| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-30页 |
| 1 Melittin的研究进展 | 第11-23页 |
| ·蜂毒 | 第11-15页 |
| ·Melittin | 第15-23页 |
| ·研究展望 | 第23页 |
| 2 RGD序列肽的研究进展 | 第23-30页 |
| ·RGD三肽识别序列 | 第24页 |
| ·RGD肽抑制肿瘤的作用 | 第24-30页 |
| ·研究展望 | 第30页 |
| 第二章 Melittin基因的克隆 | 第30-39页 |
| 1 实验材料 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-36页 |
| ·中华蜜蜂毒腺细胞总RNA的抽提 | 第30-31页 |
| ·RNA浓度及纯度测定 | 第31页 |
| ·引物合成 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR | 第32-33页 |
| ·2%琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·回收PCR产物 | 第33页 |
| ·PUCT载体构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒(pUCT-Mel)的构建与转化 | 第34页 |
| ·重组子(pUCT-Mel)的鉴定 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-39页 |
| ·中蜂毒腺总RNA样品纯度与浓度电泳检测 | 第36页 |
| ·中蜂Melittin成熟区序列的PCR产物琼脂糖电泳结果 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR产物纯化 | 第37页 |
| ·连接与转化 | 第37-38页 |
| ·重组子(pUCT-Mel)的鉴定 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39页 |
| 第三章 RGD序列肽的合成与RGD-Mel的重组表达 | 第39-44页 |
| 1 实验材料 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-41页 |
| ·RGD序列肽的合成 | 第39-40页 |
| ·RGD-Mel融合基因的构建 | 第40页 |
| ·重组质粒的构建及转化 | 第40页 |
| ·RGD-Mel融合基因的诱导表达 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE和Western blot分析 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白RGD-Mel的纯化 | 第41页 |
| ·体外活性检测 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·RGD-Mel融合基因的构建 | 第41-42页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
| ·RGD-Mel融合基因的阳性克隆测序 | 第42页 |
| ·重组表达产物RGD-Mel的SDS-PAGE电泳检测和Western blot分析 | 第42-43页 |
| ·体外生物活性检测 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44页 |
| 第四章 结论及研究进展 | 第44-47页 |
| 1 结论 | 第44-46页 |
| 2 后续研究 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
