| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·PRRSV基因组结构 | 第12-13页 |
| ·PRRSV与天然免疫 | 第13-15页 |
| ·PRRSV nsp1α 结构与功能 | 第15-17页 |
| ·PRRSV与蛋白质组学 | 第17-18页 |
| ·重组慢病毒 | 第18-20页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-42页 |
| ·实验材料 | 第21-27页 |
| ·细胞、毒株与菌株 | 第21页 |
| ·载体与质粒 | 第21-22页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第22-23页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第23-24页 |
| ·相关缓冲液和试剂及其配制 | 第24-26页 |
| ·抗体、及主要化学试剂 | 第26页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第26页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-42页 |
| ·目的基因的扩增 | 第27页 |
| ·原核质粒的构建 | 第27页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第28-29页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第29-32页 |
| ·间接酶联免疫吸附试验（ELISA）筛选阳性克隆 | 第32-33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆（有限稀释法） | 第33页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第33-34页 |
| ·Western Blot检测分析 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的间接免疫荧光（IFA）验证 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体（腹水/细胞上清）分型的鉴定 | 第35页 |
| ·质粒转染 | 第35-36页 |
| ·重组慢病毒质粒构建 | 第36页 |
| ·重组慢病毒的包装 | 第36-37页 |
| ·重组慢病毒的验证 | 第37页 |
| ·用于蛋白质组学分析的细胞样品的制备 | 第37页 |
| ·全细胞蛋白质的提取 | 第37-38页 |
| ·蛋白质的酶解 | 第38页 |
| ·iTRAQ 4 plex试剂标记肽段 | 第38页 |
| ·SCX分离 | 第38-39页 |
| ·基于Triple TOF 5600的LC-MSMS分析 | 第39页 |
| ·生物信息学分析 | 第39-41页 |
| ·Western Blot验证蛋白组学数据 | 第41-42页 |
| 第4章 结果与分析 | 第42-54页 |
| ·PRRSV nsp1α 的表达与纯化 | 第42页 |
| ·PRRSV nsp1α 单克隆抗体的制备与验证 | 第42-45页 |
| ·PRRSV nsp1α 单克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
| ·IFA验证PRRSV nsp1α 单抗 | 第43页 |
| ·Western Blot验证PRRSV nsp1α 杂交瘤细胞上清 | 第43-44页 |
| ·PRRSV nsp1α 小鼠腹水的制备与验证 | 第44-45页 |
| ·PRRSV nsp1α 单克隆抗体的亚型鉴定 | 第45-46页 |
| ·PRRSV nsp1α 重组慢病毒的制备与验证 | 第46-47页 |
| ·PRRSV nsp1α 重组慢病毒的包装 | 第46-47页 |
| ·PRRSV nsp1α 重组慢病毒的验证 | 第47页 |
| ·PRRSV nsp1α 蛋白质组学数据的分析与验证 | 第47-54页 |
| ·差异蛋白的亚细胞定位 | 第48-49页 |
| ·差异蛋白的功能聚类 | 第49-51页 |
| ·差异蛋白的网络互作图 | 第51-52页 |
| ·Western Blot验证蛋白组学数据 | 第52-54页 |
| 第5章 分析与讨论 | 第54-58页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·iTRAQ蛋白组学技术的优缺点 | 第54页 |
| ·基因复制相关蛋白 | 第54-55页 |
| ·凋亡相关蛋白 | 第55-56页 |
| ·炎症相关蛋白 | 第56-57页 |
| ·结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 附表 | 第67-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
