中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分 质粒DNA的提取和纯化 | 第13-23页 |
·仪器和试药 | 第13-14页 |
·方法和结果 | 第14-20页 |
·细菌小量培养 | 第14页 |
·质粒基因的小量提取 | 第14-15页 |
·质粒基因的酶切鉴定 | 第15-16页 |
·细菌大量培养 | 第16页 |
·质粒基因的大量提取和纯化(EndoFree Plasmid Giga Kit方案) | 第16-17页 |
·质粒纯化程序的凝胶电泳监测分析 | 第17-18页 |
·质粒基因的含量、纯度及提取收率的测定 | 第18-20页 |
·讨论 | 第20-21页 |
小结 | 第21-23页 |
第二部分 质粒基因和壳聚糖含量测定方法学研究 | 第23-35页 |
·荧光法测定质粒基因含量的方法学研究 | 第23-29页 |
·苟三酮比色法测定壳聚糖含量的方法学研究 | 第29-33页 |
·讨论 | 第33页 |
小结 | 第33-35页 |
第三部分 载基因壳聚糖纳米粒的制备与优化 | 第35-62页 |
·仪器和试药 | 第35-36页 |
·方法和结果 | 第36-60页 |
·空白壳聚糖纳米粒的制备 | 第36-40页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的制备 | 第40-44页 |
·中心组合设计优化载基因壳聚糖纳米粒的制备工艺 | 第44-58页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的纯化 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
小结 | 第60-62页 |
第四部分 载基因壳聚糖纳米粒的初步质量评价及载药机理研究 | 第62-76页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的初步质量评价 | 第62-69页 |
·仪器和试药 | 第62页 |
·方法和结果 | 第62-69页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的形态及表面性质评价 | 第62-63页 |
·载基因纳米粒药物状态与含量评价 | 第63-64页 |
·载基因纳米粒的体外稳定性评价 | 第64-69页 |
·讨论 | 第69页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的载药机理研究 | 第69-74页 |
·仪器和试药 | 第69-70页 |
·方法和结果 | 第70-73页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的荧光扫描分析 | 第70-71页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的电性结合分析 | 第71-72页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的凝胶阻滞分析 | 第72-73页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的表面光电子能谱分析 | 第73页 |
·讨论 | 第73-74页 |
小结 | 第74-76页 |
第五部分 载基因壳聚糖纳米粒冻干品的制备 | 第76-79页 |
·仪器和试药 | 第76页 |
·方法和结果 | 第76-78页 |
·载基因壳聚糖纳米粒冻干品的制备方法 | 第76页 |
·冻干保护剂选择的评价方法和结果 | 第76-77页 |
·载基因壳聚糖纳米粒冻干品的稳定性考察 | 第77-78页 |
·小结与讨论 | 第78-79页 |
第六部分 载基因壳聚糖纳米粒体外基因转染研究 | 第79-87页 |
·仪器和试药 | 第79-80页 |
·方法与结果 | 第80-84页 |
·质粒DNA的扩增和纯化 | 第80页 |
·Lovo细胞的传代培养 | 第80-82页 |
·脂质体-pDNA转染复合物的制备 | 第82页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的制备 | 第82-83页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的体外基因转染 | 第83-84页 |
·讨论 | 第84页 |
小结 | 第84-87页 |
第七部分 载基因壳聚糖纳米粒的体外安全性评价 | 第87-95页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的细胞毒试验 | 第87-90页 |
·仪器和试药 | 第87页 |
·方法和结果 | 第87-90页 |
·供试样品的制备 | 第87-88页 |
·建立本实验室的L929细胞生长代谢标准曲线 | 第88页 |
·MTT检测 | 第88-90页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的平板克隆形成试验 | 第90-92页 |
·仪器及试药 | 第90页 |
·方法及结果 | 第90-92页 |
·制备细胞悬液 | 第90-91页 |
·接种细胞 | 第91页 |
·加样及培养 | 第91页 |
·染色 | 第91-92页 |
·载基因壳聚糖纳米粒的溶血试验 | 第92-93页 |
·仪器及试药 | 第92页 |
·方法及结果 | 第92-93页 |
·供试样品的制备 | 第92页 |
·溶血率的测定 | 第92-93页 |
·讨论 | 第93-94页 |
小结 | 第94-95页 |
总结 | 第95-99页 |
壳聚糖作为基因传输载体的研究进展(综述) | 第99-111页 |
致谢 | 第111页 |