符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-24页 |
·NAC转录因子研究进展 | 第14-18页 |
·NAC转录因子的结构及其分类 | 第15-16页 |
·NAC转录因子的生物学功能 | 第16-17页 |
·在分生组织及花器官发育中的作用 | 第16页 |
·在次生壁增厚过程中的作用 | 第16-17页 |
·在侧根形成中的作用 | 第17页 |
·在胁迫应答中的作用 | 第17-18页 |
·与病原胁迫相关 | 第17页 |
·与非生物胁迫相关 | 第17-18页 |
·高温胁迫对植物的影响 | 第18-20页 |
·高温胁迫对生物膜系统稳定性的影响 | 第18页 |
·高温胁迫对植物光合作用的影响 | 第18-19页 |
·高温胁迫对抗氧化系统的影响 | 第19页 |
·高温胁迫对蛋白质合成的影响 | 第19-20页 |
·植物耐热机制 | 第20-22页 |
·抗氧化机制 | 第20-21页 |
·渗透调节机制 | 第21-22页 |
·热激蛋白 | 第22页 |
·本研究的目的及其意义 | 第22-24页 |
2 材料和方法 | 第24-39页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·植物材料 | 第24页 |
·植物材料培养与处理 | 第24页 |
·菌株与载体 | 第24页 |
·酶与各种生化试剂 | 第24-25页 |
·PCR引物 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-39页 |
·植物总RNA提取 | 第25-26页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第26-27页 |
·番茄NAC1转录因子的克隆 | 第27-28页 |
·真核表达载体的构建及番茄转化 | 第28-33页 |
·回收 | 第28页 |
·连接 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
·转化及克隆筛选 | 第30页 |
·小量法提取质粒DNA | 第30-31页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第31页 |
·反义表达载体的构建 | 第31页 |
·根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备与转化 | 第31-32页 |
·农杆菌介导转化番茄 | 第32-33页 |
·SlNAC1转录因子的定位 | 第33-34页 |
·pBI122- SlNAC1-GFP表达载体的构建 | 第33页 |
·pBI122- SlNAC1-GFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第33-34页 |
·实时定量荧光PCR | 第34页 |
·转基因番茄植株的检测 | 第34-36页 |
·CTAB微量法提取基因组DNA | 第34-35页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第35页 |
·转基因植株的qRT-PCR分析 | 第35-36页 |
·生理指标的测定 | 第36-39页 |
·光合速率的测定 | 第36页 |
·叶绿素荧光参数的测定 | 第36页 |
·丙二醛含量和相对电导率的测定 | 第36页 |
·游离脯氨酸和可溶性糖的测定 | 第36-37页 |
·H_2O_2和O_2~(??)含量测定 | 第37页 |
·抗氧化酶活性的测定 | 第37-39页 |
3 结果与分析 | 第39-54页 |
·SlNAC1转录因子的分离和结构特征 | 第39-41页 |
·SlNAC1基因的克隆 | 第39页 |
·SlNAC1的序列分析 | 第39-41页 |
·SlNAC1蛋白的亚细胞定位 | 第41页 |
·SlNAC1基因在番茄中的遗传转化 | 第41-43页 |
·反义表达载体的构建 | 第41-42页 |
·转基因番茄植株的PCR鉴定 | 第42-43页 |
·转基因番茄植株的qRT-PCR鉴定 | 第43页 |
·抑制SlNAC1的表达降低番茄植株高温抗性 | 第43-54页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄幼苗生长的影响 | 第43-44页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄叶片鲜重和失水率的影响 | 第44-45页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄Pn和Fv/Fm的影响 | 第45-46页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株REC和MDA的影响 | 第46-47页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株脯氨酸和可溶性糖的影响 | 第47页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株ROS积累的影响 | 第47-48页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株抗氧化酶活性的影响 | 第48-50页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株抗氧化酶基因表达的影响 | 第50-51页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株热激蛋白响应基因表达的影响 | 第51页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株磷酸蔗糖合成酶(SPS)基因表达的影响 | 第51-52页 |
·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株气孔开度的影响 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第68页 |