摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1 草莓概述 | 第12-13页 |
·草莓果实的营养价值 | 第12-13页 |
·草莓的经济意义 | 第13页 |
2 VIGS 概述 | 第13-18页 |
·VIGS 的机理及途径 | 第13-14页 |
·VIGS 的优越性 | 第14-15页 |
·VIGS 的局限性 | 第15-16页 |
·VIGS 载体构建、侵染、检测 | 第16-17页 |
·VIGS 载体构建考虑因素 | 第16页 |
·VIGS 侵染植物的方法 | 第16-17页 |
·检测 VIGS 的方法 | 第17页 |
·VIGS 的应用 | 第17-18页 |
·在研究植物基因功能上的应用 | 第17-18页 |
·在研究植物抗病毒上的应用 | 第18页 |
·VIGS 的发展前景 | 第18页 |
3 克隆 CHS(查尔酮合成酶)基因的重要性 | 第18-19页 |
4 本研究的立题意义及主要内容 | 第19-21页 |
·立题意义 | 第19页 |
·研究内容 | 第19-21页 |
第二章 草莓 CHS 基因的分离及生物信息学分析 | 第21-34页 |
1 草莓 CHS 基因的筛选、分离 | 第21-23页 |
2 草莓 FACHS1 基因的生物信息学分析 | 第23-28页 |
·草莓 FACHS1 基因编码蛋白一级结构分析 | 第23-24页 |
·草莓 FACHS1 基因编码蛋白结构分析 | 第24页 |
·草莓 FACHS1 同源性分析与序列比对 | 第24-26页 |
·草莓 FACHS1 编码蛋白亲水性分析 | 第26-27页 |
·草莓 FACHS1 编码蛋白二级结构预测及跨膜结构分析 | 第27-28页 |
3 草莓 FACHS2 基因的生物信息学分析 | 第28-32页 |
·草莓 FACHS2 基因编码蛋白一级结构分析 | 第28页 |
·草莓 FACHS2 基因编码蛋白结构分析 | 第28-29页 |
·草莓 FACHS2 同源性分析与序列比对 | 第29-30页 |
·草莓 FACHS2 编码蛋白亲水性分析 | 第30-31页 |
·草莓 FACHS2 编码蛋白二级结构预测及跨膜结构分析 | 第31-32页 |
4 小结 | 第32-34页 |
第三章 草莓 CHS 基因的克隆 | 第34-50页 |
1 材料与试剂 | 第34-36页 |
·试验材料 | 第34页 |
·酶、试剂、菌种、培养基 | 第34-35页 |
·酶和试剂 | 第34页 |
·菌种和质粒 | 第34页 |
·培养基及配制的试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-43页 |
·草莓 RNA 提取 | 第36页 |
·CDNA 的合成 | 第36-38页 |
·DNAase 消化 | 第36-37页 |
·逆转录 | 第37页 |
·内标基因检测模板 cDNA | 第37-38页 |
·引物设计与合成 | 第38页 |
·PCR 扩增 | 第38-39页 |
·PCR 扩增产物回收 | 第39-40页 |
·回收 DNA 目的片段与 PUCM-T 载体的连接 | 第40页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
·连接产物的转化 | 第41页 |
·挑菌、克隆鉴定、保菌 | 第41-42页 |
·挑菌 | 第41页 |
·目的克隆鉴定 | 第41-42页 |
·保菌 | 第42页 |
·质粒的抽提 | 第42-43页 |
·质粒验证 | 第43页 |
·克隆测序及序列比对分析 | 第43页 |
3 结果与分析 | 第43-47页 |
·草莓 RNA 的提取及内标基因检测 CDNA 模板 | 第43-44页 |
·PCR 扩增及扩增产物回收 | 第44页 |
·克隆鉴定及质粒鉴定 | 第44-46页 |
·克隆测序与序列比对分析 | 第46-47页 |
4 小结 | 第47-50页 |
·草莓 RNA 的提取 | 第47-48页 |
·关于 PCR 反应 | 第48页 |
·关于草莓 CHS 基因 | 第48-50页 |
第四章 VIGS 载体构建 | 第50-60页 |
1 材料与试剂 | 第50页 |
·材料 | 第50页 |
·生物试剂 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·主要培养基和试剂 | 第50页 |
2 实验方法 | 第50-55页 |
·质粒和 PTRV2 酶切 | 第50-51页 |
·质粒和 PTRV2 酶切后切胶回收 | 第51-52页 |
·过夜连接 | 第52页 |
·CACL2法制备感受态 | 第52页 |
·连接产物的转化 | 第52-53页 |
·克隆鉴定 | 第53页 |
·质粒的抽提 | 第53-54页 |
·质粒验证 | 第54页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第54-55页 |
·冻融法转化 | 第55页 |
·农杆菌转化克隆鉴定 | 第55页 |
3 结果与分析 | 第55-58页 |
·克隆鉴定 | 第55-56页 |
·质粒鉴定 | 第56页 |
·病毒载体的构建 | 第56-57页 |
·农杆菌转化克隆鉴定 | 第57-58页 |
4 小结 | 第58-60页 |
第五章 总结与展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
缩略词表 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |