| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| ·纤维素酶 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的组成及分类 | 第10页 |
| ·纤维素酶的结构 | 第10-11页 |
| ·连接肽(linker) | 第11-12页 |
| ·纤维素结合域(CBD) | 第12-17页 |
| ·CBD的来源和分类 | 第12-13页 |
| ·CBD的结构和功能 | 第13-14页 |
| ·来自家族1和3的CBD | 第13-14页 |
| ·CBD的应用 | 第14-17页 |
| ·CBD在纤维修饰及造纸工业的应用 | 第14-16页 |
| ·CBD在固定化、亲和层析及蛋白质工程上的应用 | 第16-17页 |
| ·论文的研究意义和研究目的 | 第17-19页 |
| 第二章 包含双CBD基因片段重组质粒的构建 | 第19-44页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·质粒 | 第19页 |
| ·药品 | 第19页 |
| ·工具酶 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-31页 |
| ·cbm3基因的人工合成 | 第21-24页 |
| ·dCBD重组基因的合成 | 第24-28页 |
| ·cbm3-gs-cbd1的合成 | 第24-25页 |
| ·cbm3-celc-cbd1的构建 | 第25-26页 |
| ·cbm3-gs-cbm3的构建 | 第26-27页 |
| ·cbd1-celc-cbd1的构建 | 第27-28页 |
| ·基因片段与T载体PCR2.1连接 | 第28页 |
| ·重组质粒dCBD-PCR2.1转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
| ·重组质粒dCBD-PCR2.1阳性克隆的筛选 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒dCBD-pET 32b的构建及筛选 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-40页 |
| ·cbm3基因片段的构建 | 第31-33页 |
| ·目的基因的构建 | 第33-39页 |
| ·cbm3-gs-cbd1的合成 | 第33-35页 |
| ·cbm3-celc-cbd1的合成 | 第35-36页 |
| ·cbm3-gs-cbm3的合成 | 第36-37页 |
| ·cbd1-celc-cbd1的合成 | 第37-39页 |
| ·重组质粒dCBD-PCR2.1阳性克隆的筛选 | 第39-40页 |
| ·重组表达质粒dCBD-pET 32b的构建 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 重组蛋白表达及可溶性研究 | 第44-59页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·菌种 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·缓冲液 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-47页 |
| ·重组表达菌株的构建 | 第45页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第45页 |
| ·表达结果的SDS-PAGE分析 | 第45-47页 |
| ·溶液的配制 | 第45-46页 |
| ·分离胶和浓缩胶的配制 | 第46页 |
| ·样品的准备 | 第46页 |
| ·加样 | 第46页 |
| ·电泳 | 第46页 |
| ·染色与脱色 | 第46-47页 |
| ·目的蛋白可溶性表达最优条件的研究 | 第47页 |
| ·不同温度对可溶性表达的影响 | 第47页 |
| ·不同IPTG诱导浓度对可溶性表达的影响 | 第47页 |
| ·Native条件下的亲和纯化验证 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-57页 |
| ·重组表达菌株的构建 | 第47-48页 |
| ·重组表达蛋白的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·重组表达蛋白的可溶性研究 | 第49-53页 |
| ·CBM3-GS-CBD1的可溶性研究 | 第50页 |
| ·CBM3-celc-CBD1的可溶性研究 | 第50-51页 |
| ·CBM3-GS-CBM3的可溶性研究 | 第51-52页 |
| ·CBD1-celc-CBDl的可溶性研究 | 第52-53页 |
| ·IPTG浓度对蛋白可溶性表达的影响 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第四章 重组蛋白吸附性能的比较 | 第59-71页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·缓冲液 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白吸附性能的研究 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白对不同底物吸附的研究 | 第59页 |
| ·重组蛋白可逆性吸附的研究 | 第59-60页 |
| ·结果 | 第60-69页 |
| ·重组蛋白对不同底物的吸附 | 第60-64页 |
| ·重组蛋白对Avicel的吸附 | 第60-61页 |
| ·重组蛋白对磷酸润涨纤维素的吸附 | 第61-62页 |
| ·重组蛋白对Whatman 1号滤纸的吸附 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白对纸浆的吸附 | 第63-64页 |
| ·重组蛋白可逆性吸附的研究 | 第64-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·重组蛋白吸附特性的研究 | 第69-70页 |
| ·重组蛋白可逆性的研究 | 第70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第五章 重组蛋白及对纸张性能影响的初步研究 | 第71-83页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·缓冲液 | 第71页 |
| ·仪器和设备 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-74页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第71-72页 |
| ·打浆 | 第72页 |
| ·抄片 | 第72页 |
| ·纸张机械性能的测定 | 第72-74页 |
| ·耐折度的测定 | 第72-73页 |
| ·抗张强度的测定 | 第73页 |
| ·耐破度的测定 | 第73-74页 |
| ·滤水速度的测定 | 第74页 |
| ·纸张防水性的测定 | 第74页 |
| ·结果 | 第74-81页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第74-75页 |
| ·重组蛋白对纸张耐折度的影响 | 第75-76页 |
| ·重组蛋白对纸张抗张强度的影响 | 第76-77页 |
| ·重组蛋白对纸张耐破度的影响 | 第77-78页 |
| ·重组蛋白对纸浆滤水性的影响 | 第78-79页 |
| ·重组蛋白对纸张防水性的影响 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| ·重组蛋白对纸张性能的影响 | 第81页 |
| ·重组蛋白对纸张滤水性的影响 | 第81-82页 |
| ·重组蛋白对纸张防水性的影响 | 第82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 详细摘要 | 第89-90页 |
| Abstract | 第90-91页 |