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一个新的油菜转化体系的优化和血红蛋白基因SLR2097向甘蓝型油菜中的转化

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 绪论第14-36页
   ·植物转基因技术第14-19页
     ·植物基因转化体系第14-17页
     ·根癌农杆菌介导的植物基因转化第17-18页
     ·外源基因在转化体中的遗传学行为第18-19页
   ·油菜的基因转化研究第19-22页
     ·油菜基因转化方法第19-21页
     ·外源基因在转化油菜植株中的遗传表达第21-22页
   ·遗传转化在油菜遗传改良中的应用第22-29页
     ·菜籽的品质改良第22-24页
     ·油菜抗逆性遗传改良第24-27页
     ·油菜雄性不育的遗传改良第27-28页
     ·利用转基因油菜生产生物可降解塑料成分和药用产品第28页
     ·油菜的抗衰老遗传改良第28-29页
   ·转基因油菜的生态安全性评价第29-30页
   ·血红蛋白第30-34页
     ·透明颤菌血红蛋白的生理功能第30-31页
     ·透明颤菌血红蛋白在转基因烟草中的表达第31-33页
     ·具有两个结构域的血红蛋白-黄素血红蛋白(FHP)第33-34页
   ·本研究的目的和意义第34页
   ·主要研究内容和技术路线第34-36页
     ·主要研究内容第34-35页
     ·技术路线第35-36页
第二章 一个新的甘蓝型油菜转化体系的建立第36-50页
   ·材料和方法第37-44页
     ·植物材料第37页
     ·菌种与试剂第37页
     ·农杆菌与植物培养基第37-38页
     ·主要仪器设备第38-39页
     ·实验所用的培养基第39-40页
     ·不同浓度的6-BA与NAA对宁油12号子叶节外植体芽再生的影响第40页
     ·不同农杆菌菌液浓度与侵染时间对转化效率的影响第40页
     ·不同浓度的乙酰丁香酮与silwet L77对转化效率的影响第40页
     ·转基因植株的分子检测第40-44页
     ·GFP基因在油菜植株中的表达第44页
   ·结果与分析第44-48页
     ·6-BA与NAA对子叶节发育成绿色小植株的影响第44-45页
     ·农杆菌浓度与侵染时间对转化效率的影响第45-46页
     ·乙酰丁香酮与silwet L77对转化效率的影响第46页
     ·转基因植株的PCR检测第46-47页
     ·转基因植株的Southern blotting检测第47-48页
     ·GFP基因在转基因油菜中的表达第48页
   ·讨论第48-49页
   ·本章总结第49-50页
第三章 SLR2097基因的克隆与序列分析第50-58页
   ·材料和方法第50-52页
     ·微生物材料第50页
     ·试剂及酶第50页
     ·蓝细菌SLR2097基因的克隆第50-52页
   ·结果与分析第52-57页
     ·SLR2097基因的克隆第52页
     ·蓝细菌SLR2097基因的序列分析第52-53页
     ·蓝细菌与其它几种生物的血红蛋白的氨基酸序列的同源性比较第53-56页
     ·蓝细菌的血红蛋白基因的分子进化分析第56-57页
   ·本章总结第57-58页
第四章 蓝细菌SLR2097基因向油菜中的转化与表达第58-71页
   ·材料与方法第58-65页
     ·菌种、载体和试剂第58-59页
     ·基本溶液的配制第59-60页
     ·主要仪器设备第60页
     ·SDS-碱裂解法小量抽提质粒DNA第60-61页
     ·大肠杆菌热击感受态的制备第61页
     ·大肠杆菌感受态细胞的热击转化第61-62页
     ·元表达载体pCAMBIA1300-CaMV35S的构建第62页
     ·pCAMBIA1300-CaMV35S-SLR2097表达载体的构建第62-63页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第63页
     ·重组质粒转化农杆菌感受态细胞第63-64页
     ·阳性克隆的鉴定和保存第64页
     ·根癌农杆菌介导的油菜转化第64-65页
     ·转基因油菜的PCR鉴定第65页
   ·结果与分析第65-69页
     ·pCAMBIA1300-CaMV35S-SLR2097表达载体的构建第65-66页
     ·重组质粒pCAMBIA1300-CaMV35S的酶切鉴定第66页
     ·重组质粒pCAMBIA1300-CaMV35S-SLR2097的酶切鉴定第66-67页
     ·重组质粒转化农杆菌的PCR鉴定第67-68页
     ·转基因植株的PCR鉴定第68-69页
     ·蓝细菌SLR2097基因对油菜的影响第69页
   ·讨论第69-70页
   ·本章总结第70-71页
第五章 总结与展望第71-73页
   ·主要工作总结第71页
   ·工作展望第71-73页
参考文献第73-79页
致谢第79-80页
在学期间发表论文第80-81页
参加课题第81页

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