| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| ·纤维堆囊菌简介 | 第12-13页 |
| ·纤维堆囊菌概述 | 第12页 |
| ·纤维堆囊菌的次级代谢产物 | 第12-13页 |
| ·埃博霉素的结构和生物活性 | 第13-15页 |
| ·埃博霉素的生物合成及相关酶 | 第15-20页 |
| ·埃博霉素的生物合成途径及其前体来源 | 第16-17页 |
| ·α-酮戊二酸脱氢酶复合体 | 第17页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶 | 第17-18页 |
| ·PKS 合成酶 | 第18-20页 |
| ·本课题的选题依据和研究意义 | 第20-21页 |
| ·本课题的总体思路 | 第21-22页 |
| 第2章 2-酮戊二酸脱氢酶复合体活性对埃博霉素合成的影响 | 第22-34页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株 | 第22-23页 |
| ·仪器 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·纤维堆囊菌的发酵培养 | 第24-25页 |
| ·粗酶提取及酶活测定 | 第25-26页 |
| ·埃博霉素产量的测定 | 第26页 |
| ·OGDHC 抑制剂浓度的确定 | 第26-27页 |
| ·抑制剂对发酵液 pH 和菌体量的影响 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-32页 |
| ·蛋白质标准曲线的制作 | 第27页 |
| ·埃博霉素标准曲线的制作 | 第27-28页 |
| ·埃博霉素的产量及 OGDHC 活性与发酵时间的关系 | 第28-29页 |
| ·抑制剂对堆囊菌生长及发酵液 PH 的影响 | 第29-30页 |
| ·抑制剂浓度的选择 | 第30页 |
| ·抑制剂对 OGDHC 活性的影响 | 第30-31页 |
| ·抑制剂对埃博霉素产量的影响 | 第31页 |
| ·抑制剂对单位质量细胞中埃博霉素产量的影响 | 第31-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第3章 S-腺苷甲硫氨酸合成酶活性对埃博霉素合成的影响 | 第34-44页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34-35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·菌体的发酵培养 | 第35页 |
| ·粗酶提取及酶活测定 | 第35-36页 |
| ·SAM 含量的测定 | 第36-37页 |
| ·HPLC 测埃博霉素浓度 | 第37页 |
| ·SAMs 抑制剂和促进剂浓度的确定 | 第37页 |
| ·发酵参数的测定 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·蛋白质标准曲线的制作 | 第37-38页 |
| ·SAM 标准曲线的制作 | 第38-39页 |
| ·无添加剂时胞内 SAMs 酶活性与埃博霉素产量的关系 | 第39页 |
| ·添加剂浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·添加剂对 SAMs 酶活、pH 及菌体干重的影响 | 第40-41页 |
| ·添加剂对埃博霉素产量的影响 | 第41-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第4章 发酵过程中 OGDHC 和 SAMS 基因转录水平分析 | 第44-56页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44-45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·试剂盒及专用材料 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·CTAB 法提取纤维堆囊菌总 DNA | 第46页 |
| ·引物设计及确定 | 第46-47页 |
| ·RNA 提取 | 第47-48页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第48页 |
| ·Real-time PCR | 第48页 |
| ·实验数据分析 | 第48-49页 |
| ·实验结果 | 第49-55页 |
| ·总 DNA 的提取 | 第49页 |
| ·引物的特异性检测 | 第49页 |
| ·RNA 的纯度验证和浓度测定 | 第49-50页 |
| ·cDNA 质量检测 | 第50-51页 |
| ·基因转录水平分析 | 第51-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 全文总结与展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第70页 |
