| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 第一章 研究背景及意义 | 第16-36页 |
| 1.1 真菌纤维素酶及其生产工艺 | 第17-26页 |
| 1.1.1 纤维素酶生产菌株 | 第17-20页 |
| 1.1.2 真菌纤维素酶系统 | 第20-21页 |
| 1.1.3 真菌纤维素酶的生产 | 第21-26页 |
| 1.2 生物转化纤维素原料生产高附加值产品 | 第26-30页 |
| 1.3 葡萄糖酸钠的生产及用途 | 第30-34页 |
| 1.3.1 葡萄糖酸钠的制备方法 | 第30-33页 |
| 1.3.2 葡萄糖酸钠的用途 | 第33-34页 |
| 1.4 本论文的立题依据和研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 反复分批补料发酵策略提高草酸青霉RE-10纤维素酶容积生产效率 | 第36-56页 |
| 2.1 引言 | 第36-37页 |
| 2.2 材料和方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 菌株 | 第37页 |
| 2.2.2 培养基和培养条件 | 第37-38页 |
| 2.2.3 培养基优化 | 第38-40页 |
| 2.2.4 发酵实验 | 第40页 |
| 2.2.5 酶活分析及蛋白浓度测定 | 第40-42页 |
| 2.2.6 聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42页 |
| 2.2.7 DCCR糖化实验 | 第42页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第42-52页 |
| 2.3.1 PBD筛选影响产酶的显著因素 | 第42-44页 |
| 2.3.2 RSM分析显著影响因素间的交互作用 | 第44-45页 |
| 2.3.3 在7.5 L发酵罐上验证优化培养基 | 第45-47页 |
| 2.3.4 反复分批补料发酵策略生产纤维素酶 | 第47-50页 |
| 2.3.5 粗酶液糖化效果比较 | 第50-52页 |
| 本章小结 | 第52-56页 |
| 第三章 草酸青霉利用亚硫酸铵法制浆废液补料发酵生产纤维素酶 | 第56-80页 |
| 3.1 引言 | 第56-57页 |
| 3.2 材料和方法 | 第57-60页 |
| 3.2.1 菌株 | 第57页 |
| 3.2.2 培养基和培养条件 | 第57页 |
| 3.2.3 NH_4~+浓度测定 | 第57-58页 |
| 3.2.4 发酵实验 | 第58页 |
| 3.2.5 蛋白质组学分析 | 第58-60页 |
| 3.2.6 酶活分析及蛋白浓度测定 | 第60页 |
| 3.2.7 DCCR糖化实验 | 第60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-76页 |
| 3.3.1 亚铵黑液成分分析 | 第60-61页 |
| 3.3.2 亚铵黑液对生长及摇瓶发酵产酶的影响 | 第61-63页 |
| 3.3.3 不同策略流加亚铵黑液补料发酵生产纤维素酶 | 第63-67页 |
| 3.3.4 不同发酵策略生产的粗酶液糖化效果比较 | 第67-68页 |
| 3.3.5 蛋白组学工具分析 | 第68-72页 |
| 3.3.6 里氏木霉SN1流加亚铵黑液补料发酵生产纤维素酶 | 第72-74页 |
| 3.3.7 提高草酸青霉纤维素酶稳定性 | 第74-76页 |
| 本章小结 | 第76-80页 |
| 第四章 双酶共固定化催化纤维素水解液生产葡萄糖酸钠 | 第80-102页 |
| 4.1 引言 | 第80-81页 |
| 4.2 材料和方法 | 第81-85页 |
| 4.2.1 菌株及培养条件 | 第81页 |
| 4.2.2 纤维素酶制备 | 第81-82页 |
| 4.2.3 糖化实验 | 第82页 |
| 4.2.4 葡萄糖氧化酶活力的测定 | 第82-83页 |
| 4.2.5 过氧化氢酶活力的测定 | 第83页 |
| 4.2.6 共固定葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶颗粒的制备 | 第83页 |
| 4.2.7 葡萄糖酸钠的测定 | 第83-85页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第85-100页 |
| 4.3.1 草酸青霉变速流加亚铵黑液补料发酵生产纤维素酶 | 第85-86页 |
| 4.3.2 DCCR分批糖化工艺的优化 | 第86-88页 |
| 4.3.3 DCCR补料分批糖化工艺的优化 | 第88-91页 |
| 4.3.4 GOD和CAT催化DCCR水解液生产葡萄糖酸钠 | 第91-94页 |
| 4.3.5 双载体共固定GOD和CAT | 第94-97页 |
| 4.3.6 GOD-CAT共固定化酶催化DCCR水解液生产葡萄糖酸钠 | 第97-100页 |
| 本章小结 | 第100-102页 |
| 第五章 以草酸青霉为底盘构建葡萄糖酸钠CBP生产工程菌株 | 第102-118页 |
| 5.1 引言 | 第102-103页 |
| 5.2 材料和方法 | 第103-111页 |
| 5.2.1 菌株及质粒培养条件 | 第103-104页 |
| 5.2.2 培养基 | 第104页 |
| 5.2.3 常用溶液、试剂及实验仪器 | 第104-105页 |
| 5.2.4 草酸青霉原生质体的制备与转化 | 第105-107页 |
| 5.2.5 菌株构建 | 第107-110页 |
| 5.2.6 两阶段温度控制策略 | 第110页 |
| 5.2.7 酶活测定及葡萄糖酸钠产量测定 | 第110-111页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第111-115页 |
| 5.3.1 草酸青霉A11△异源表达GOD和CAT | 第111-113页 |
| 5.3.2 在P.oxalicum 114-2中同时表达GOD和CAT | 第113-114页 |
| 5.3.3 两阶段温度控制策略生产葡萄糖酸钠 | 第114-115页 |
| 本章小结 | 第115-118页 |
| 论文创新性结果总结与展望 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-140页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 附件 | 第143-152页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第152页 |
