| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-39页 |
| ·斑马鱼的发育和常用遗传操作技术 | 第9-15页 |
| ·斑马鱼的发育过程 | 第9-10页 |
| ·正向遗传学技术 | 第10-12页 |
| ·反向遗传学技术 | 第12-15页 |
| ·斑马鱼突变体筛选 | 第15-22页 |
| ·ENU 诱变筛选 | 第15-17页 |
| ·假型逆转录病毒插入突变 | 第17页 |
| ·转座子介导的插入突变 | 第17-22页 |
| ·斑马鱼内耳的发育 | 第22-33页 |
| ·斑马鱼的听觉器官与功能 | 第22-24页 |
| ·斑马鱼内耳的发育与调控 | 第24-32页 |
| ·斑马鱼内耳发育与人类疾病 | 第32-33页 |
| ·Grainyhead 家族基因研究进展 | 第33-37页 |
| ·Grhl 亚家族基因 | 第34-35页 |
| ·Grhl 亚家族基因的功能 | 第35-37页 |
| ·Grhl 活性及表达的调控 | 第37页 |
| ·本课题的目的和内容 | 第37-39页 |
| 第2章 材料与方法 | 第39-50页 |
| ·质粒的构建 | 第39-40页 |
| ·显微注射与突变体和转基因鱼的建立 | 第40页 |
| ·斑马鱼基因组 DNA 的提取 | 第40页 |
| ·热不对称交错 PCR | 第40-42页 |
| ·mRNA 和探针的体外合成 | 第42页 |
| ·斑马鱼胚胎总 RNA 的提取与荧光定量 PCR | 第42-43页 |
| ·cDNA 5’末端快速扩增 | 第43-44页 |
| ·整胚原位杂交 | 第44-45页 |
| ·内耳纤毛鬼笔环肽染色 | 第45页 |
| ·整胚免疫荧光染色 | 第45-46页 |
| ·染色体免疫共沉淀 | 第46-48页 |
| ·透射电子显微镜 | 第48-49页 |
| ·M 细胞全细胞记录 | 第49页 |
| ·C 形惊吓反应实验 | 第49-50页 |
| 第3章 Tol2 转座子介导的基因捕获筛选斑马鱼突变体 | 第50-61页 |
| ·斑马鱼的注射及筛选 | 第50-51页 |
| ·转基因鱼的荧光表达分析 | 第51-53页 |
| ·突变体的鉴定 | 第53-59页 |
| ·T086 突变体 | 第53-54页 |
| ·T230 突变体 | 第54页 |
| ·T243 突变体 | 第54-57页 |
| ·其它突变体 | 第57-59页 |
| ·总结与讨论 | 第59-61页 |
| 第4章 斑马鱼 grhl2b 突变体的研究 | 第61-74页 |
| ·grhl2b 品系荧光的表达 | 第61-62页 |
| ·grhl2b 突变体表型的分析 | 第62-68页 |
| ·grhl2b 突变体内耳发育异常 | 第62-64页 |
| ·grhl2b 突变体听力的下降 | 第64-66页 |
| ·grhl2b 突变体不能维持躯体平衡 | 第66-68页 |
| ·grhl2b 品系被捕获基因的鉴定 | 第68-70页 |
| ·内耳的正常发育需要 grhl2b 的表达 | 第70-71页 |
| ·脊椎动物 Grhl2 蛋白的结构和功能的保守性 | 第71-73页 |
| ·总结与讨论 | 第73-74页 |
| 第5章 grhl2b 通过 cldnb 和 epcam 调控内耳发育 | 第74-85页 |
| ·grhl2b 不参与内耳的诱导和图式形成 | 第74-75页 |
| ·grhl2b 突变不影响毛细胞的发育 | 第75-76页 |
| ·grhl2b 突变体耳石异常的原因分析 | 第76-77页 |
| ·grhl2b 调节 cldnb 和 epcam 的表达 | 第77-79页 |
| ·grhl2b 调节内耳上皮细胞紧密连接的生长 | 第79-80页 |
| ·grhl2b 对内耳发育的调控依赖于 cldnb 和 epcam | 第80-82页 |
| ·Grhl2b 直接调控 cldnb 和 epcam 的表达 | 第82-83页 |
| ·总结与讨论 | 第83-85页 |
| 第6章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第107页 |
