摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-24页 |
·研究神经回路示踪系统的重要性 | 第12页 |
·神经回路示踪系统的传统方法及最新进展 | 第12-13页 |
·狂犬病毒及其在神经回路示踪系统中的应用 | 第13-14页 |
·狂犬病毒 | 第13页 |
·狂犬病毒在神经回路示踪系统中的应用 | 第13-14页 |
·水疱性口炎与狂犬病毒嵌合膜蛋白 | 第14页 |
·变色荧光蛋白 | 第14-16页 |
·Tet-on以及蛋白降解元件系统 | 第16-18页 |
·Tet-on调控元件 | 第16-17页 |
·蛋白降解元件 | 第17-18页 |
·CRISPR/Cas9 技术 | 第18-20页 |
·狂犬病毒的反向遗传操作系统 | 第20-21页 |
·腺相关病毒 | 第21页 |
·本课题的实验设计思路 | 第21-24页 |
2 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
3 材料与方法 | 第25-40页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·质粒、菌株、细胞系和实验动物 | 第25页 |
·主要的药品、试剂和仪器 | 第25页 |
·培养基及其配制 | 第25-26页 |
·缓冲液(溶液)及其配制 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-40页 |
·PCR扩增方法 | 第27页 |
·DNA纯化分离的方法 | 第27-29页 |
·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第29页 |
·脂质体转染细胞的方法 | 第29-30页 |
·潮霉素筛选稳定表达细胞系 | 第30-31页 |
·酶切后连接以及同源重组的方法 | 第31-32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第32页 |
·狂犬病毒的拯救和扩增 | 第32-34页 |
·狂犬病毒的浓缩 | 第34-35页 |
·鼠脑的立体定位注射 | 第35-36页 |
·腺相关病毒的包装 | 第36页 |
·病毒的滴度的测定 | 第36-37页 |
·小鼠心脏灌注 | 第37-38页 |
·鼠脑切片 | 第38-40页 |
4 结果与分析 | 第40-55页 |
·体外实验 | 第40-50页 |
·狂犬病毒的改造 | 第40-43页 |
·狂犬病毒G蛋白表达可调控系统的建立 | 第43-50页 |
·体内实验 | 第50-52页 |
·Tet-on与蛋白降解元件DD调控目的基因表达动物实验 | 第50-51页 |
·狂犬病毒SAD-?G-Slow FT-rtTA注射鼠脑的海马区域结果 | 第51-52页 |
·用水疱性口炎和狂犬病毒嵌合G蛋白包装狂犬病毒 | 第52-55页 |
·用病毒rAAV-CMV-VSV SAD G来辅助包装狂犬病毒 | 第52-53页 |
·B7B-VSV SAD G细胞系的构建 | 第53-55页 |
5 讨论 | 第55-58页 |
6 参考文献 | 第58-64页 |
致谢 | 第64页 |