| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-29页 |
| 前言 | 第11页 |
| 第一章 胚胎干细胞的概念及应用前景 | 第11-29页 |
| ·胚胎干细胞的来源 | 第11-13页 |
| ·来自于早期胚胎内细胞团 | 第11-12页 |
| ·来自于原始生殖细胞 | 第12-13页 |
| ·胚胎干细胞的特性 | 第13页 |
| ·形态学特征 | 第13页 |
| ·具有高度的发育潜能和分化潜能(全能性或多能性) | 第13页 |
| ·具有生殖系嵌合能力和种系传递功能 | 第13页 |
| ·可以在体外无限扩增 | 第13页 |
| ·具有可操作性 | 第13页 |
| ·调节小鼠ES 细胞自我更新的主要信号通路 | 第13-16页 |
| ·LIF–BMP–OCT–Sox 通路 | 第13-15页 |
| ·FGF,Nanog 和其他通路 | 第15-16页 |
| ·胚胎干细胞的研究进展 | 第16-20页 |
| ·胚胎干细胞研究的里程碑 | 第16-17页 |
| ·小鼠ES 细胞的研究进展 | 第17-18页 |
| ·猪ES 细胞的研究进展 | 第18页 |
| ·牛 ES 细胞的研究进展 | 第18页 |
| ·羊ES 细胞的研究进展 | 第18-19页 |
| ·人ES 细胞的研究进展 | 第19页 |
| ·其他动物ES 细胞的研究概况 | 第19-20页 |
| ·ES 细胞分离和克隆的方法 | 第20页 |
| ·全胚饲养层法 | 第20页 |
| ·延迟着床法 | 第20页 |
| ·免疫外科法 | 第20页 |
| ·孤雌生殖法 | 第20页 |
| ·核移植细胞法 | 第20页 |
| ·胚胎干细胞的培养体系 | 第20-24页 |
| ·培养液 | 第20-21页 |
| ·饲养层及分化抑制物的选择 | 第21-24页 |
| ·胚胎干细胞的鉴定 | 第24-26页 |
| ·形态学鉴定 | 第24-25页 |
| ·碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，AKP)活性 | 第25页 |
| ·转录因子Oct-4 的表达 | 第25页 |
| ·胚胎干细胞特异性表面抗原的表达 | 第25页 |
| ·端粒酶活性 | 第25页 |
| ·核型分析 | 第25-26页 |
| ·体外分化能力鉴定 | 第26页 |
| ·体内分化能力鉴定 | 第26页 |
| ·嵌合体实验 | 第26页 |
| ·胚胎干细胞的应用前景 | 第26-27页 |
| ·生产克隆动物 | 第26页 |
| ·生产转基因动物 | 第26-27页 |
| ·加快组织工程发展 | 第27页 |
| ·研究发育中基因的作用 | 第27页 |
| ·研究细胞分化，建立细胞分化模型 | 第27页 |
| ·用于细胞、组织和器官的修复和疾病治疗 | 第27页 |
| ·胚胎干细胞研究面临的难题与挑战 | 第27-29页 |
| ·胚胎干细胞的建系 | 第27-28页 |
| ·胚胎干细胞的定向分化 | 第28页 |
| ·分化细胞的增殖 | 第28页 |
| ·技术上的突破 | 第28页 |
| ·如何克服移植排斥问题 | 第28页 |
| ·胚胎干细胞的安全性 | 第28-29页 |
| 第二篇 试验研究—昆白小鼠胚胎干细胞的分离、培养及鉴定 | 第29-41页 |
| 第二章 不同饲养层对昆白小鼠 ES 细胞分离克隆的影响 | 第29-34页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要仪器及用品 | 第29-30页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·STO 饲养层的制备 | 第31页 |
| ·MEF 饲养层的制备 | 第31-32页 |
| ·PEF 细胞饲养层的制备 | 第32页 |
| ·胚胎的获得与培养 | 第32-33页 |
| ·ES 细胞的分离培养与传代 | 第33页 |
| ·结果 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 BRL－CM 对昆白小鼠ES 细胞分离克隆的影响 | 第34-36页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要仪器及用品 | 第34-35页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35页 |
| ·BRL-CM 的制备 | 第35页 |
| ·饲养层的制备 | 第35页 |
| ·胚胎的获得与培养 | 第35页 |
| ·ES 细胞的分离培养与传代 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-36页 |
| ·桑椹胚和囊胚在BRL-CM 中的生长行为 | 第35页 |
| ·ES 细胞在BRL-CM 中的生长行为 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| 第四章 不同传代方法对昆白小鼠 ES 细胞分离克隆的影响 | 第36-38页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·主要仪器及用品 | 第36页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37页 |
| ·STO 饲养层的制备 | 第37页 |
| ·胚胎的获得与培养 | 第37页 |
| ·ES 细胞的分离、传代 | 第37页 |
| ·结果 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第五章 昆白小鼠 ES 细胞的鉴定 | 第38-41页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·主要仪器及用品 | 第38页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·STO 饲养层的制备 | 第39页 |
| ·胚胎的获得与培养 | 第39页 |
| ·ES 细胞的分离培养与传代 | 第39页 |
| ·形态学鉴定 | 第39页 |
| ·AKP 染色 | 第39页 |
| ·体外分化能力鉴定 | 第39页 |
| ·核型分析 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-41页 |
| ·形态学鉴定 | 第40页 |
| ·AKP 活性鉴定 | 第40页 |
| ·体外分化能力鉴定 | 第40页 |
| ·核型分析 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 附图 | 第50-53页 |
| 缩略语表 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 个人简介 | 第55页 |
