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载基因壳聚糖纳米粒的初步研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-11页
前言第11-13页
第一部分 质粒DNA的提取和纯化第13-23页
   ·仪器和试药第13-14页
   ·方法和结果第14-20页
     ·细菌小量培养第14页
     ·质粒基因的小量提取第14-15页
     ·质粒基因的酶切鉴定第15-16页
     ·细菌大量培养第16页
     ·质粒基因的大量提取和纯化(EndoFree Plasmid Giga Kit方案)第16-17页
     ·质粒纯化程序的凝胶电泳监测分析第17-18页
     ·质粒基因的含量、纯度及提取收率的测定第18-20页
   ·讨论第20-21页
 小结第21-23页
第二部分 质粒基因和壳聚糖含量测定方法学研究第23-35页
   ·荧光法测定质粒基因含量的方法学研究第23-29页
   ·苟三酮比色法测定壳聚糖含量的方法学研究第29-33页
   ·讨论第33页
 小结第33-35页
第三部分 载基因壳聚糖纳米粒的制备与优化第35-62页
   ·仪器和试药第35-36页
   ·方法和结果第36-60页
     ·空白壳聚糖纳米粒的制备第36-40页
     ·载基因壳聚糖纳米粒的制备第40-44页
     ·中心组合设计优化载基因壳聚糖纳米粒的制备工艺第44-58页
     ·载基因壳聚糖纳米粒的纯化第58-59页
     ·讨论第59-60页
 小结第60-62页
第四部分 载基因壳聚糖纳米粒的初步质量评价及载药机理研究第62-76页
   ·载基因壳聚糖纳米粒的初步质量评价第62-69页
     ·仪器和试药第62页
     ·方法和结果第62-69页
       ·载基因壳聚糖纳米粒的形态及表面性质评价第62-63页
       ·载基因纳米粒药物状态与含量评价第63-64页
       ·载基因纳米粒的体外稳定性评价第64-69页
     ·讨论第69页
   ·载基因壳聚糖纳米粒的载药机理研究第69-74页
     ·仪器和试药第69-70页
     ·方法和结果第70-73页
       ·载基因壳聚糖纳米粒的荧光扫描分析第70-71页
       ·载基因壳聚糖纳米粒的电性结合分析第71-72页
       ·载基因壳聚糖纳米粒的凝胶阻滞分析第72-73页
       ·载基因壳聚糖纳米粒的表面光电子能谱分析第73页
     ·讨论第73-74页
 小结第74-76页
第五部分 载基因壳聚糖纳米粒冻干品的制备第76-79页
   ·仪器和试药第76页
   ·方法和结果第76-78页
     ·载基因壳聚糖纳米粒冻干品的制备方法第76页
     ·冻干保护剂选择的评价方法和结果第76-77页
     ·载基因壳聚糖纳米粒冻干品的稳定性考察第77-78页
   ·小结与讨论第78-79页
第六部分 载基因壳聚糖纳米粒体外基因转染研究第79-87页
   ·仪器和试药第79-80页
   ·方法与结果第80-84页
     ·质粒DNA的扩增和纯化第80页
     ·Lovo细胞的传代培养第80-82页
     ·脂质体-pDNA转染复合物的制备第82页
     ·载基因壳聚糖纳米粒的制备第82-83页
     ·载基因壳聚糖纳米粒的体外基因转染第83-84页
   ·讨论第84页
 小结第84-87页
第七部分 载基因壳聚糖纳米粒的体外安全性评价第87-95页
   ·载基因壳聚糖纳米粒的细胞毒试验第87-90页
     ·仪器和试药第87页
     ·方法和结果第87-90页
       ·供试样品的制备第87-88页
       ·建立本实验室的L929细胞生长代谢标准曲线第88页
       ·MTT检测第88-90页
   ·载基因壳聚糖纳米粒的平板克隆形成试验第90-92页
     ·仪器及试药第90页
     ·方法及结果第90-92页
       ·制备细胞悬液第90-91页
       ·接种细胞第91页
       ·加样及培养第91页
       ·染色第91-92页
   ·载基因壳聚糖纳米粒的溶血试验第92-93页
     ·仪器及试药第92页
     ·方法及结果第92-93页
       ·供试样品的制备第92页
       ·溶血率的测定第92-93页
   ·讨论第93-94页
 小结第94-95页
总结第95-99页
壳聚糖作为基因传输载体的研究进展(综述)第99-111页
致谢第111页

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