| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1 转录因子结构 | 第16-17页 |
| ·DNA结合区 | 第16页 |
| ·转录调控区 | 第16页 |
| ·寡聚化位点 | 第16-17页 |
| ·核定位信号 | 第17页 |
| 2 转录因子的功能 | 第17-20页 |
| ·参与环境胁迫的信号转导 | 第17页 |
| ·参与不同的代谢途径 | 第17-18页 |
| ·参与植物生长发育的调控 | 第18页 |
| ·转录因子形成基因家族参与调控 | 第18-20页 |
| 3 植物转录因子功能研究方法 | 第20-22页 |
| ·转录因子功能结构域的研究方法 | 第20-22页 |
| ·利用突变体和转基因的功能分析方法 | 第22页 |
| 4 植物抗逆相关转录因子的研究进展 | 第22-34页 |
| ·zinc finger类转录因子 | 第23-24页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第24-26页 |
| ·WRKY类转录因子 | 第26-29页 |
| ·AP2/EREBP类转录因子 | 第29-30页 |
| ·MYB类转录因子 | 第30-31页 |
| ·CCAAT binding类转录因子 | 第31-32页 |
| ·bHLH转录因子家族 | 第32-34页 |
| 5 实验选题依据以及目的意义 | 第34-36页 |
| ·选题依据 | 第34-35页 |
| ·目的意义 | 第35-36页 |
| 第二章 与抗逆相关的转录因子家族及其表达谱分析 | 第36-84页 |
| 一、材料与方法 | 第36-46页 |
| 1. 数据库及数据查询 | 第36-38页 |
| ·基因处理及注释 | 第37页 |
| ·序列比对及进化树构建 | 第37-38页 |
| 2 目的基因的CDNA克隆与序列比对 | 第38-44页 |
| ·小麦幼苗的培育 | 第38页 |
| ·Total RNA提取 | 第38-40页 |
| ·RNA反转录及第一链eDNA合成 | 第40-41页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第41-44页 |
| ·DNA测序 | 第44页 |
| ·序列分析 | 第44页 |
| 3 基因的转录表达模式分析 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| 二、结果 | 第46-84页 |
| (一) WRKY基因家族的比较及小麦WRKY转录因子家族部分基因表达谱分析 | 第46-75页 |
| ·小麦WRKY基因家族的分析 | 第46-62页 |
| ·山融3号与济南177WRKY家族基因序列之间的比对 | 第62-69页 |
| ·WRKY Real-time RT-PCR结果分析 | 第69-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| (二) CCAAT结合(CBF)转录因子基因家族比较及CBF转录因子家族部分基因表达谱分析 | 第75-84页 |
| ·小麦CBF转录因子基因家族的鉴定及与水稻和拟南芥的分析比较 | 第75-80页 |
| ·小麦济南177及渐渗系山融3号中CCAAT序列的比对 | 第80-81页 |
| ·CBF结合转录因子的表达变化 | 第81-83页 |
| ·分析 | 第83-84页 |
| 第三章 抗逆相关转求因子克隆及功能研究 | 第84-128页 |
| 一、材料及方法 | 第85-98页 |
| 1 目的基因的CDNA克隆及序列分析 | 第85页 |
| ·序列同源分析 | 第85页 |
| ·蛋白质保守结构域预测 | 第85页 |
| ·蛋白质其他性质分析及三级结构预测 | 第85页 |
| ·核定位信号预测 | 第85页 |
| 2 目的基因GDNA的克隆与性质研究 | 第85-86页 |
| ·材料 | 第85页 |
| ·方法 | 第85-86页 |
| 3 基因的转录表达模式分析 | 第86-87页 |
| ·盐、PEG、ABA、冷处理后基因表达模式的分析 | 第86-87页 |
| ·不同组织部位基因表达模式的分析 | 第87页 |
| 4 亚细胞定位方法 | 第87-90页 |
| ·洋葱表皮细胞的亚细胞定位 | 第87-89页 |
| ·拟南芥原生质体的亚细胞定位 | 第89-90页 |
| 5 凝胶阻滞试验 | 第90-93页 |
| ·pET32a融合蛋白的表达及提纯 | 第90页 |
| ·双链寡核苷酸及制备探针 | 第90-91页 |
| ·凝胶的制备 | 第91-92页 |
| ·蛋白与探针的结合反应 | 第92页 |
| ·电泳、转膜及显影 | 第92-93页 |
| 6 植物基因转化 | 第93-98页 |
| ·转基因载体的构建 | 第93页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第93页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第93-94页 |
| ·农杆菌转化拟南芥 | 第94页 |
| ·农杆菌转化烟草 | 第94-95页 |
| ·农杆菌转化小麦 | 第95-96页 |
| ·过量表达转基因植株的鉴定 | 第96页 |
| ·过表达植株在胁迫条件下的表型 | 第96页 |
| ·植物体内游离脯氨酸含量的测定 | 第96-97页 |
| ·过表达植株中于抗逆相关的Marker基因的RT-PCR | 第97-98页 |
| 二、结果与分析 | 第98-128页 |
| (一) 抗逆相关锌指类蛋白TAZF13的基因克隆与功能研究 | 第98-113页 |
| ·TaZF13在芯片中的表达变化情况 | 第98页 |
| ·TaZF13和tazf13 cDNA的分离 | 第98-101页 |
| ·TaZF13 gDNA的分析及定位 | 第101-102页 |
| ·tazf13在不同器官中的特异性表达 | 第102-103页 |
| ·不同处理对tazf13表达的影响 | 第103-104页 |
| ·tazf13的亚细胞定位 | 第104页 |
| ·利用拟南芥过表达技术研究tazf13的功能 | 第104-107页 |
| ·利用小麦过表达技术研究tazf13的功能 | 第107-110页 |
| ·讨论 | 第110-113页 |
| (二) 抗逆相关CBPB类转录因子TACBFB27的克隆与功能研究 | 第113-128页 |
| ·TaCBFB27在芯片中的表达变化情况 | 第114-115页 |
| ·TaCBFB27 cDNA的分离 | 第115-117页 |
| ·TaCBFB27 gDNA的分离及分析 | 第117-118页 |
| ·TaCBFB27在小麦染色体的定位 | 第118页 |
| ·TaCBFB27在不同器官中的特异性表达 | 第118页 |
| ·不同处理对TaCBFB27表达的影响 | 第118-119页 |
| ·TaCBFB27的亚细胞定位 | 第119-120页 |
| ·TaCBF27与CCAATbox结合 | 第120-122页 |
| ·利用烟草过表达技术研究TaCBFB27的功能 | 第122-123页 |
| ·TaCBF27小麦过量表达转基因植株的鉴定 | 第123-125页 |
| ·讨论 | 第125-128页 |
| 总结 | 第128-129页 |
| 附录 | 第129-134页 |
| 参考文献 | 第134-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 发表论文 | 第152-153页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第153页 |
