黄瓜灰霉病PMA-qPCR方法及互作转录组学研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·黄瓜灰霉病及其病原菌 | 第10-13页 |
| ·灰霉病的危害与防治 | 第10页 |
| ·灰葡萄孢的致病机制 | 第10-13页 |
| ·侵入宿主表面 | 第10-11页 |
| ·侵入细胞壁杀死宿主细胞 | 第11页 |
| ·毒素 | 第11-12页 |
| ·草酸 | 第12页 |
| ·活性氧 | 第12页 |
| ·转化宿主组织 | 第12页 |
| ·酶类 | 第12-13页 |
| ·克服宿主的防御反应 | 第13页 |
| ·植物抵抗病原体的机制 | 第13-15页 |
| ·模式触发的免疫PTI | 第13-14页 |
| ·触发的免疫效应ETI | 第14-15页 |
| ·转录组测序研究植物病原体互作 | 第15-18页 |
| ·宿主或病原体转录组研究的发展 | 第15-17页 |
| ·转录组测序的优势 | 第17页 |
| ·病原体的转录组测序 | 第17-18页 |
| ·宿主的转录组测序 | 第18页 |
| ·转录调控对植物病原体互作的影响 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 黄瓜灰霉病PMA-qPCR诊断方法构建 | 第20-30页 |
| ·材料和方法 | 第20-25页 |
| ·供试材料 | 第20页 |
| ·主要试剂及设备 | 第20-21页 |
| ·试验方法 | 第21-25页 |
| ·灰葡萄孢菌P729特异基因的扩增 | 第21-22页 |
| ·目的条带的回收与纯化 | 第22页 |
| ·回收条带测序鉴定 | 第22页 |
| ·荧光定量PCR引物设计和特异性验证 | 第22-23页 |
| ·标准品的构建 | 第23-24页 |
| ·Real—time PCR标准曲线的建立 | 第24-25页 |
| ·实际样本的检测 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-29页 |
| ·灰葡萄孢菌P729基因的扩增 | 第25-26页 |
| ·荧光定量引物的特异性验证 | 第26-27页 |
| ·标准曲线的构建 | 第27-28页 |
| ·重复性分析 | 第28-29页 |
| ·实际样品的检测 | 第29页 |
| ·小结与讨论 | 第29-30页 |
| 3 黄瓜与灰葡萄孢菌互作转录组学分析 | 第30-72页 |
| ·实验材料与方法 | 第30-41页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂和设备 | 第30页 |
| ·黄瓜的培养和侵染 | 第30-31页 |
| ·黄瓜种子的消毒 | 第30-31页 |
| ·黄瓜的培养和侵染 | 第31页 |
| ·RNA的提取 | 第31页 |
| ·总RNA的质量检测 | 第31-33页 |
| ·文库的构建及上机检测 | 第33页 |
| ·数据分析 | 第33-36页 |
| ·测序质量评估 | 第34-35页 |
| ·数据过滤 | 第35页 |
| ·序列比对到参考基因组 | 第35页 |
| ·基因表达水平分析和差异表达分析 | 第35页 |
| ·差异基因的GO富集分析和KEGG富集分析 | 第35-36页 |
| ·差异基因定量验证 | 第36-41页 |
| ·结果 | 第41-68页 |
| ·测序数据过滤 | 第41-43页 |
| ·将序列比对到参考基因组 | 第43页 |
| ·差异基因分析 | 第43-51页 |
| ·植物和病原体的差异基因的GO富集分析 | 第51-58页 |
| ·黄瓜GO富集分析 | 第51-54页 |
| ·灰葡萄孢菌的GO富集分析 | 第54-58页 |
| ·植物和病原体的KEGG富集分析 | 第58-68页 |
| ·黄瓜的差异基因的KEGG富集分析 | 第58-64页 |
| ·灰葡萄孢菌的差异基因的KEGG富集分析 | 第64-68页 |
| ·差异基因的qPCR验证 | 第68页 |
| ·小结与讨论 | 第68-72页 |
| 4 定量模型分析转录调控驱动黄瓜-灰葡萄孢菌互作 | 第72-80页 |
| ·方法 | 第72-74页 |
| ·基于似然的混合模型 | 第72-73页 |
| ·通过EM算法估计 | 第73页 |
| ·实际数据 | 第73页 |
| ·假设检验 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-79页 |
| ·聚类分组 | 第74-76页 |
| ·富集结果分析 | 第76-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| 5 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 个人简介 | 第88-90页 |
| 导师简介 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92页 |