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高温胁迫下番茄SlNAC1基因的功能分析

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 前言第14-24页
   ·NAC转录因子研究进展第14-18页
     ·NAC转录因子的结构及其分类第15-16页
     ·NAC转录因子的生物学功能第16-17页
       ·在分生组织及花器官发育中的作用第16页
       ·在次生壁增厚过程中的作用第16-17页
       ·在侧根形成中的作用第17页
     ·在胁迫应答中的作用第17-18页
       ·与病原胁迫相关第17页
       ·与非生物胁迫相关第17-18页
   ·高温胁迫对植物的影响第18-20页
     ·高温胁迫对生物膜系统稳定性的影响第18页
     ·高温胁迫对植物光合作用的影响第18-19页
     ·高温胁迫对抗氧化系统的影响第19页
     ·高温胁迫对蛋白质合成的影响第19-20页
   ·植物耐热机制第20-22页
     ·抗氧化机制第20-21页
     ·渗透调节机制第21-22页
     ·热激蛋白第22页
   ·本研究的目的及其意义第22-24页
2 材料和方法第24-39页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·植物材料培养与处理第24页
     ·菌株与载体第24页
     ·酶与各种生化试剂第24-25页
     ·PCR引物第25页
   ·实验方法第25-39页
     ·植物总RNA提取第25-26页
     ·cDNA第一条链的合成第26-27页
     ·番茄NAC1转录因子的克隆第27-28页
     ·真核表达载体的构建及番茄转化第28-33页
       ·回收第28页
       ·连接第28-29页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第29-30页
       ·转化及克隆筛选第30页
       ·小量法提取质粒DNA第30-31页
       ·重组质粒的双酶切鉴定第31页
       ·反义表达载体的构建第31页
       ·根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备与转化第31-32页
       ·农杆菌介导转化番茄第32-33页
     ·SlNAC1转录因子的定位第33-34页
       ·pBI122- SlNAC1-GFP表达载体的构建第33页
       ·pBI122- SlNAC1-GFP融合蛋白的亚细胞定位第33-34页
     ·实时定量荧光PCR第34页
     ·转基因番茄植株的检测第34-36页
       ·CTAB微量法提取基因组DNA第34-35页
       ·转基因植株的PCR检测第35页
       ·转基因植株的qRT-PCR分析第35-36页
     ·生理指标的测定第36-39页
       ·光合速率的测定第36页
       ·叶绿素荧光参数的测定第36页
       ·丙二醛含量和相对电导率的测定第36页
       ·游离脯氨酸和可溶性糖的测定第36-37页
       ·H_2O_2和O_2~(??)含量测定第37页
       ·抗氧化酶活性的测定第37-39页
3 结果与分析第39-54页
   ·SlNAC1转录因子的分离和结构特征第39-41页
     ·SlNAC1基因的克隆第39页
     ·SlNAC1的序列分析第39-41页
   ·SlNAC1蛋白的亚细胞定位第41页
   ·SlNAC1基因在番茄中的遗传转化第41-43页
     ·反义表达载体的构建第41-42页
     ·转基因番茄植株的PCR鉴定第42-43页
     ·转基因番茄植株的qRT-PCR鉴定第43页
   ·抑制SlNAC1的表达降低番茄植株高温抗性第43-54页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄幼苗生长的影响第43-44页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄叶片鲜重和失水率的影响第44-45页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄Pn和Fv/Fm的影响第45-46页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株REC和MDA的影响第46-47页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株脯氨酸和可溶性糖的影响第47页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株ROS积累的影响第47-48页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株抗氧化酶活性的影响第48-50页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株抗氧化酶基因表达的影响第50-51页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株热激蛋白响应基因表达的影响第51页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株磷酸蔗糖合成酶(SPS)基因表达的影响第51-52页
     ·抑制SlNAC1表达对高温胁迫下番茄植株气孔开度的影响第52-54页
4 讨论第54-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表论文情况第68页

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