摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-17页 |
引言 | 第17-19页 |
第一篇 日本血吸虫童虫虫源性细胞免疫小鼠诱生的保护性效果 | 第19-43页 |
前言 | 第19-20页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
·寄生虫来源与实验动物 | 第20页 |
·活细胞与细胞碎片的制备 | 第20页 |
·PCR检测宿主细胞污染和细胞种属特异性鉴定 | 第20-21页 |
·免疫方案实施 | 第21-22页 |
·攻击感染 | 第22页 |
·血清和虫体收集、虫卵计数和虫卵肉芽肿的测量 | 第22-23页 |
·抗体应答检测 | 第23-24页 |
·SDS-PAGE电泳和免疫印迹 | 第24页 |
·统计学分析 | 第24页 |
2 结果 | 第24-35页 |
·活童虫源性细胞 形态学观察 | 第24-25页 |
·PCR检测宿主细胞污染和细胞种属特异性的结果 | 第25页 |
·活童虫源性细胞诱导抗血吸虫攻击感染 | 第25-26页 |
·肝脏外观和抗肝卵肉芽肿形成效果 | 第26-30页 |
·血吸虫细胞免疫鼠的抗体应答 | 第30-33页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第33页 |
·免疫印迹分析 | 第33-35页 |
3 讨论 | 第35-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
第二篇 日本血吸虫童虫培养细胞免疫小鼠诱生的保护性效果 | 第43-88页 |
前言 | 第43-44页 |
1 材料和方法 | 第44-51页 |
·寄生虫与实验动物 | 第44-45页 |
·细胞制备、体外培养与种属鉴定 | 第45页 |
·免疫方案 | 第45-47页 |
·攻击感染 | 第47页 |
·小鼠剖杀、虫体收集、肝卵处理及保护效果分析 | 第47-48页 |
·不同发育期虫体抗原及细胞抗原制备 | 第48页 |
·SDS-PAGE比较不同免疫源的组分差异 | 第48页 |
·免疫鼠脾脏分泌的细胞因子检测 | 第48-49页 |
·ELISA检测抗体应答 | 第49页 |
·被动转移试验 | 第49-50页 |
·免疫鼠脾细胞体外杀伤试验 | 第50-51页 |
·统计学分析 | 第51页 |
2 结果 | 第51-74页 |
·传代培养细胞的种属来源鉴定与形态学观察 | 第51页 |
·12和18天培养细胞诱导小鼠抗攻击感染 | 第51-57页 |
·肝脏外观和抗肝卵肉芽肿形成效果 | 第57-58页 |
·SDS-PAGE比较三种不同抗原的组分差异 | 第58-59页 |
·抗原刺激的脾细胞和血清中IFN-g,IL-4水平 | 第59-63页 |
·特异性抗体和IgG亚类检测 | 第63-72页 |
·被动转移试验的虫荷及肝卵荷 | 第72-73页 |
·免疫鼠脾细胞体外细胞毒试验 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
第三篇 日本血吸虫细胞型免疫原模拟表位的筛选及鉴定 | 第88-108页 |
前言 | 第88-89页 |
1 材料与方法 | 第89-92页 |
·主要材料与试剂 | 第89页 |
·噬菌体库和宿主菌 | 第89页 |
·虫体与实验动物 | 第89页 |
·免疫血清的制备 | 第89页 |
·JC-12IgG多克隆抗体筛选随机十二肽库 | 第89-91页 |
·单克隆噬菌体扩增 | 第91页 |
·ELISA检测阳性噬菌体克隆 | 第91页 |
·噬菌体DNA测序及生物信息学分析 | 第91页 |
·免疫、收集血清及攻击感染 | 第91-92页 |
·ELISA检测单个噬菌体或混合噬菌体免疫鼠血清中的抗体应答 | 第92页 |
2 结果 | 第92-100页 |
·阳性噬菌体克隆的确定 | 第92-94页 |
·阳性噬菌体克隆测序及同源性比较 | 第94-98页 |
·筛选的12肽诱导抗血吸虫感染的保护效果 | 第98页 |
·阳性噬菌体克隆免疫小鼠诱导的抗体应答 | 第98-100页 |
3 讨论 | 第100-103页 |
参考文献 | 第103-108页 |
综述:血吸虫复合免疫原的保护性效果 | 第108-125页 |
致谢 | 第125-126页 |
攻读学位期间主要研究成果 | 第126页 |