| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略语表（ABBREVIATION） | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-20页 |
| ·猪流行性腹泻的研究进展 | 第11-15页 |
| ·猪流行性腹泻的病原学 | 第11-14页 |
| ·猪流行性腹泻的流行病学 | 第14页 |
| ·猪流行性腹泻的临床症状和病理变化 | 第14页 |
| ·猪流行性腹泻的诊断和预防 | 第14-15页 |
| ·冠状病毒反向遗传技术研究进展 | 第15-18页 |
| ·BACs反向遗传操作系统 | 第16页 |
| ·体外cDNA连接法 | 第16-17页 |
| ·痘病毒载体系统 | 第17-18页 |
| ·冠状病毒复制子研究进展 | 第18-20页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·试验材料 | 第21-23页 |
| ·菌株与细胞 | 第21页 |
| ·质粒与载体 | 第21页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第21页 |
| ·培养基和抗生素的配置 | 第21-22页 |
| ·主要缓冲液和试剂及配制 | 第22页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第22-23页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第23页 |
| ·病毒基因组的反转录 | 第23-24页 |
| ·PCR | 第24-25页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第25-26页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第26-27页 |
| ·连接产物的转化 | 第27页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第27-29页 |
| ·细胞的转染 | 第29-31页 |
| 第4章 结果与分析 | 第31-49页 |
| ·PEDV AJ1102 株基因组全长CDNA的构建 | 第31-43页 |
| ·中间载体pBelo-AJ1102-5’-3’的构建 | 第31-35页 |
| ·CMV-A、B、D、G等片段亚克隆质粒的构建 | 第35-38页 |
| ·PEDV基因组全长cDNA的克隆 | 第38-43页 |
| ·全长质粒的验证 | 第43页 |
| ·PEDV复制子CDNA克隆的构建 | 第43-48页 |
| ·H、I片段亚克隆质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·PEDV复制子cDNA克隆的构建 | 第45-48页 |
| ·复制子的验证 | 第48-49页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·全长cDNA克隆的构建思路 | 第49-50页 |
| ·复制子cDNA克隆的构建思路 | 第50页 |
| ·研究中遇到问题及解决方法 | 第50-52页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60页 |