中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
第一章 绪论 | 第14-30页 |
·立题背景和意义 | 第14-15页 |
·小球藻国内外研究进展 | 第15-17页 |
·小球藻及应用状况 | 第15页 |
·小球藻的药用价值 | 第15-17页 |
·小球藻活性成分研究现状 | 第17页 |
·小球藻糖蛋白研究概况 | 第17-18页 |
·小球藻糖蛋白的提取 | 第17-18页 |
·小球藻糖蛋白的性质及结构 | 第18页 |
·小球藻糖蛋白的生物活性 | 第18页 |
·化学预防剂筛选的研究状况 | 第18-21页 |
·筛选方法的研究进展 | 第18-19页 |
·体外细胞筛选方法 | 第19-20页 |
·体外筛选方法的发展趋势 | 第20-21页 |
·研究的目的和内容 | 第21-23页 |
·研究目的 | 第21-22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-30页 |
第二章 小球藻糖蛋白的分离纯化 | 第30-47页 |
·引言 | 第30页 |
·材料与方法 | 第30-34页 |
·主要材料 | 第30页 |
·小球藻成分测定方法 | 第30-31页 |
·多糖含量的测定 | 第31页 |
·蛋白质含量的测定 | 第31-32页 |
·小球藻糖蛋白提取的工艺流程 | 第32页 |
·多糖得率的计算方法 | 第32页 |
·小球藻糖蛋白水提工艺 | 第32-33页 |
·小球藻糖蛋白脱游离蛋白工艺 | 第33页 |
·凝胶柱层析 | 第33-34页 |
·小球藻糖蛋白纯度鉴定 | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-44页 |
·原料的基本组成含量 | 第34-35页 |
·小球藻糖蛋白的水提工艺 | 第35-39页 |
·小球藻糖蛋白脱游离蛋白 | 第39-42页 |
·小球藻糖蛋白的柱层析 | 第42-43页 |
·小球藻糖蛋白的纯度测定 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
第三章 小球藻糖蛋白(CGP Ⅰ)的化学组成研究 | 第47-55页 |
·引言 | 第47页 |
·材料与方法 | 第47-49页 |
·主要材料 | 第47页 |
·CGP Ⅰ分子量测定 | 第47-48页 |
·糖含量测定 | 第48页 |
·蛋白质含量测定 | 第48页 |
·氨基酸分析 | 第48页 |
·单糖组成分析 | 第48页 |
·紫外可见光谱(UV)分析 | 第48页 |
·红外光谱(IR)分析 | 第48页 |
·糖肽键测定 | 第48-49页 |
·结果与讨论 | 第49-53页 |
·CGP Ⅰ分子量测定 | 第49页 |
·CGP Ⅰ蛋白质组成 | 第49-50页 |
·CGP Ⅰ糖组成 | 第50-51页 |
·紫外可见光谱 | 第51页 |
·红外光谱 | 第51-52页 |
·糖肽键 | 第52-53页 |
·本章小结 | 第53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
第四章 小球藻糖蛋白抗氧化特性的研究 | 第55-66页 |
·引言 | 第55页 |
·材料与方法 | 第55-57页 |
·主要材料 | 第55页 |
·试剂 | 第55页 |
·还原力的测定 | 第55-56页 |
··OH清除率的测定 | 第56页 |
·O~2·清除作用的测定 | 第56页 |
·DPPH自由基清除能力的测定 | 第56-57页 |
·烷基自由基清除能力的测定 | 第57页 |
·统计分析 | 第57页 |
·结果与讨论 | 第57-62页 |
·还原力的测定 | 第57-58页 |
·羟基自由基清除率的测定 | 第58页 |
·O~2·自由基的清除作用的测定 | 第58-59页 |
·DPPH自由基的清除能力的测定 | 第59-60页 |
·烷基自由基清除能力的测定 | 第60-61页 |
·小球藻糖蛋白抗氧化作用的机理 | 第61-62页 |
·本章小结 | 第62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
第五章 小球藻糖蛋白靶向作用真核表达载体的构建 | 第66-80页 |
·引言 | 第66页 |
·材料与方法 | 第66-74页 |
·质粒和菌株 | 第66-67页 |
·试剂 | 第67页 |
·主要试剂的配制 | 第67-68页 |
·试验流程图 | 第68-69页 |
·启动子的选择与克隆 | 第69-71页 |
·绿色荧光蛋白(GFP)表达载体的构建 | 第71-74页 |
·结果与分析 | 第74-77页 |
·重组TK启动子的扩增 | 第74页 |
·TA克隆的酶切鉴定 | 第74-75页 |
·pTK-GFP和pARE-TK-GFP表达载体的鉴定 | 第75页 |
·pTK-GFP/neo和pARE-TK-GFP/neo真核表达载体的鉴定 | 第75-77页 |
·本章小结 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-80页 |
第六章 转基因细胞模型的建立及对小球藻糖蛋白预防肿瘤的初步筛选 | 第80-92页 |
·引言 | 第80页 |
·材料与方法 | 第80-84页 |
·主要材料 | 第80页 |
·试剂 | 第80页 |
·主要试剂的配制 | 第80-81页 |
·HepG2细胞的培养 | 第81页 |
·转染用质粒的制备 | 第81-82页 |
·脂质体法转染HepG2细胞 | 第82-83页 |
·阳性克隆的筛选 | 第83页 |
·转基因细胞中GFP荧光与DNA含量的检测 | 第83-84页 |
·转基因细胞模型对糖蛋白的筛选 | 第84页 |
·统计分析 | 第84页 |
·结果与讨论 | 第84-89页 |
·转基因细胞模型的建立 | 第84-85页 |
·PDTC对GFP荧光诱导效果 | 第85-86页 |
·香菇多糖对GFP荧光诱导效果 | 第86-87页 |
·糖蛋白GFP Ⅰ对GFP荧光诱导效果 | 第87-88页 |
·糖蛋白干预Ⅱ相酶预防肿瘤的机理探讨 | 第88-89页 |
·本章小结 | 第89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
主要结论 | 第92-93页 |
主要创新点 | 第93-94页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |