| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 目录 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·黄瓜花叶病毒 | 第14-16页 |
| ·黄瓜花叶病毒的基因组结构与功能 | 第14-15页 |
| ·黄瓜花叶病毒的传播与危害 | 第15-16页 |
| ·黄瓜花叶病毒 2b 蛋白 | 第16-18页 |
| ·黄瓜花叶病毒 2b 蛋白的亚细胞定位 | 第16页 |
| ·黄瓜花叶病毒 2b 蛋白的功能 | 第16-18页 |
| ·2b 蛋白的亚细胞定位与其功能的相关性 | 第18页 |
| ·RNA 沉默与沉默抑制子 | 第18-23页 |
| ·RNA 沉默 | 第18-20页 |
| ·抗病毒 RNA 沉默 | 第20页 |
| ·沉默抑制子 | 第20-23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| ·研究目的与意义 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 CMV 2b 蛋白的原核表达与纯化 | 第24-35页 |
| ·材料和方法 | 第24-32页 |
| ·质粒材料 | 第24页 |
| ·酶与试剂 | 第24-25页 |
| ·常规试剂的配置 | 第24-25页 |
| ·用于原核表达 2b 蛋白的克隆构建以及原核表达纯化 | 第25-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·构建用于原核表达 2b 蛋白克隆的结果 | 第32-33页 |
| ·原核表达与纯化结果 | 第33-34页 |
| ·小结与讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 CMV 2b 蛋白体外结合 sRNA 研究 | 第35-42页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·尼龙膜、超滤柱和 sRNA 合成 | 第35页 |
| ·酶与试剂 | 第35-36页 |
| ·常规试剂配置 | 第35-36页 |
| ·EMSA 检测 2b 蛋白与 sRNA 的结合能力 | 第36-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-40页 |
| ·Fny2b 和 LS2b 体外结合 sRNA 能力的检测 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 CMV 2b 蛋白体外结合 sRNA 的关键结构域研究 | 第42-51页 |
| ·材料与方法 | 第42-46页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·酶与试剂 | 第42页 |
| ·2b 蛋白结合 sRNA 的关键结构域的研究 | 第42-46页 |
| ·Fny2b 和 LS2b 进行片段交换的重组 2b 的克隆构建 | 第42-45页 |
| ·重组 2b 蛋白的表达纯化检测 | 第45页 |
| ·重组 2b 蛋白体外结合小 RNA 能力的检测 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-50页 |
| ·克隆构建结果 | 第46-47页 |
| ·重组 2b 蛋白的原核表达 | 第47-48页 |
| ·重组 2b 蛋白体外结合 sRNA 能力的检测 | 第48-50页 |
| ·小结与讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 影响 CMV 2b 蛋白抑制 RNA 沉默的关键氨基酸位点研究 | 第51-66页 |
| ·材料与方法 | 第51-57页 |
| ·植物材料，质粒材料与农杆菌 | 第51页 |
| ·酶与试剂 | 第51-52页 |
| ·常规试剂的配置 | 第51-52页 |
| ·影响 CMV 2b 抑制 RNA 沉默的关键氨基酸位点的研究 | 第52-57页 |
| ·氨基酸突变的 Fny2b 和 LS2b 突变体克隆构建 | 第52-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-65页 |
| ·农杆菌共浸染实验克隆构建结果 | 第57-60页 |
| ·农杆菌共浸染实验结果 | 第60-62页 |
| ·2b 突变体原核表达载体的构建 | 第62-64页 |
| ·突变体 2b 的表达结果 | 第64-65页 |
| ·小结与讨论 | 第65-66页 |
| 总结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
