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VSV-SAD嵌合糖蛋白狂犬假病毒及其可调控辅助腺相关病毒体系的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
缩略语表(Abbreviation)第11-12页
1 文献综述第12-24页
   ·研究神经回路示踪系统的重要性第12页
   ·神经回路示踪系统的传统方法及最新进展第12-13页
   ·狂犬病毒及其在神经回路示踪系统中的应用第13-14页
     ·狂犬病毒第13页
     ·狂犬病毒在神经回路示踪系统中的应用第13-14页
   ·水疱性口炎与狂犬病毒嵌合膜蛋白第14页
   ·变色荧光蛋白第14-16页
   ·Tet-on以及蛋白降解元件系统第16-18页
     ·Tet-on调控元件第16-17页
     ·蛋白降解元件第17-18页
   ·CRISPR/Cas9 技术第18-20页
   ·狂犬病毒的反向遗传操作系统第20-21页
   ·腺相关病毒第21页
   ·本课题的实验设计思路第21-24页
2 研究的目的与意义第24-25页
3 材料与方法第25-40页
   ·实验材料第25-27页
     ·质粒、菌株、细胞系和实验动物第25页
     ·主要的药品、试剂和仪器第25页
     ·培养基及其配制第25-26页
     ·缓冲液(溶液)及其配制第26-27页
   ·实验方法第27-40页
     ·PCR扩增方法第27页
     ·DNA纯化分离的方法第27-29页
     ·PCR产物或酶切产物的电泳检测第29页
     ·脂质体转染细胞的方法第29-30页
     ·潮霉素筛选稳定表达细胞系第30-31页
     ·酶切后连接以及同源重组的方法第31-32页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第32页
     ·狂犬病毒的拯救和扩增第32-34页
     ·狂犬病毒的浓缩第34-35页
     ·鼠脑的立体定位注射第35-36页
     ·腺相关病毒的包装第36页
     ·病毒的滴度的测定第36-37页
     ·小鼠心脏灌注第37-38页
     ·鼠脑切片第38-40页
4 结果与分析第40-55页
   ·体外实验第40-50页
     ·狂犬病毒的改造第40-43页
     ·狂犬病毒G蛋白表达可调控系统的建立第43-50页
   ·体内实验第50-52页
     ·Tet-on与蛋白降解元件DD调控目的基因表达动物实验第50-51页
     ·狂犬病毒SAD-?G-Slow FT-rtTA注射鼠脑的海马区域结果第51-52页
   ·用水疱性口炎和狂犬病毒嵌合G蛋白包装狂犬病毒第52-55页
     ·用病毒rAAV-CMV-VSV SAD G来辅助包装狂犬病毒第52-53页
     ·B7B-VSV SAD G细胞系的构建第53-55页
5 讨论第55-58页
6 参考文献第58-64页
致谢第64页

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