褐藻胶裂解酶产生菌的筛选、基因克隆表达及酶法制备的褐藻寡糖对提高植物逆境抗性的作用
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 综述与导言 | 第10-25页 |
| ·褐藻胶裂解酶的研究进展 | 第10-15页 |
| ·褐藻胶裂解酶的来源 | 第10页 |
| ·褐藻胶裂解酶的分类 | 第10-11页 |
| ·褐藻胶裂解酶作用机制和底物专一性 | 第11-12页 |
| ·褐藻胶裂解酶活力的测定 | 第12-13页 |
| ·褐藻胶裂解酶的分离与纯化 | 第13-14页 |
| ·褐藻胶裂解酶基因工程研究进展 | 第14-15页 |
| ·褐藻胶的研究进展 | 第15-19页 |
| ·褐藻胶的来源 | 第15页 |
| ·褐藻胶的结构与理化性质 | 第15-17页 |
| ·褐藻胶的应用 | 第17-19页 |
| ·食品工业 | 第17页 |
| ·医药事业 | 第17-18页 |
| ·纺织工业 | 第18页 |
| ·农业 | 第18页 |
| ·橡胶、造纸、铸造等 | 第18-19页 |
| ·褐藻寡糖的研究 | 第19-23页 |
| ·褐藻寡糖的制备 | 第19-20页 |
| ·褐藻寡糖的应用 | 第20-23页 |
| ·医药方面的应用 | 第20-22页 |
| ·农业方面的应用潜力 | 第22-23页 |
| ·食品和保健品方面的应用 | 第23页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-40页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·菌种或质粒 | 第26页 |
| ·引物 | 第26-27页 |
| ·缓冲液 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-40页 |
| ·样品采集 | 第28页 |
| ·产褐藻胶裂解酶菌株的筛选 | 第28-29页 |
| ·筛选用培养基 | 第28页 |
| ·筛选步骤 | 第28-29页 |
| ·褐藻胶裂解酶酶基因的克隆、序列分析和表达 | 第29-37页 |
| ·基因组提取 | 第29-30页 |
| ·菌株的鉴定 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·连接与转化 | 第32-33页 |
| ·质粒提取 | 第33页 |
| ·双酶切 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE | 第34-35页 |
| ·可溶性蛋白表达优化 | 第35页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第35-36页 |
| ·重组褐藻胶裂解酶比活测定 | 第36-37页 |
| ·酶特性分析 | 第37页 |
| ·温度、pH对酶稳定性的影响 | 第37页 |
| ·酶的最适pH和温度 | 第37页 |
| ·金属离子和螯合剂对酶活性的影响 | 第37页 |
| ·Na~+度对酶活性的影响 | 第37页 |
| ·褐藻寡糖生物活性分析 | 第37-40页 |
| ·不同聚合度褐藻寡糖的制备 | 第37-38页 |
| ·褐藻寡糖对大豆子叶损伤的影响 | 第38页 |
| ·褐藻寡糖对水稻种子发芽生长的影响 | 第38页 |
| ·褐藻寡糖对水稻干旱胁迫的影响 | 第38-39页 |
| ·褐藻寡糖对水稻金属毒害的影响 | 第39页 |
| ·褐藻寡糖对病原菌的抑制作用 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第40-57页 |
| ·产褐藻酸酶菌株的筛选结果 | 第40-41页 |
| ·菌株鉴定 | 第41-42页 |
| ·酶基因的克隆表达 | 第42-47页 |
| ·保守引物扩增 | 第42-45页 |
| ·目的序列连接转化 | 第45-47页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第47页 |
| ·蛋白可溶性表达优化 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白酶活分析 | 第48-49页 |
| ·蛋白浓度标准曲线 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白酶活测定 | 第49页 |
| ·酶的特性 | 第49-52页 |
| ·酶的温度和pH稳定性 | 第49-51页 |
| ·金属离子和螯合剂对酶活性的影响 | 第51页 |
| ·Na~+浓度对酶活性的影响 | 第51-52页 |
| ·褐藻寡糖对植物逆境抗性的作用 | 第52-56页 |
| ·褐藻寡糖对大豆子叶损伤的影响 | 第52页 |
| ·褐藻寡糖对水稻种子发芽生长的影响 | 第52-53页 |
| ·褐藻寡糖对水稻干旱胁迫的影响 | 第53-54页 |
| ·褐藻寡糖对水稻金属毒害的影响 | 第54-56页 |
| ·不同聚合度寡糖对植物病原菌生长的影响 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
