| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-13页 |
| ·细胞色素 P450 研究进展 | 第8-13页 |
| ·细胞色素 P450 | 第8页 |
| ·细胞色素 P450 结构特征 | 第8-9页 |
| ·细胞色素 P450 的组织分布 | 第9页 |
| ·细胞色素 P450 的命名 | 第9-10页 |
| ·昆虫细胞色素 P450 的功能 | 第10-13页 |
| 2 引言 | 第13-15页 |
| ·研究的目的及意义 | 第13页 |
| ·主要研究内容 | 第13-14页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因全长 cDNA 序列的测定和分析 | 第13页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因转录水平的研究 | 第13页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 蛋白表达水平的研究 | 第13-14页 |
| ·技术路线 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-26页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·仪器与试剂 | 第15-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第15页 |
| ·主要生化试剂 | 第15-16页 |
| ·常用溶液的配置 | 第16-18页 |
| ·实验方法 | 第18-26页 |
| ·柞蚕组织的收集 | 第18页 |
| ·柞蚕总 RNA 的提取 | 第18页 |
| ·提取的总 RNA 的质量检测 | 第18页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第18-19页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因的 PCR 扩增 | 第19-21页 |
| ·PCR 扩增后目的产物的纯化 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·目的片段的连接和转化 | 第22页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因序列的拼接与分析 | 第22页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 蛋白完整 ORF 的原核表达 | 第22-24页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因全长 cDNA 的扩增 | 第22页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第22-23页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第23-24页 |
| ·Westernblot 分析 | 第24页 |
| ·柞蚕 P4504G25 序列与氨基酸序列同源性分析和系统进化树构建 | 第24页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因转录水平的研究 | 第24-26页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因的半定量 PCR 检测 | 第24-26页 |
| 4 结果 | 第26-36页 |
| ·总 RNA 的检测 | 第26页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因序列的测定和分析 | 第26-30页 |
| ·柞蚕 P450CYP4G25 序列与氨基酸序列同源性分析和系统进化树构建 | 第30-32页 |
| ·柞蚕 P450CYP4G25 基因转录水平的研究 | 第32-33页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 全长 ORF 的扩增 | 第33页 |
| ·双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 蛋白不同 IPTG 浓度的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·Westernblot 检测 | 第35-36页 |
| 5 讨论 | 第36-38页 |
| ·柞蚕的饲养 | 第36页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因全长与序列分析 | 第36页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 基因的半定量 PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·柞蚕 CYP4G25 蛋白的原核表达 | 第37-38页 |
| 6 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 个人简介 | 第45页 |
| 读研期间发表的论文 | 第45页 |
