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栉孔扇贝生殖相关基因DEAD-box家族和boule的cDNA克隆及其发育表达图式

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 生殖细胞发生的研究概况第9-33页
 1 原生殖细胞(Primordial Germ cell,PGC)形成方式第9-20页
 2 生殖细胞发生相关基因第20-25页
 3 DEAD-box 家族基因和DAZ 家族基因研究进展第25-32页
 4 总结与展望第32-33页
第二章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)DEAD-box 家族基因的克隆和序列特征分析第33-57页
 1 材料和方法第34-39页
   ·材料第34页
   ·方法第34-39页
     ·总RNA的提取第34-35页
     ·cDNA 第一链的合成第35页
     ·目的片段的PCR 扩增第35-36页
     ·目的片段的克隆第36-37页
     ·基因全长cDNA 序列的获得第37-38页
     ·序列及系统进化分析第38页
     ·蛋白三维结构预测第38-39页
     ·Cf-VASA 蛋白抗原决定簇预测第39页
 2 结果第39-53页
   ·DEAD-box 家族基因全长cDNA 的克隆策略第39页
   ·核苷酸序列特征第39-40页
   ·氨基酸序列特征第40-44页
   ·多序列比对和系统进化分析第44-46页
   ·蛋白三维结构特征第46-49页
   ·Cf-VASA 蛋白抗原决定簇预测与分析第49-53页
 3 讨论第53-57页
   ·高度保守的Cf-vasa、Cf-PL10和Cf-p68基因第53页
   ·Cf-VASA、Cf-PL10 和Cf-p68 蛋白的结构与功能第53-54页
   ·Cf-VASA 蛋白抗原决定簇的预测与分析第54-57页
第三章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)DEAD-box 家族基因的时空表达及 Cf-vasa 基因的发育表达图式第57-78页
 1 材料和方法第58-65页
   ·材料第58-59页
   ·方法第59-65页
     ·性腺组织学观察第59页
     ·DEAD-box 家族基因时空表达的RT-PCR 分析第59-60页
     ·Cf-vasa 基因时空表达的原位杂交分析第60-64页
     ·VASA–His、VASA–GST 融合蛋白的体外表达第64-65页
 2 结果第65-73页
   ·DEAD-box 家族基因时空表达的RT-PCR 分析第65-67页
   ·性腺发育周期的Cf-vasa 基因表达图式第67-71页
   ·胚胎和幼虫发育的Cf-vasa 基因表达图式第71-72页
   ·Cf-VASA 融合蛋白的体外表达第72-73页
 3 讨论第73-78页
   ·Cf-vasa 基因在栉孔扇贝生殖细胞中特异表达第73-74页
   ·Cf-vasa mRNA 可能作为母源的生殖质成分参与栉孔扇贝原生殖细胞的分化第74-76页
   ·栉孔扇贝原生殖细胞发生和迁移第76-77页
   ·Cf-PL10 和Cf-p68 可能参与栉孔扇贝配子发生第77-78页
第四章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)Cf-boule 基因的克隆及其发育表达图式第78-92页
 1 材料和方法第78-80页
   ·材料第78页
   ·方法第78-80页
     ·Cf-boule基因全长cDNA的克隆第79页
     ·Cf-boule 基因全长cDNA 的生物信息学分析第79页
     ·Cf-boule 基因的时空表达分析第79-80页
 2 结果第80-88页
   ·Cf-boule 基因全长cDNA 的克隆策略第80页
   ·Cf-boule cDNA 的核苷酸和编码氨基酸序列特征第80-81页
   ·多序列比对和系统进化分析第81-83页
   ·Cf-BOULE 蛋白三维结构特征第83-84页
   ·Cf-BOULE 蛋白抗原决定簇预测与分析第84-86页
   ·Cf-boule 基因时空表达的RT-PCR 分析第86-87页
   ·性腺发育周期的Cf-boule 基因表达图式第87-88页
   ·胚胎和幼虫发育的Cf-boule基因表达图式第88页
 3 讨论第88-92页
   ·Cf-boule 基因是DAZ 基因家族成员第89页
   ·Cf-boule 在性腺中的表达特征类似DAZl 相关基因第89-90页
   ·Cf-boule mRNA 作为母源成分不参与栉孔扇贝原生殖细胞形成第90-92页
小结第92-93页
参考文献第93-113页
发表和完成论文第113-114页
致谢第114页

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