| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一章 人大肠癌细胞系蛋白质双向凝胶电泳技术的建立及其优化 | 第20-36页 |
| 1 材料与方法 | 第20-28页 |
| ·材料 | 第20-24页 |
| ·方法 | 第24-28页 |
| 2 结果 | 第28-33页 |
| ·改良Bradford法测量蛋白浓度 | 第28-30页 |
| ·不同样品制备方法2-DE比较 | 第30-31页 |
| ·不同样品处理方法2-DE图谱斑点检测比较 | 第31-32页 |
| ·不同样品制备方法凝胶图像蛋白质分离效果比较 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| 第二章 人大肠癌高低转移潜能细胞株SW480和SW620的蛋白质组双向凝胶电泳分析 | 第36-54页 |
| 1 材料和方法 | 第36-38页 |
| ·化学试剂 | 第36页 |
| ·细胞培养与蛋白质样品制备 | 第36-37页 |
| ·双向电泳 | 第37页 |
| ·凝胶染色 | 第37页 |
| ·凝胶成像及图像分析 | 第37-38页 |
| 2 结果 | 第38-51页 |
| ·SW620和SW480细胞银染2-DE图谱 | 第38-40页 |
| ·SW620和SW480细胞蛋白质考染2-DE图谱 | 第40页 |
| ·人大肠癌高低转移潜能细胞系2-DE图谱的差异分析 | 第40-45页 |
| ·SW620和SW480细胞蛋白质组的表达变化 | 第45-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| 第三章 双向凝胶电泳差异表达蛋白质的质谱鉴定和验证 | 第54-72页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| ·化学试剂 | 第54-55页 |
| ·胶内酶切及质谱鉴定 | 第55页 |
| ·MALDI-TOF-MS分析 | 第55页 |
| ·数据库搜索 | 第55页 |
| ·编码差异候选蛋白的mRNA在高低转移株间的半定量RT-PCR分析 | 第55-56页 |
| ·蛋白质印迹(western blot)检测 | 第56-57页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-66页 |
| ·差异表达蛋白质的PMF鉴定 | 第58-64页 |
| ·编码候选蛋白mRNA差异表达水平的半定量RT-PCR验证 | 第64-65页 |
| ·高、低转移株间差异候选蛋白在蛋白水平的表达差异验证 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-72页 |
| 第四章 热休克蛋白27与大肠癌转移的相关性分析 | 第72-82页 |
| 1 材料与方法 | 第72-73页 |
| ·病例资料 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72-73页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第73页 |
| ·染色结果判断 | 第73页 |
| ·统计学方法 | 第73页 |
| 2 结果 | 第73-78页 |
| ·HSP27在大肠癌组织中的表达情况 | 第73-74页 |
| ·HSP27表达和临床病理特征的关系 | 第74-76页 |
| ·特殊病例分析 | 第76-78页 |
| 3 讨论 | 第78-82页 |
| 全文小结 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-96页 |
| 附录一 | 第96-98页 |
| 附录二 | 第98-108页 |
| 攻读硕士学位期间成果 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
