摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 引言 | 第10-17页 |
·Rab7的研究进展 | 第10-14页 |
·Rab蛋白 | 第10-11页 |
·Rab7的蛋白结构及定位 | 第11页 |
·Rab7在内吞过程中的作用 | 第11-12页 |
·Rab7与信号转导 | 第12-13页 |
·Rab7与凋亡 | 第13页 |
·Rab7与疾病 | 第13-14页 |
·结语 | 第14页 |
·TLR4的研究进展 | 第14-17页 |
·TLR4的结构和组织分布 | 第14页 |
·TLR4介导的信号传导途径 | 第14-15页 |
·TLR4信号途径的影响因素 | 第15-16页 |
·TLR4与疾病 | 第16页 |
·结语 | 第16-17页 |
2 Rab7基因的克隆及序列分析 | 第17-35页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·细胞株、菌种、动物 | 第17页 |
·载体、酶和试剂 | 第17-18页 |
·培养基、溶液及其配制 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·引物设计与合成 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-29页 |
·小鼠巨噬细胞株 RAW264.7的培养 | 第19页 |
·小鼠组织/细胞总 RNA 的提取及cDNA 的制备 | 第19-20页 |
·扩增 Rab7的RT-PCR反应 | 第20-21页 |
·Rab7全长序列的克隆、测序 | 第21-28页 |
·无内毒素质粒提取 | 第28-29页 |
·结果与分析 | 第29-35页 |
·RAW264.7细胞和组织总RNA的提取与检测 | 第29页 |
·Rab7在小鼠的组织、免疫细胞中的表达 | 第29-30页 |
·小鼠Rab7全长序列的克隆 | 第30-33页 |
·Rab7蛋白序列的分析 | 第33-35页 |
3 Rab7的功能实验 | 第35-46页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·质粒、细胞株 | 第35页 |
·实验试剂 | 第35页 |
·相关溶液配方 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·引物设计与合成 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·细胞计数 | 第36-37页 |
·细胞瞬时转染 | 第37页 |
·Western blot | 第37-38页 |
·巨噬细胞吞噬功能的测定 | 第38页 |
·细胞因子的测定 | 第38-40页 |
·数据处理 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-46页 |
·测定蛋白浓度 | 第41页 |
·RAW264.7 细胞瞬时转染 Rab7 对巨噬细胞吞噬功能的影响 | 第41-43页 |
·pcDNA3.1、pcDNA-Rab7、pcDNA-Rab7T22N 转染 RAW264.7 细胞 | 第43-44页 |
·Rab7 抑制LPS 诱导的巨噬细胞中IL-6、IL-1β的表达 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46页 |
5 结论 | 第46-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
作者简介 | 第52页 |