摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 生殖细胞发生的研究概况 | 第9-33页 |
1 原生殖细胞(Primordial Germ cell,PGC)形成方式 | 第9-20页 |
2 生殖细胞发生相关基因 | 第20-25页 |
3 DEAD-box 家族基因和DAZ 家族基因研究进展 | 第25-32页 |
4 总结与展望 | 第32-33页 |
第二章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)DEAD-box 家族基因的克隆和序列特征分析 | 第33-57页 |
1 材料和方法 | 第34-39页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-39页 |
·总RNA的提取 | 第34-35页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第35页 |
·目的片段的PCR 扩增 | 第35-36页 |
·目的片段的克隆 | 第36-37页 |
·基因全长cDNA 序列的获得 | 第37-38页 |
·序列及系统进化分析 | 第38页 |
·蛋白三维结构预测 | 第38-39页 |
·Cf-VASA 蛋白抗原决定簇预测 | 第39页 |
2 结果 | 第39-53页 |
·DEAD-box 家族基因全长cDNA 的克隆策略 | 第39页 |
·核苷酸序列特征 | 第39-40页 |
·氨基酸序列特征 | 第40-44页 |
·多序列比对和系统进化分析 | 第44-46页 |
·蛋白三维结构特征 | 第46-49页 |
·Cf-VASA 蛋白抗原决定簇预测与分析 | 第49-53页 |
3 讨论 | 第53-57页 |
·高度保守的Cf-vasa、Cf-PL10和Cf-p68基因 | 第53页 |
·Cf-VASA、Cf-PL10 和Cf-p68 蛋白的结构与功能 | 第53-54页 |
·Cf-VASA 蛋白抗原决定簇的预测与分析 | 第54-57页 |
第三章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)DEAD-box 家族基因的时空表达及 Cf-vasa 基因的发育表达图式 | 第57-78页 |
1 材料和方法 | 第58-65页 |
·材料 | 第58-59页 |
·方法 | 第59-65页 |
·性腺组织学观察 | 第59页 |
·DEAD-box 家族基因时空表达的RT-PCR 分析 | 第59-60页 |
·Cf-vasa 基因时空表达的原位杂交分析 | 第60-64页 |
·VASA–His、VASA–GST 融合蛋白的体外表达 | 第64-65页 |
2 结果 | 第65-73页 |
·DEAD-box 家族基因时空表达的RT-PCR 分析 | 第65-67页 |
·性腺发育周期的Cf-vasa 基因表达图式 | 第67-71页 |
·胚胎和幼虫发育的Cf-vasa 基因表达图式 | 第71-72页 |
·Cf-VASA 融合蛋白的体外表达 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-78页 |
·Cf-vasa 基因在栉孔扇贝生殖细胞中特异表达 | 第73-74页 |
·Cf-vasa mRNA 可能作为母源的生殖质成分参与栉孔扇贝原生殖细胞的分化 | 第74-76页 |
·栉孔扇贝原生殖细胞发生和迁移 | 第76-77页 |
·Cf-PL10 和Cf-p68 可能参与栉孔扇贝配子发生 | 第77-78页 |
第四章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)Cf-boule 基因的克隆及其发育表达图式 | 第78-92页 |
1 材料和方法 | 第78-80页 |
·材料 | 第78页 |
·方法 | 第78-80页 |
·Cf-boule基因全长cDNA的克隆 | 第79页 |
·Cf-boule 基因全长cDNA 的生物信息学分析 | 第79页 |
·Cf-boule 基因的时空表达分析 | 第79-80页 |
2 结果 | 第80-88页 |
·Cf-boule 基因全长cDNA 的克隆策略 | 第80页 |
·Cf-boule cDNA 的核苷酸和编码氨基酸序列特征 | 第80-81页 |
·多序列比对和系统进化分析 | 第81-83页 |
·Cf-BOULE 蛋白三维结构特征 | 第83-84页 |
·Cf-BOULE 蛋白抗原决定簇预测与分析 | 第84-86页 |
·Cf-boule 基因时空表达的RT-PCR 分析 | 第86-87页 |
·性腺发育周期的Cf-boule 基因表达图式 | 第87-88页 |
·胚胎和幼虫发育的Cf-boule基因表达图式 | 第88页 |
3 讨论 | 第88-92页 |
·Cf-boule 基因是DAZ 基因家族成员 | 第89页 |
·Cf-boule 在性腺中的表达特征类似DAZl 相关基因 | 第89-90页 |
·Cf-boule mRNA 作为母源成分不参与栉孔扇贝原生殖细胞形成 | 第90-92页 |
小结 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-113页 |
发表和完成论文 | 第113-114页 |
致谢 | 第114页 |