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盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基基因的克隆及其选择性剪切体的表达研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
前言第11-12页
第一章 盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基cDNA的全长克隆第12-24页
 1 材料和方法第12-18页
   ·材料第12页
   ·方法第12-18页
 2 结果与分析第18-22页
   ·盐生杜氏藻总RNA的质量检测第18-19页
   ·5’RACE的结果第19页
   ·3’RACE的结果第19-20页
   ·测序结果的拼接第20-21页
   ·电泳结果第21-22页
   ·19kD亚基的四条完整cDNA全长第22页
 3 讨论第22-24页
   ·提高5’RACE的成功率第22-23页
   ·不同的3’RACE结果第23页
   ·19kD亚基多mRNA的克隆第23-24页
第二章 盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基选择性剪切方式的确定第24-30页
 1 材料和方法第24-26页
   ·材料第24页
   ·方法第24-26页
 2 结果与分析第26-28页
   ·盐生杜氏藻基因组DNA的提取第26-27页
   ·盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基基因组的克隆第27页
   ·盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基基因内含子结构的分析第27-28页
 3 讨论第28-30页
   ·盐生杜氏藻基因组的提取第28页
   ·基因扩增第28-29页
   ·基因内含子的确定第29页
   ·选择性剪切方式的确定第29-30页
第三章 盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基基因的生物信息学分析第30-41页
 1 分析方法第30-31页
   ·核苷酸序列的相关分析第30页
   ·蛋白质序列的相关分析第30-31页
 2 结果与分析第31-40页
   ·GC含量分布图第31-32页
   ·19kD亚基ORF的分析第32-36页
   ·相似性搜索第36页
   ·蛋白质序列的相关分析第36-40页
 3 讨论第40-41页
   ·盐生杜氏藻的线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基cDNA序列的分析第40页
   ·线粒体信号肽的预测结果的讨论第40-41页
第四章 盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ 19kD亚基基因选择性剪切的初步研究第41-53页
 1 材料和方法第41-44页
   ·材料第41页
   ·方法第41-44页
 2 结果与分析第44-51页
   ·引物的验证第44-45页
   ·荧光定量PCR的结果第45-51页
 3 讨论第51-53页
   ·荧光定量PCR的引物设计要求第51页
   ·19kD亚基基因的差异表达第51-53页
第五章 不同胁迫下盐生杜氏藻线粒体复合体Ⅰ的酶活测定第53-60页
 1 材料和方法第53-55页
   ·材料第53-54页
   ·方法第54-55页
 2 结果与分析第55-58页
   ·标准曲线的制定第55-56页
   ·厌氧胁迫对复合体Ⅰ酶活的影响第56-57页
   ·盐胁迫对复合体Ⅰ酶活的影响第57页
   ·鱼藤酮对复合体Ⅰ酶活的影响第57-58页
 3 讨论第58-60页
   ·厌氧胁迫对复合体Ⅰ酶活的影响第58页
   ·盐胁迫对复合体Ⅰ酶活的影响第58-59页
   ·鱼藤酮对复合体Ⅰ酶活的影响第59-60页
结论第60-61页
致谢第61-62页
综述 能量转换型NADH辅酶Q氧化还原酶(复合体Ⅰ)第62-78页
 1、氧化磷酸化系统中的复合体Ⅰ第62-65页
   ·线粒体复合体Ⅰ第62-63页
   ·细菌复合体Ⅰ第63-65页
 2、结构-两种不同的结构及其各自的功能第65-68页
   ·隆起部分第65-67页
   ·膜区域第67-68页
 3 酶活及抑制机制第68-71页
   ·动力学的测量第68-69页
   ·抑制机制第69页
   ·Q-结合位点第69-71页
 4 复合体Ⅰ的进化:结构和功能关系上的新观点第71-72页
 5 能量藕联机制第72-73页
 6 与复合体Ⅰ有关的神经退化性疾病第73-77页
   ·mtDNk突变第73-74页
   ·nDNA的突变第74-76页
   ·氧化胁迫、环境毒素与复合体Ⅰ第76-77页
 7 结束语第77-78页
参考文献第78-91页
在读期间科研成果简介第91-92页

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