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鱼类akirin基因的序列分析及免疫学功能初步验证

附表第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-13页
图目录第13-14页
表目录第14-15页
英文缩略表第15-16页
第一章 引言第16-28页
   ·鱼类免疫的概述第17-18页
   ·鱼类免疫相关细胞因子的概述第18-20页
   ·akirin 基因第20-23页
     ·akirin 基因的起源第20-21页
     ·akirin 基因的进化及结构分析第21-23页
   ·Akirin 多重生物学功能第23-25页
   ·鱼类 Akirin 研究进展第25-26页
   ·本研究目的及意义第26-28页
第二章 鱼类 akirin 同源基因的克隆第28-45页
   ·试验材料第28-29页
     ·材料第28页
     ·菌株、质粒与引物第28页
     ·试剂与工具酶第28页
     ·溶液和培养基第28-29页
     ·主要试验仪器第29页
   ·试验方法第29-37页
     ·分别提取泥鳅、半滑舌鳎和条纹斑竹鲨肝脏组织总 RNA第29-30页
     ·第一条 cDNA 链的合成第30页
     ·akirin 基因简并引物的设计第30-31页
     ·akirin 基因保守片段的克隆第31页
     ·泥鳅、半滑舌鳎和条纹斑竹鲨 Akirin 完整 cDNA 的克隆与分析第31-37页
   ·试验结果第37-43页
     ·akirin 基因简并引物的设计第37页
     ·akirin 基因保守片段的克隆第37页
     ·akirin 完整 cDNA 的克隆与分析第37-40页
     ·Akirin 蛋白的序列分析第40-41页
     ·akirin 基因进化分析第41-43页
   ·讨论第43-44页
 本章小结第44-45页
第三章 泥鳅 Akirin2 亚细胞定位研究第45-53页
   ·试验材料第45页
     ·菌株、载体和细胞第45页
     ·主要试剂及工具酶第45页
     ·主要试剂的配制第45页
     ·主要仪器第45页
   ·试验方法第45-49页
     ·引物设计第45-46页
     ·通过 Overlap-PCR 构建泥鳅 akirin2 基因缺失片段第46-47页
     ·重组表达载体的构建第47页
     ·重组质粒的大量提取第47-48页
     ·ZF4 细胞复苏第48页
     ·细胞传代第48页
     ·重组质粒及 pDsRed2-C1 空载体转染 ZF4 细胞第48页
     ·DAPI 染色第48-49页
   ·试验结果第49-51页
     ·泥鳅 akirin2 基因缺失片段的获得第49页
     ·重组表达载体的构建和鉴定第49页
     ·荧光显微镜检测重组质粒的亚细胞定位第49-51页
   ·讨论第51-52页
 本章小结第52-53页
第四章 泥鳅 Akirin2 免疫相关生物学功能验证第53-66页
   ·泥鳅 akirin2 基因时空表达分析第53-60页
     ·试验材料第53页
     ·试验方法第53-56页
     ·试验结果第56-59页
     ·讨论第59-60页
   ·泥鳅 akirin2 过表达对细胞免疫因子影响的研究第60-65页
     ·试验材料第60-61页
     ·试验方法第61-63页
     ·试验结果第63-64页
     ·讨论第64-65页
 本章小结第65-66页
第五章 泥鳅 Akirin2 与 14-3-3β蛋白的相互作用第66-72页
   ·试验材料第66-67页
     ·材料第66页
     ·菌株和质粒第66页
     ·试剂和工具酶第66页
     ·试剂和培养基的配制第66-67页
   ·试验方法第67-69页
     ·14-3-3β基因的克隆第67页
     ·DNA-BD 诱饵蛋白和 DNA-AD 互作蛋白融合载体第67页
     ·融合载体对宿主细胞毒性及自激活的检测第67-68页
     ·诱饵蛋白对宿主细胞毒性的检测第68页
     ·泥鳅 Akirin2 和 14-3-3β融合蛋白的杂交第68-69页
   ·试验结果第69-70页
     ·14-3-3β基因的克隆第69页
     ·融合载体的构建及验证第69页
     ·融合载体细胞自激活及毒性检测第69-70页
     ·泥鳅 Akirin2 和 14-3-3β相互作用的杂交验证第70页
   ·讨论第70-71页
 本章小结第71-72页
第六章 全文结论第72-73页
参考文献第73-79页
致谢第79-80页
作者简历第80页

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