| 绪论 | 第1页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 1 国内外研究现状 | 第7-8页 |
| 2 研究背景、基础和意义 | 第8-9页 |
| 3 拟解决的关键问题和研究内容 | 第9页 |
| 文献综述 | 第9-26页 |
| 1 鸡传染性法氏囊病与鸡传染性法氏囊病毒 | 第9-14页 |
| 2 IBDV 基因组结构及病毒蛋白功能 | 第14-17页 |
| 3 病毒抗原漂移机制 | 第17-18页 |
| 4 毒力变异机制 | 第18页 |
| 5 IBDV 疫苗的研究进展 | 第18-23页 |
| 6 IBD 诊断方法的研究进展 | 第23-26页 |
| 研究报告 | 第26-51页 |
| 试验一 传染性法氏囊病毒结构基因VP3 的克隆表达 | 第26-38页 |
| 1 试验材料 | 第26-28页 |
| ·病毒、菌株、细胞、载体 | 第26页 |
| ·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第26页 |
| ·其它材料 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第27页 |
| ·VP3 模拟抗原表位 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| ·质粒PA 的构建 | 第28页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·诱导表达 | 第30页 |
| ·表达产物SDS-PAGE 电泳 | 第30页 |
| ·免疫活性检测 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| ·目的片段的PCR 结果 | 第31页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第31-33页 |
| ·表达产物SDS-PAGE 电泳 | 第33页 |
| ·Western blot 分析 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的序列及所编码的蛋白分析 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 试验二 鉴别诊断方法的建立 | 第38-51页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| ·试验用血清及动物 | 第38页 |
| ·试验用试剂及溶液 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-42页 |
| ·VP3 重组蛋白抗原的制备 | 第38-39页 |
| ·抗原浓度和血清稀释度的确定 | 第39页 |
| ·封闭剂和封闭时间的选择 | 第39页 |
| ·酶标二抗不同作用时间试验 | 第39-40页 |
| ·一抗最佳作用时间和底物显色时间 | 第40页 |
| ·间接ELISA 操作步骤 | 第40页 |
| ·特异性试验 | 第40页 |
| ·重复性试验 | 第40-41页 |
| ·敏感性试验 | 第41页 |
| ·快诊板及试剂的保存期试验 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-49页 |
| ·VP3 重组蛋白抗原 | 第42页 |
| ·最适抗原包被浓度和最适血清稀释度的确定 | 第42页 |
| ·最适封闭液和封闭时间的确定 | 第42-43页 |
| ·酶标抗体最适作用时间的确定 | 第43页 |
| ·一抗最佳作用时间和底物显色时间的确定 | 第43页 |
| ·间接ELISA 判定标准的确定 | 第43-44页 |
| ·特异性试验结果 | 第44-47页 |
| ·重复性试验结果 | 第47-48页 |
| ·敏感性试验 | 第48-49页 |
| ·快诊板的保存期试验 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |