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基因拆分限控转基因漂流的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 文献综述第11-30页
   ·转基因作物产业化发展现状及发展趋势第11-13页
   ·转基因抗除草剂作物第13页
   ·基因漂流限控措施的研究进展第13-19页
     ·母性遗传(叶绿体转基因技术)第14-16页
     ·雄性不育(Male sterility)第16页
     ·种子不育(Seed sterility)第16-17页
     ·闭花受精和无融合生殖(Cleistogamy and apomixes)第17-18页
     ·转基因削弱技术(Transgenic mitigation,TM)第18页
     ·外源基因删除技术(Gene deletor)第18-19页
   ·基因拆分技术第19-28页
     ·蛋白内含肽的种类第19-21页
     ·蛋白内含肽的剪接机理第21-22页
     ·蛋白内含肽的应用第22-26页
     ·Ssp DnaE intein 的研究进展第26-28页
   ·目的意义第28-30页
第二章 材料与方法第30-38页
   ·材料第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·质粒和菌株第30页
     ·酶和试剂盒第30页
     ·培养基第30页
     ·实验仪器第30-31页
   ·方法第31-38页
     ·质粒DNA 的小量提取第31-32页
     ·大肠杆菌感受态的制备第32页
     ·大肠杆菌的转化第32页
     ·冻融法回收目的基因片段第32-33页
     ·Kit 回收DNA 片段第33页
     ·植物表达载体的构建第33-34页
       ·pG_2 植物表达载体的构建第33页
       ·pEPSPSn-In 表达载体构建第33-34页
       ·pIC-EPSPSC 植物表达载体的构建第34页
     ·烟草转化第34-35页
     ·烟草DNA 的提取(CTAB 法)第35页
     ·烟草叶片总RNA 的提取(Trizol 法)第35页
     ·转基因烟草的分子检测第35-36页
     ·转基因烟草的田间草甘膦抗性检测第36-37页
     ·T_1 代转基因烟草种子在培养基上的草甘膦抗性分析第37页
     ·转基因烟草卡那霉素(100 mg/L)检测第37页
     ·转EPSPSn-In 和IC-EPSPSC 基因烟草的杂交第37-38页
第三章 实验结果与分析第38-55页
 第一节 转G_2-AROA 基因烟草的草甘膦抗性分析第38-44页
     ·PG_2 植物表达载体的构建第38-39页
     ·G_2-AROA 烟草的遗传转化第39-40页
     ·转G_2-AROA 基因烟草的田间抗性测定第40-42页
     ·非转基因烟草在草甘膦培养基上临界浓度的确定第42-43页
     ·转G_2-AROA 基因烟草在草甘膦培养基上的抗性检测第43-44页
 第二节 INTEIN 介导的蛋白剪接使拆分基因重新组装成有功能的蛋白第44-53页
     ·PEPSPSN-IN 植物表达载体的构建第44-46页
     ·PI_C-EPSPS_C 植物表达载体的构建第46-47页
     ·EPSPSN-IN 和I_C-EPSPSC 基因的烟草遗传转化第47-48页
     ·不同类型转基因烟草在含100 MG/L 卡那霉素培养基上的生长情况第48-49页
     ·不同类型转基因烟草在84.5 PPM 草甘膦培养基上的萌芽生长情况第49-53页
 第三节 讨论第53-55页
第四章 结论与创新点第55-56页
   ·结论第55页
   ·创新点第55-56页
参考文献第56-65页
致谢第65-66页
作者简历第66页

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