致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
·缺磷对植物生长发育的影响 | 第10-13页 |
·磷素对植物形态特征的影响 | 第10-11页 |
·缺磷时植物生理生化上的变化 | 第11-13页 |
·缺磷对植物光合作用的影响 | 第13页 |
·通过生物学方法提高小麦磷效率的必要性 | 第13-15页 |
·植物在磷胁迫条件下的分子生物学分析 | 第15-16页 |
·植物耐低磷胁迫的分子基础 | 第15-16页 |
·低磷胁迫下植物特异性响应基因的研究 | 第16页 |
·筛选小麦磷胁迫基因的主要途径 | 第16-22页 |
·分子标记方法 | 第16-18页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第18-22页 |
·cDNA-AFLP技术的原理及流程 | 第18-19页 |
·cDNA-AFLP技术的特点 | 第19-20页 |
·cDNA-AFLP技术的应用 | 第20-22页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第22-24页 |
·目的意义 | 第22页 |
·技术路线 | 第22-24页 |
第二章 黄淮麦区主要小麦品种低磷响应基因的筛选研究 | 第24-52页 |
引言 | 第24页 |
·材料、仪器与试剂 | 第24-25页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·主要仪器与试剂 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-37页 |
·实验准备 | 第25-26页 |
·实验耗材处理 | 第25-26页 |
·部分实验试剂的配制 | 第26页 |
·小麦水培方法 | 第26-27页 |
·小麦RNA样品的提取和纯化 | 第27-28页 |
·小麦RNA的提取 | 第27页 |
·小麦RNA的纯化 | 第27-28页 |
·cDNA-AFLP表达谱分析 | 第28-32页 |
·双链cDNA合成及纯化 | 第28-29页 |
·酶切连接 | 第29-32页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-33页 |
·差异条带的回收与克隆 | 第33-35页 |
·回收聚丙烯酰胺胶的差异目的条带 | 第33页 |
·差异片段二次PCR扩增及琼脂糖凝胶回收 | 第33-34页 |
·差异片段的克隆 | 第34-35页 |
·差异片段的序列测定及生物信息学分析 | 第35-37页 |
·qRT-PCR验证cDNA-AFLP表达谱 | 第36页 |
·qRT-PCR分析 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-47页 |
·小麦地上部与地下部总RNA提取与纯化 | 第37页 |
·双链cDNA的合成 | 第37-38页 |
·预扩增结果 | 第38页 |
·cDNA-AFLP分析体系的选择 | 第38-39页 |
·不同酶的扩增效果 | 第38-39页 |
·选择性引物筛选 | 第39页 |
·预扩增产物稀释倍数的选择 | 第39页 |
·选择性扩增及cDNA-AFLP结果分析 | 第39-40页 |
·差异片段的克隆及测序 | 第40-41页 |
·差异表达基因的同源性 | 第41-44页 |
·qRT-PCR验证cDNA-AFLP分离的差异表达基因 | 第44-47页 |
·引物扩增效率检测结果 | 第44页 |
·模板浓度稀释的选择 | 第44页 |
·差异表达的目的基因的相对定量结果 | 第44-47页 |
·结论与讨论 | 第47-52页 |
·RNA的提取cDNA-AFLP筛选 | 第47-48页 |
·qRT-PCR表达分析 | 第48页 |
·筛选小麦低磷胁迫差异表达基因的功能分析 | 第48-52页 |
第三章 小麦三个磷响应基因的全长克隆及生物信息学分析 | 第52-69页 |
引言 | 第52页 |
·材料、仪器与试剂 | 第52页 |
·材料 | 第52页 |
·仪器与试剂 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-54页 |
·小麦水培方法 | 第52-53页 |
·小麦总RNA提取、纯化及cDNA合成 | 第53页 |
·三个小麦低磷胁迫响应基因全长CDS序列的克隆 | 第53-54页 |
·基因编码的蛋白质特征 | 第54页 |
·筛选蛋白与植物种属同源蛋白序列的系统进化分析 | 第54页 |
·TaSNX1基因在不同小麦品种中的SNP分析 | 第54-55页 |
·结果与分析 | 第55-65页 |
·小麦RNA的提取 | 第55页 |
·小麦TaRBPMS-like及TaLC1314基因cDNA克隆 | 第55-59页 |
·TaRBPMS-like及TaLC1314基因编码的氨基酸序列结构和功能位点分析 | 第56页 |
·TaRBPMS_like及TaLC1314蛋白信号肽及磷酸化位点预测 | 第56-57页 |
·TaRBPMS_like及TaLC1314跨膜蛋白预测 | 第57页 |
·TaRBPMS_like及TaLC1314基因同源蛋白进化树构建 | 第57-58页 |
·TaRBPMS_like及TaLC1314基因氨基酸序列在物种间同源性比对 | 第58-59页 |
·小麦TaSNX1基因cDNA序列及全长DNA的克隆 | 第59-65页 |
·对TaSNX1编码的氨基酸序列进行结构和功能位点分析 | 第60页 |
·TaSNX1信号肽及磷酸化位点预测 | 第60-61页 |
·TaSNX1同源蛋白进化树构建 | 第61-62页 |
·TaSNX1基因家族进化树构建 | 第62-63页 |
·TaSNX1氨基酸序列在物种间同源性比对 | 第63页 |
·TaSNX1基因在不同小麦品种中的SNP分析 | 第63-65页 |
·结论与讨论 | 第65-69页 |
·TaRBPMS_like基因 | 第65-66页 |
·TaLC1314基因 | 第66-67页 |
·TaSNX1基因 | 第67-68页 |
·TaSNX1基因在不同小麦品种中的SNP及氨基酸在物种间同源性分析 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
ABSTRACT | 第80-83页 |
附件1 | 第83-90页 |
附件2 | 第90-93页 |