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携带口蹄疫病毒(FMDV)前导蛋白基因逆转录病毒载体的构建及其在牛肾细胞中的表达

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-30页
   ·研究目的和意义第12页
   ·口蹄疫病毒的概况第12-20页
     ·FMD 历史第13页
     ·FMD 的流行现状及危害第13-14页
     ·FMDV 的研究进展第14-20页
   ·FMDV 在细胞凋亡中的研究进展第20-25页
     ·细胞凋亡的发生机制第20-21页
     ·细胞凋亡的两种主要途径第21-25页
   ·逆转录病毒载体系统的研究进展第25-29页
     ·逆转录病毒载体结构特点第25页
     ·逆转录病毒载体系统第25-27页
     ·逆转录病毒表达系统基本原理第27页
     ·逆转录病毒载体系统的应用第27-28页
     ·逆转录病毒载体涉及的问题第28-29页
     ·逆转录病毒载体系统的缺陷第29页
   ·研究内容和方法第29-30页
第二章 O 型口蹄疫病毒 OA/58 株 Lab 基因的克隆及分析第30-42页
   ·前言第30-31页
   ·材料与方法第31-37页
     ·实验材料第31-32页
     ·实验方法第32-37页
   ·结果第37-40页
     ·目的片段的扩增第37页
     ·2 pGEM-T Easy-Lab 的 PCR 和酶切鉴定结果第37-38页
     ·序列分析结果第38-39页
     ·L~(PRO)高级结构的模拟和分析第39-40页
   ·讨论第40-42页
第三章 携带FMDV 前导蛋白基因逆转录病毒载体的构建及其在牛肾细胞中的表达第42-56页
   ·材料与方法第42-43页
     ·材料第42-43页
   ·方法第43-50页
     ·重组表达质粒的构建及鉴定第43-45页
     ·体外转染质粒的制备第45页
     ·重组质粒浓度和纯度的测定第45页
     ·嘌呤霉素对MDBK 细胞最小致死浓度的测定第45页
     ·四环素对重组逆转录病毒载体 pBPSTR1-Lab 的调控浓度第45-46页
     ·转染GP2-293 包装细胞并且收获假病毒第46页
     ·假病毒形态的电镜观察第46页
     ·感染 MDBK 细胞并抗性筛选阳性细胞第46-47页
     ·目的基因的检测第47-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·pBSTR1-Lab 重组表达质粒的鉴定第50-51页
     ·重组表达质粒浓度与纯度的鉴定第51页
     ·嘌呤霉素对MDBK 细胞的最小致死浓度第51页
     ·四环素对重组逆转录病毒载体 pBPSTR1-Lab 的调控浓度第51页
     ·假病毒的获得第51-52页
     ·假病毒粒子的形态观察第52页
     ·抗性MDBK 细胞的筛选第52页
     ·目的基因整合和转录水平的检测第52-53页
     ·Lab 基因表达产物的 Western-blot 检测第53-54页
     ·诱导前导蛋白表达的显微镜观察结果第54页
     ·野生型逆转录病毒的检测第54页
   ·讨论第54-56页
第四章 研究结论第56-57页
参考文献第57-64页
致谢第64-65页
作者简历第65页

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