试验第36-37页
        3.2.6 ASFV探针法RPA检测方法重复性试验第37页
        3.2.7 探针法RPA样品检测第37页
        3.2.8 统计学分析第37页
    3.3 结果分析第37-43页
        3.3.1 拷贝数计算第37页
        3.3.2 ASFV探针法RPA引物筛选结果第37-38页
        3.3.3 ASFV探针法RPA反应条件优化结果第38-39页
        3.3.4 ASFV探针法RPA检测方法灵敏性试验结果第39-41页
        3.3.5 ASFV探针法RPA检测方法特异性试验结果第41-42页
        3.3.6 ASFV探针法RPA检测方法重复性试验结果第42-43页
        3.3.7 探针法RPA样品检测结果第43页
    3.4 讨论第43-45页
4 结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-53页
作者简介第53页

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