摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
英文缩写符号及中英文对照表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-28页 |
·HO的催化机理 | 第14-16页 |
·HO的分子结构及特征 | 第16-19页 |
·HO序列及其特征 | 第16-18页 |
·HO蛋白晶体结构及特征 | 第18-19页 |
·植物HO突变体 | 第19-21页 |
·HO的生理功能 | 第21-25页 |
·参与光敏色素发色团的合成 | 第22页 |
·调控根形态发生 | 第22-23页 |
·参与植物对非生物胁迫的应答 | 第23-25页 |
·血红素研究概述 | 第25-27页 |
·本研究的目的和内容 | 第27-28页 |
第二章 水稻OsHO1(SE5)基因的克隆、原核表达及胁迫处理后基因表达分析 | 第28-54页 |
·材料与方法 | 第29-38页 |
·植物材料与处理 | 第29-30页 |
·菌株和质粒载体 | 第30页 |
·主要分子生物学和生物化学试剂 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30-31页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·水稻叶片总RNA的提取 | 第32页 |
·cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
·水稻OsHO1(SE5)基因的开放阅读框的PCR扩增 | 第33页 |
·目的基因的扩增及酶切验证 | 第33-35页 |
·OsHO1成熟蛋白的原核表达、重组蛋白纯化 | 第35-36页 |
·纯化蛋白HO酶活性的测定 | 第36页 |
·TBARS含量及抗氧化酶活性的测定 | 第36-37页 |
·蛋白多克隆抗体的制备及Western blot分析 | 第37-38页 |
·烟草叶片瞬时表达农杆菌载体---注射法 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-50页 |
·水稻叶片RNA的提取 | 第38页 |
·水稻SE5基因CDS区的PCR扩增 | 第38-40页 |
·水稻OsHO1蛋白的多序列比对 | 第40-41页 |
·OsHO1成熟蛋白的原核表达、重组蛋白纯化及酶活性测定 | 第41-44页 |
·OsHO1亚细胞定位 | 第44-46页 |
·OsHO1组织表达分析及对非生物胁迫的响应 | 第46-48页 |
·paraquat处理对水稻离体叶片氧化伤害及抗氧化酶基因的影响 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-54页 |
·SE5基因序列特征及结构特点 | 第50-51页 |
·OsHO1蛋白的原核表达及生化特性 | 第51-52页 |
·OsHO1组织表达分析及对非生物胁迫的响应 | 第52-54页 |
第三章 农杆菌介导OsHO1(SE5)基因过表达水稻和拟南芥植株的获得及其相关生理特性初步研究 | 第54-76页 |
·材料与方法 | 第55-61页 |
·植物材料与处理 | 第55页 |
·菌株和质粒载体 | 第55页 |
·DNA测序 | 第55页 |
·主要试剂和培养基 | 第55-57页 |
·主要仪器设备 | 第57页 |
·水稻SE5基因RNAi表达载体的构建 | 第57页 |
·水稻SE5基因过表达载体pVec8_Ubi-SE5的构建 | 第57-58页 |
·水稻SE5基因过表达载体pCAMBIA1302-SE5的构建 | 第58页 |
·重组载体向农杆菌感受态细胞的转化 | 第58页 |
·水稻愈伤组织的诱导、分化和植株再生 | 第58-59页 |
·农杆菌介导水稻愈伤组织的遗传转化 | 第59页 |
·抗性植株的分子鉴定 | 第59-60页 |
·转基因水稻T0代种子潮霉素发芽试验 | 第60页 |
·农杆菌介导拟南芥的遗传转化 | 第60-61页 |
·过氧化氢及超氧阴离子组织染色 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-73页 |
·水稻SE5基因RNAi表达载体的构建 | 第61-64页 |
·水稻SE5基因过表达载体pVec8_Ubi-SE5的构建 | 第64页 |
·农杆菌介导的水稻愈伤组织的遗传转化 | 第64-65页 |
·水稻转SE5基因植株的分子检测 | 第65-66页 |
·转SE5基因T0代水稻种子的潮霉素发芽试验 | 第66-68页 |
·过表达SE5可以降低百草枯对水稻离体叶片的氧化伤害 | 第68页 |
·水稻SE5基因过表达载体pCAMBIA1302-SE5的构建 | 第68-69页 |
·拟南芥转SE5基因植株的分子检测 | 第69-70页 |
·转SE5基因拟南芥植株纯合体的筛选 | 第70-71页 |
·转SE5基因拟南芥可以增强种子对百草枯的耐受性 | 第71-73页 |
·转SE5基因拟南芥可以降低百草枯喷施对叶片的氧化伤害 | 第73页 |
·讨论 | 第73-76页 |
第四章 HO催化底物血红素对盐胁迫下种子萌发的影响 | 第76-96页 |
·材料与方法 | 第77-81页 |
·植物材料与处理 | 第77页 |
·主要生物化学和分子生物学试剂 | 第77-78页 |
·主要仪器设备 | 第78页 |
·引物设计 | 第78-79页 |
·水稻和小麦种子总RNA的提取 | 第79-80页 |
·cDNA第一链的合成 | 第80页 |
·NO含量的测定 | 第80页 |
·TBARS及抗氧化酶活性的测定 | 第80页 |
·还原糖和可溶性总糖含量的测定 | 第80页 |
·淀粉酶活性的测定 | 第80页 |
·植物体K/Na比的测定 | 第80页 |
·HO活性的测定 | 第80-81页 |
·统计分析 | 第81页 |
·结果与分析 | 第81-93页 |
·hematin缓解NaCl胁迫对水稻种子萌发的抑制 | 第81-83页 |
·hematin提高NaCl胁迫下水稻种子淀粉酶活性、还原糖及可溶性总糖含量 | 第83-85页 |
·hematin对NaCl胁迫下水稻萌发种子氧化伤害的影响 | 第85-87页 |
·hemin预处理对NaCl胁迫下小麦种子萌发的影响 | 第87-88页 |
·hemin可以诱导小麦种子HO1的表达、 | 第88-89页 |
·hemin提高NaCl胁迫下小麦种子淀粉酶活性、增加还原糖及可溶性总糖含量 | 第89-90页 |
·hemin显著提高NaCl胁迫下小麦萌发种子中的K/Na比 | 第90页 |
·hemin对NaCl胁迫下小麦萌发种子氧化伤害的影响 | 第90-91页 |
·hemin和SNP预处理促进NO的产生 | 第91-93页 |
·讨论 | 第93-96页 |
参考文献 | 第96-108页 |
全文结论以及研究的创新点 | 第108-110页 |
攻读学位期间发表与待发表的论文 | 第110-112页 |
附录 | 第112-116页 |
致谢 | 第116页 |