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小麦低磷响应基因cDNA-AFLP筛选及功能分析

致谢第1-8页
摘要第8-10页
第一章 文献综述第10-24页
   ·缺磷对植物生长发育的影响第10-13页
     ·磷素对植物形态特征的影响第10-11页
     ·缺磷时植物生理生化上的变化第11-13页
     ·缺磷对植物光合作用的影响第13页
   ·通过生物学方法提高小麦磷效率的必要性第13-15页
   ·植物在磷胁迫条件下的分子生物学分析第15-16页
     ·植物耐低磷胁迫的分子基础第15-16页
     ·低磷胁迫下植物特异性响应基因的研究第16页
   ·筛选小麦磷胁迫基因的主要途径第16-22页
     ·分子标记方法第16-18页
     ·cDNA-AFLP技术第18-22页
       ·cDNA-AFLP技术的原理及流程第18-19页
       ·cDNA-AFLP技术的特点第19-20页
       ·cDNA-AFLP技术的应用第20-22页
   ·本研究的目的意义和技术路线第22-24页
     ·目的意义第22页
     ·技术路线第22-24页
第二章 黄淮麦区主要小麦品种低磷响应基因的筛选研究第24-52页
 引言第24页
   ·材料、仪器与试剂第24-25页
     ·实验材料第24-25页
     ·主要仪器与试剂第25页
   ·实验方法第25-37页
     ·实验准备第25-26页
       ·实验耗材处理第25-26页
       ·部分实验试剂的配制第26页
     ·小麦水培方法第26-27页
     ·小麦RNA样品的提取和纯化第27-28页
       ·小麦RNA的提取第27页
       ·小麦RNA的纯化第27-28页
     ·cDNA-AFLP表达谱分析第28-32页
       ·双链cDNA合成及纯化第28-29页
       ·酶切连接第29-32页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第32-33页
     ·差异条带的回收与克隆第33-35页
       ·回收聚丙烯酰胺胶的差异目的条带第33页
       ·差异片段二次PCR扩增及琼脂糖凝胶回收第33-34页
       ·差异片段的克隆第34-35页
     ·差异片段的序列测定及生物信息学分析第35-37页
       ·qRT-PCR验证cDNA-AFLP表达谱第36页
       ·qRT-PCR分析第36-37页
   ·结果与分析第37-47页
     ·小麦地上部与地下部总RNA提取与纯化第37页
     ·双链cDNA的合成第37-38页
     ·预扩增结果第38页
     ·cDNA-AFLP分析体系的选择第38-39页
       ·不同酶的扩增效果第38-39页
       ·选择性引物筛选第39页
       ·预扩增产物稀释倍数的选择第39页
     ·选择性扩增及cDNA-AFLP结果分析第39-40页
     ·差异片段的克隆及测序第40-41页
     ·差异表达基因的同源性第41-44页
     ·qRT-PCR验证cDNA-AFLP分离的差异表达基因第44-47页
       ·引物扩增效率检测结果第44页
       ·模板浓度稀释的选择第44页
       ·差异表达的目的基因的相对定量结果第44-47页
   ·结论与讨论第47-52页
     ·RNA的提取cDNA-AFLP筛选第47-48页
     ·qRT-PCR表达分析第48页
     ·筛选小麦低磷胁迫差异表达基因的功能分析第48-52页
第三章 小麦三个磷响应基因的全长克隆及生物信息学分析第52-69页
 引言第52页
   ·材料、仪器与试剂第52页
     ·材料第52页
     ·仪器与试剂第52页
   ·实验方法第52-54页
     ·小麦水培方法第52-53页
     ·小麦总RNA提取、纯化及cDNA合成第53页
     ·三个小麦低磷胁迫响应基因全长CDS序列的克隆第53-54页
   ·基因编码的蛋白质特征第54页
   ·筛选蛋白与植物种属同源蛋白序列的系统进化分析第54页
   ·TaSNX1基因在不同小麦品种中的SNP分析第54-55页
   ·结果与分析第55-65页
     ·小麦RNA的提取第55页
     ·小麦TaRBPMS-like及TaLC1314基因cDNA克隆第55-59页
       ·TaRBPMS-like及TaLC1314基因编码的氨基酸序列结构和功能位点分析第56页
       ·TaRBPMS_like及TaLC1314蛋白信号肽及磷酸化位点预测第56-57页
       ·TaRBPMS_like及TaLC1314跨膜蛋白预测第57页
       ·TaRBPMS_like及TaLC1314基因同源蛋白进化树构建第57-58页
       ·TaRBPMS_like及TaLC1314基因氨基酸序列在物种间同源性比对第58-59页
     ·小麦TaSNX1基因cDNA序列及全长DNA的克隆第59-65页
       ·对TaSNX1编码的氨基酸序列进行结构和功能位点分析第60页
       ·TaSNX1信号肽及磷酸化位点预测第60-61页
       ·TaSNX1同源蛋白进化树构建第61-62页
       ·TaSNX1基因家族进化树构建第62-63页
       ·TaSNX1氨基酸序列在物种间同源性比对第63页
       ·TaSNX1基因在不同小麦品种中的SNP分析第63-65页
   ·结论与讨论第65-69页
     ·TaRBPMS_like基因第65-66页
     ·TaLC1314基因第66-67页
     ·TaSNX1基因第67-68页
     ·TaSNX1基因在不同小麦品种中的SNP及氨基酸在物种间同源性分析第68-69页
参考文献第69-80页
ABSTRACT第80-83页
附件1第83-90页
附件2第90-93页

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