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干旱胁迫下咖啡酸对黄瓜基因组DNA甲基化的影响及一个甲基化差异基因的功能分析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 引言第12-21页
   ·研究干旱胁迫的意义第12页
   ·干旱胁迫对植物的影响第12-15页
     ·干旱胁迫对植物生长的影响第12-13页
     ·干旱胁迫对植物抗氧化酶的影响第13-14页
     ·干旱胁迫对植物体内脯氨酸和可溶性糖含量的影响第14-15页
   ·植物DNA甲基化的研究进展第15-17页
     ·DNA甲基化的形成机制及生物学功能第15-16页
     ·DNA甲基化常用的检测方法第16-17页
     ·干旱胁迫对DNA甲基化的影响第17页
   ·外源咖啡酸(CA)预处理缓解干旱胁迫的研究进展第17页
   ·外源H_2O_2对植物逆境胁迫的缓解作用及黄瓜转基因的研究现状第17-19页
     ·H_2O_2对植物逆境胁迫的缓解作用第17-18页
     ·黄瓜转基因的研究现状第18-19页
     ·黄瓜遗传转化技术的研究第19页
   ·本研究的目的意义第19-21页
2 材料与方法第21-38页
   ·实验材料第21页
     ·植物材料第21页
     ·菌株与质粒第21页
     ·酶与各种生化试剂第21页
   ·方法第21-38页
     ·外源CA对黄瓜幼苗干旱胁迫的缓解作用第22-27页
       ·咖啡酸缓解黄瓜干旱胁迫时的最适浓度确定第22页
       ·黄瓜幼苗生长指标的测定第22页
       ·丙二醛(MDA)含量测定第22页
       ·过氧化氢(H_2O_2)含量的测定第22页
       ·O2.-含量的测定第22-23页
       ·黄瓜叶片抗氧化酶的活性测定第23-24页
       ·黄瓜叶片Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和GPX基因的表达分析第24-26页
       ·黄瓜叶片脯氨酸可溶性糖含量的测定第26-27页
     ·外源CA对干旱胁迫下黄瓜幼苗DNA甲基化的影响第27-33页
       ·黄瓜基因组DNA的提取、纯化及酶切第27-28页
       ·黄瓜基因组DNA的MSAP分析第28-33页
     ·黄瓜甲基化差异基因的表达分析第33-34页
     ·黄瓜甲基化差异基因反义基因的遗传转化第34-38页
       ·黄瓜甲基化差异基因反义基因的扩增、克隆及序列测定第34-35页
       ·反义表达载体的构建第35页
       ·碱法大量提取反义表达载体PBI121-HG-2(-)质粒第35-36页
       ·转基因植株的PCR筛选第36-37页
       ·转基因阳性植株的生理生化指标测定第37-38页
3 结果与分析第38-55页
   ·外源CA预处理对干旱胁迫下黄瓜幼苗的缓解作用第38-43页
     ·不同浓度的外源CA对干旱胁迫下黄瓜幼苗的MDA及ROS含量的影响第38页
     ·干旱胁迫下外源CA对黄瓜幼苗生长状况的影响第38-39页
     ·干旱胁迫下外源CA对黄瓜叶片MDA、O2~(.-)及H_2O_2含量的影响第39-40页
     ·干旱胁迫下外源CA对黄瓜叶片抗氧化酶活性的影响第40-41页
     ·干旱胁迫下外源CA对Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和GPX表达量的影响第41-42页
     ·干旱胁迫下外源CA对抗氧化物水平的影响第42-43页
     ·外源CA对干旱胁迫下黄瓜叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响第43页
   ·外源CA对干旱胁迫下黄瓜叶片DNA甲基化的影响第43-47页
     ·基因组DNA的获取、酶切及PCR扩增第43-45页
     ·干旱胁迫下CA对黄瓜叶片DNA甲基化水平的影响第45-47页
   ·干旱胁迫下H_2O_2诱导的甲基化差异基因HG-2 的功能分析第47-55页
     ·干旱胁迫下H_2O_2诱导的甲基化差异基因HG-1 及HG-2 的表达分析第47-49页
     ·黄瓜甲基化差异基因HG-2 全长序列的克隆第49-50页
     ·黄瓜甲基化差异基因HG-2 反义表达载体的构建第50-51页
     ·转反义甲基化差异基因HG-2 植株的PCR鉴定第51-52页
     ·干旱胁迫下反义甲基化差异基因HG-2 的转化对黄瓜叶片形态的影响第52页
     ·干旱胁迫下反义甲基化差异基因HG-2 的转化对黄瓜叶片H_2O_2含量的影响第52页
     ·干旱胁迫下反义甲基化差异基因HG-2 的转化对黄瓜叶片抗氧化酶活性的影响第52-53页
     ·干旱胁迫下反义甲基化差异基因HG-2 的转化对黄瓜叶片抗氧化物水平的影响第53-55页
4 讨论第55-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-75页
致谢第75-76页
攻读学位期间发表论文情况第76页

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