| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1 质膜H~+-ATPase的基本特性 | 第15-21页 |
| ·质膜H~+-ATPase的结构和生化性质 | 第15-16页 |
| ·质膜H~+-ATPase的生理功能 | 第16-19页 |
| ·质膜H~+-ATPase是矿质养分和碳水化合物跨膜运输的驱动力 | 第16-17页 |
| ·质膜H~+-ATPase与细胞生长的关系 | 第17页 |
| ·质膜H~+-ATPase调节细胞质pH | 第17页 |
| ·质膜H~+-ATPase调节气孔开闭 | 第17页 |
| ·质膜H~+-ATPase调控植物的尖端生长系统 | 第17-18页 |
| ·质膜H~+-ATPase参与植物对逆境胁迫的响应 | 第18-19页 |
| ·质膜H~+-ATPase在转录水平与翻译后水平上的调控机制 | 第19-21页 |
| 2 植物吸收磷的主要途径 | 第21-26页 |
| ·非菌根植物对低磷胁迫的响应机制 | 第21-24页 |
| ·非菌根植物根系对难溶性磷的活化机制 | 第22-23页 |
| ·非菌根植物根系对获取有效磷的响应机制 | 第23-24页 |
| ·菌根植物对低磷胁迫的响应机制 | 第24-26页 |
| 3 细胞质膜H~+-ATPase与磷营养的关系 | 第26-28页 |
| 4 研究目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 水稻根系质膜H~+-ATPase对低磷胁迫的响应 | 第29-41页 |
| 1 试验材料与方法 | 第29-32页 |
| ·水稻培养 | 第29-30页 |
| ·水稻根系根际酸化检验 | 第30页 |
| ·细胞膜分离 | 第30-31页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第31页 |
| ·细胞膜H~+-ATPase水解活性的测定 | 第31-32页 |
| ·细胞膜蛋白凝胶电泳和免疫印迹试验 | 第32页 |
| ·pH梯度测定 | 第32页 |
| 2 数据处理 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-37页 |
| ·缺磷条件下水稻根系H~+的分泌 | 第32-34页 |
| ·缺磷胁迫对水稻根系细胞质膜H~+-ATPase活性的影响 | 第34-35页 |
| ·缺磷胁迫对水稻根系细胞膜H~+-ATPase动力学特征的影响 | 第35-36页 |
| ·缺磷胁迫对水稻根系细胞膜H~+-ATPase酶含量的影响 | 第36页 |
| ·缺磷胁迫对水稻根系细胞膜质子泵的泵活性影响 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-41页 |
| 第三章 水稻质膜质子泵基因的生物信息学及表达分析 | 第41-57页 |
| 1 水稻质膜H~+-ATPase基因生物信息学分析方法 | 第41-42页 |
| ·水稻质膜H~+-ATPase家族基因染色体位点和氨基酸序列分析 | 第41-42页 |
| ·水稻与其它植物质膜H~+-ATPase基因的系统进化树分析 | 第42页 |
| ·水稻质膜H~+-ATPase家族基因跨膜拓扑结构分析 | 第42页 |
| 2 水稻质膜H~+-ATPASE基因表达特征分析的试验材料和方法 | 第42-48页 |
| ·试验材料 | 第42-43页 |
| ·水稻材料 | 第42页 |
| ·菌株、载体 | 第42-43页 |
| ·生物试剂 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-48页 |
| ·半定量RT-PCR检测基因表达 | 第43-45页 |
| ·DNA提取及启动子克隆 | 第45页 |
| ·启动子与T载体连接 | 第45-46页 |
| ·启动子与GUS表达载体连接 | 第46页 |
| ·水稻转基因步骤与方法 | 第46-48页 |
| ·水稻GUS组织特异性表达分析 | 第48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-56页 |
| ·水稻H~+-ATPase家族基因氨基酸序列及进化树分析 | 第48-51页 |
| ·水稻H~+-ATPase家族基因跨膜拓扑结构分析 | 第51-53页 |
| ·OsA2,OsA3,OsA4,OsA7和OsA8基因的表达分析 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 OsA8突变体对低磷胁迫和丛枝菌根的响应 | 第57-71页 |
| 1 试验材料与方法 | 第58-62页 |
| ·试验设计 | 第58页 |
| ·试验方法 | 第58-62页 |
| ·水稻菌根真菌侵染方法 | 第58页 |
| ·水稻菌根共生体系的鉴定 | 第58-59页 |
| ·菌根侵染率的检测 | 第59页 |
| ·GUS在菌根组织中的定位 | 第59页 |
| ·植物总RNA的提取与RT-PCR | 第59-61页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第61-62页 |
| ·植株磷含量的测定 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-68页 |
| ·OsA8基因组织特异性表达分析 | 第62-64页 |
| ·OsA8基因突变对水稻丛枝菌根共生结构的影响 | 第64-66页 |
| ·OsA8基因突变对菌根水稻的磷含量影响 | 第66页 |
| ·OsA8基因突变对水稻质膜H~+-ATPase基因表达的影响 | 第66-67页 |
| ·OsA8基因突变对水稻Pht1基因表达的影响 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-71页 |
| 第五章 OsA8基因超表达对低磷胁迫的响应 | 第71-85页 |
| 1 试验材料与方法 | 第71-77页 |
| ·试验材料 | 第71-73页 |
| ·水稻材料 | 第71-72页 |
| ·菌株、质粒 | 第72页 |
| ·生物试剂 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-77页 |
| ·OsA8基因超表达载体的构建 | 第73-74页 |
| ·水稻转基因流程 | 第74页 |
| ·转基因苗检测 | 第74-75页 |
| ·转基因苗的移栽 | 第75-76页 |
| ·植物总RNA的提取与RT-PCR和实时荧光定量PCR | 第76页 |
| ·水稻根系质膜H~+-ATPase活性的测定 | 第76页 |
| ·水培试验方案 | 第76页 |
| ·植株全磷含量的测定 | 第76-77页 |
| ·~(33)P吸收速率的测定 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-84页 |
| ·OsA8基因超表达水稻优势株系的筛选及其生长表型 | 第77-79页 |
| ·OsA8基因超表达提高水稻质膜H~+-ATPase活性 | 第79页 |
| ·OsA8基因超表达影响水稻植株体内总磷含量的分布 | 第79-80页 |
| ·OsA8基因超表达影响水稻质膜H~+-ATPase家族基因的表达 | 第80-81页 |
| ·OsA8基因超表达对水稻高亲和磷转运蛋白Pht1家族基因表达的影响 | 第81-82页 |
| ·OsA8基因超表达对水稻植株磷吸收速率和转运速率的影响 | 第82-84页 |
| 3 讨论 | 第84-85页 |
| 第六章 全文结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-105页 |
| 创新点 | 第105-107页 |
| 附录 | 第107-129页 |
| 在读期间发表的论文 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
