| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| ·对油菜的生产需求 | 第13页 |
| ·角果开裂对油菜生产的影响 | 第13-14页 |
| ·角果开裂在模式植物——拟南芥中的研究 | 第14-21页 |
| ·拟南芥角果构造和角果开裂过程 | 第14-15页 |
| ·角果开裂的遗传学 | 第15-16页 |
| ·调控裂区细胞分化的基因 | 第16-18页 |
| ·参与角果开裂的下游效应物 | 第18页 |
| ·角果开裂的信号调节机制 | 第18-19页 |
| ·角果开裂的激素控制 | 第19-21页 |
| ·在油菜中的研究 | 第21-22页 |
| ·开裂机制及其调控的研究 | 第21-22页 |
| ·抗裂角油菜品种的选育 | 第22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| ·主要研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
| ·主要研究内容 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 油菜裂角相关基因的克隆及生物信息学分析 | 第25-46页 |
| ·材料 | 第25-28页 |
| ·植物材料、菌种、载体 | 第25页 |
| ·酶和化学试剂 | 第25页 |
| ·基本溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·引物设计与合成 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-34页 |
| ·植物基因组DNA的小量提取 | 第28页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·逆转录 | 第29页 |
| ·PCR | 第29页 |
| ·连接反应 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌热击感受态的制备 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的热击转化 | 第30页 |
| ·SDS-碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第30-31页 |
| ·BLAST与序列拼接 | 第31页 |
| ·RACE | 第31-34页 |
| ·油菜裂角相关基因的分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-45页 |
| ·油菜IND,FUL,ALC,SHP1,SHP2基因序列的BLAST搜索与预测 | 第34-35页 |
| ·甘蓝型油菜中IND,FUL,ALC,SHP1,SHP2候选基因的克隆 | 第35-36页 |
| ·BnSHP2,BnALC基因的RACE | 第36-39页 |
| ·油菜裂角相关基因ORF的获得和编码蛋白序列的推测以及结构域的预测 | 第39-40页 |
| ·油菜裂角相关转录因子的保守性分析及系统发育树的构建 | 第40-45页 |
| ·讨论与总结 | 第45-46页 |
| 第三章 油菜裂角相关基因的转录水平及在基因组中的拷贝数 | 第46-54页 |
| ·材料和试剂 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·酶和化学试剂 | 第46页 |
| ·试剂的配制 | 第46-47页 |
| ·一些必要的仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·油菜不同组织总RNA的提取及反转录PCR | 第47-48页 |
| ·油菜裂角相关基因的RT-PCR扩增 | 第48-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-53页 |
| ·讨论与总结 | 第53-54页 |
| 第四章 油菜裂角相关基因功能的初步鉴定 | 第54-70页 |
| ·材料和试剂 | 第54-56页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·菌种、载体和试剂 | 第54页 |
| ·常用缓冲液 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54-56页 |
| ·实验方法 | 第56-63页 |
| ·BnFUL-b基因和BnALC基因片断的克隆 | 第56-57页 |
| ·pCAMBIAl300-35S-FUL-b过量表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·pKANNIBAL-BnALC载体的构建 | 第58-60页 |
| ·pKANNIBAL-BnALC载体的Not Ⅰ酶切片断连接双元表达载体pART27 | 第60-61页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第61页 |
| ·冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第61页 |
| ·根癌农杆菌介导转化甘蓝型油菜 | 第61-62页 |
| ·转基因油菜的PCR鉴定 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-69页 |
| ·pCAMBIAl300-35S-BnFUL-b过量表达载体的构建 | 第63-64页 |
| ·pCAMBIAl300-35S-BnFUL-b过量表达载体转化农杆菌 | 第64页 |
| ·pCAMBIAl300-35S-BnFUL-b过量表达载体转基因植株的鉴定 | 第64-65页 |
| ·BnALC抑制表达载体(RNAi-BnALC)的构建 | 第65-68页 |
| ·BnALC抑制表达载体(RNAi-BnALC)转化农杆菌 | 第68页 |
| ·BnALC抑制表达载体(RNAi-BnALC)转基因植株的鉴定 | 第68-69页 |
| ·讨论与总结 | 第69-70页 |
| 第五章 油菜裂角相关基因的亚细胞定位 | 第70-78页 |
| ·材料和试剂 | 第70-71页 |
| ·材料 | 第70页 |
| ·菌种、载体和试剂 | 第70页 |
| ·溶液配制 | 第70页 |
| ·主要仪器设备 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-74页 |
| ·BnFUL-b、BnIND和BnALC基因核定位信号的预测 | 第71页 |
| ·BnFUL-b、BnIND和BnALC基因片断的克隆 | 第71-72页 |
| ·BnFUL-b、BnIND和BnALC基因定位载体的构建 | 第72-73页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮细胞 | 第73-74页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-77页 |
| ·BnFUL-b、BnIND和BnALC核定位信号的预测 | 第74-75页 |
| ·BnFUL-b、BnIND和BnALC定位载体的构建 | 第75-76页 |
| ·BnFUL-b、BnIND和BnALC在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位 | 第76-77页 |
| ·讨论与总结 | 第77-78页 |
| 第六章 总结与展望 | 第78-80页 |
| ·主要工作总结 | 第78页 |
| ·工作展望 | 第78-80页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 在学期间发表论文 | 第85页 |
| 登录基因 | 第85-86页 |
| 参加课题 | 第86页 |
