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日本血吸虫童虫细胞诱导小鼠抗攻击感染的免疫学研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-17页
引言第17-19页
第一篇 日本血吸虫童虫虫源性细胞免疫小鼠诱生的保护性效果第19-43页
 前言第19-20页
 1 材料与方法第20-24页
   ·寄生虫来源与实验动物第20页
   ·活细胞与细胞碎片的制备第20页
   ·PCR检测宿主细胞污染和细胞种属特异性鉴定第20-21页
   ·免疫方案实施第21-22页
   ·攻击感染第22页
   ·血清和虫体收集、虫卵计数和虫卵肉芽肿的测量第22-23页
   ·抗体应答检测第23-24页
   ·SDS-PAGE电泳和免疫印迹第24页
   ·统计学分析第24页
 2 结果第24-35页
   ·活童虫源性细胞 形态学观察第24-25页
   ·PCR检测宿主细胞污染和细胞种属特异性的结果第25页
   ·活童虫源性细胞诱导抗血吸虫攻击感染第25-26页
   ·肝脏外观和抗肝卵肉芽肿形成效果第26-30页
   ·血吸虫细胞免疫鼠的抗体应答第30-33页
   ·SDS-PAGE电泳第33页
   ·免疫印迹分析第33-35页
 3 讨论第35-38页
 参考文献第38-43页
第二篇 日本血吸虫童虫培养细胞免疫小鼠诱生的保护性效果第43-88页
 前言第43-44页
 1 材料和方法第44-51页
   ·寄生虫与实验动物第44-45页
   ·细胞制备、体外培养与种属鉴定第45页
   ·免疫方案第45-47页
   ·攻击感染第47页
   ·小鼠剖杀、虫体收集、肝卵处理及保护效果分析第47-48页
   ·不同发育期虫体抗原及细胞抗原制备第48页
   ·SDS-PAGE比较不同免疫源的组分差异第48页
   ·免疫鼠脾脏分泌的细胞因子检测第48-49页
   ·ELISA检测抗体应答第49页
   ·被动转移试验第49-50页
   ·免疫鼠脾细胞体外杀伤试验第50-51页
   ·统计学分析第51页
 2 结果第51-74页
   ·传代培养细胞的种属来源鉴定与形态学观察第51页
   ·12和18天培养细胞诱导小鼠抗攻击感染第51-57页
   ·肝脏外观和抗肝卵肉芽肿形成效果第57-58页
   ·SDS-PAGE比较三种不同抗原的组分差异第58-59页
   ·抗原刺激的脾细胞和血清中IFN-g,IL-4水平第59-63页
   ·特异性抗体和IgG亚类检测第63-72页
   ·被动转移试验的虫荷及肝卵荷第72-73页
   ·免疫鼠脾细胞体外细胞毒试验第73-74页
 3 讨论第74-80页
 参考文献第80-88页
第三篇 日本血吸虫细胞型免疫原模拟表位的筛选及鉴定第88-108页
 前言第88-89页
 1 材料与方法第89-92页
   ·主要材料与试剂第89页
     ·噬菌体库和宿主菌第89页
     ·虫体与实验动物第89页
     ·免疫血清的制备第89页
   ·JC-12IgG多克隆抗体筛选随机十二肽库第89-91页
   ·单克隆噬菌体扩增第91页
   ·ELISA检测阳性噬菌体克隆第91页
   ·噬菌体DNA测序及生物信息学分析第91页
   ·免疫、收集血清及攻击感染第91-92页
   ·ELISA检测单个噬菌体或混合噬菌体免疫鼠血清中的抗体应答第92页
 2 结果第92-100页
   ·阳性噬菌体克隆的确定第92-94页
   ·阳性噬菌体克隆测序及同源性比较第94-98页
   ·筛选的12肽诱导抗血吸虫感染的保护效果第98页
   ·阳性噬菌体克隆免疫小鼠诱导的抗体应答第98-100页
 3 讨论第100-103页
 参考文献第103-108页
综述:血吸虫复合免疫原的保护性效果第108-125页
致谢第125-126页
攻读学位期间主要研究成果第126页

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