| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·转基因水稻进展 | 第10-12页 |
| ·转抗虫基因水稻 | 第10-11页 |
| ·转抗病基因水稻 | 第11页 |
| ·抗逆性转基因水稻 | 第11-12页 |
| ·转高产优质基因水稻 | 第12页 |
| ·融合基因的发展 | 第12-14页 |
| ·目前除融合基因法外获得多价基因植物的方法 | 第12-13页 |
| ·融合基因在转基因植物中的应用 | 第13-14页 |
| ·环境中的内分泌干扰物 | 第14-16页 |
| ·EDCs 对人体及动物体健康的潜在威胁 | 第14-15页 |
| ·类固醇化合物 | 第15-16页 |
| ·睾丸酮丛毛单胞菌 | 第16-17页 |
| ·羟类固醇脱氢酶（HSDs）的特性 | 第16页 |
| ·睾丸酮丛毛单胞菌关键酶 3α-HSD/CR 表达调控 | 第16-17页 |
| ·细菌群体效应加强病害 | 第17-18页 |
| ·aiiA 基因研究现状 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-31页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·培养基与溶液 | 第20页 |
| ·酶、生化试剂及试剂盒 | 第20页 |
| ·ELISA 相关材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-31页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·构建融合基因真核表达载体 PTCK303-3α-HSD/CR–aiiA | 第21-27页 |
| ·明恢 86 与日本晴水稻愈伤受体系统的建立 | 第27页 |
| ·农杆菌与愈伤受体系统的共培养 | 第27页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选和转基因植株的再生 | 第27页 |
| ·水稻叶片 DNA 提取 | 第27-28页 |
| ·目的基因 PCR 检测 | 第28页 |
| ·PCR-Southern 杂交检测 | 第28-29页 |
| ·GUS 组织化学染色检测 | 第29页 |
| ·转基因植株后代的 ELISA 检测 | 第29-30页 |
| ·转基因水稻叶片对胡萝卜软腐欧文氏杆菌抗病性测定 | 第30-31页 |
| 3 结果分析 | 第31-39页 |
| ·质粒验证 | 第31-33页 |
| ·在重组子上选取酶切位点进行酶切电泳验证 | 第31-32页 |
| ·融合基因测序结果 | 第32-33页 |
| ·转化农杆菌 PCR 检测 | 第33页 |
| ·转基因水稻阳性植株的获得与检测 | 第33-39页 |
| ·农杆菌介导的水稻愈伤受体系统的转化 | 第33-35页 |
| ·转基因水稻目的基因 PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·PCR-Southern blot 检测结果 | 第36-37页 |
| ·GUS 组织化学检测结果 | 第37页 |
| ·ELISA 检测转融合基因水稻叶片中 3α-HSD/CR 蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·转基因水稻叶片的胡萝卜软腐欧文氏杆菌抗病性检测 | 第38-39页 |
| 4 讨论与结论 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·构建 3α-HSD/CR 和 aiiA 的融合基因 | 第39页 |
| ·转化转基因水稻 | 第39页 |
| ·植物体内融合基因中 3α-HSD/CR 的表达 | 第39-40页 |
| ·植物体内融合基因中 aiiA 的表达 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 附录Ⅰ 试验所用部分试剂配方 | 第47-53页 |
| 附录Ⅱ 载体构建图谱 | 第53-54页 |
| 附录Ⅲ 缩略词 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
