摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 绪论 | 第12-30页 |
·研究目的和意义 | 第12页 |
·口蹄疫病毒的概况 | 第12-20页 |
·FMD 历史 | 第13页 |
·FMD 的流行现状及危害 | 第13-14页 |
·FMDV 的研究进展 | 第14-20页 |
·FMDV 在细胞凋亡中的研究进展 | 第20-25页 |
·细胞凋亡的发生机制 | 第20-21页 |
·细胞凋亡的两种主要途径 | 第21-25页 |
·逆转录病毒载体系统的研究进展 | 第25-29页 |
·逆转录病毒载体结构特点 | 第25页 |
·逆转录病毒载体系统 | 第25-27页 |
·逆转录病毒表达系统基本原理 | 第27页 |
·逆转录病毒载体系统的应用 | 第27-28页 |
·逆转录病毒载体涉及的问题 | 第28-29页 |
·逆转录病毒载体系统的缺陷 | 第29页 |
·研究内容和方法 | 第29-30页 |
第二章 O 型口蹄疫病毒 OA/58 株 Lab 基因的克隆及分析 | 第30-42页 |
·前言 | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第31-37页 |
·实验材料 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-37页 |
·结果 | 第37-40页 |
·目的片段的扩增 | 第37页 |
·2 pGEM-T Easy-Lab 的 PCR 和酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
·序列分析结果 | 第38-39页 |
·L~(PRO)高级结构的模拟和分析 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第三章 携带FMDV 前导蛋白基因逆转录病毒载体的构建及其在牛肾细胞中的表达 | 第42-56页 |
·材料与方法 | 第42-43页 |
·材料 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-50页 |
·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第43-45页 |
·体外转染质粒的制备 | 第45页 |
·重组质粒浓度和纯度的测定 | 第45页 |
·嘌呤霉素对MDBK 细胞最小致死浓度的测定 | 第45页 |
·四环素对重组逆转录病毒载体 pBPSTR1-Lab 的调控浓度 | 第45-46页 |
·转染GP2-293 包装细胞并且收获假病毒 | 第46页 |
·假病毒形态的电镜观察 | 第46页 |
·感染 MDBK 细胞并抗性筛选阳性细胞 | 第46-47页 |
·目的基因的检测 | 第47-50页 |
·结果与分析 | 第50-54页 |
·pBSTR1-Lab 重组表达质粒的鉴定 | 第50-51页 |
·重组表达质粒浓度与纯度的鉴定 | 第51页 |
·嘌呤霉素对MDBK 细胞的最小致死浓度 | 第51页 |
·四环素对重组逆转录病毒载体 pBPSTR1-Lab 的调控浓度 | 第51页 |
·假病毒的获得 | 第51-52页 |
·假病毒粒子的形态观察 | 第52页 |
·抗性MDBK 细胞的筛选 | 第52页 |
·目的基因整合和转录水平的检测 | 第52-53页 |
·Lab 基因表达产物的 Western-blot 检测 | 第53-54页 |
·诱导前导蛋白表达的显微镜观察结果 | 第54页 |
·野生型逆转录病毒的检测 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第四章 研究结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简历 | 第65页 |