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小球藻糖蛋白的分离纯化与体外预防肿瘤作用筛选的研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
缩略词表第12-14页
第一章 绪论第14-30页
   ·立题背景和意义第14-15页
   ·小球藻国内外研究进展第15-17页
     ·小球藻及应用状况第15页
     ·小球藻的药用价值第15-17页
     ·小球藻活性成分研究现状第17页
   ·小球藻糖蛋白研究概况第17-18页
     ·小球藻糖蛋白的提取第17-18页
     ·小球藻糖蛋白的性质及结构第18页
     ·小球藻糖蛋白的生物活性第18页
   ·化学预防剂筛选的研究状况第18-21页
     ·筛选方法的研究进展第18-19页
     ·体外细胞筛选方法第19-20页
     ·体外筛选方法的发展趋势第20-21页
   ·研究的目的和内容第21-23页
     ·研究目的第21-22页
     ·研究内容第22-23页
 参考文献第23-30页
第二章 小球藻糖蛋白的分离纯化第30-47页
   ·引言第30页
   ·材料与方法第30-34页
     ·主要材料第30页
     ·小球藻成分测定方法第30-31页
     ·多糖含量的测定第31页
     ·蛋白质含量的测定第31-32页
     ·小球藻糖蛋白提取的工艺流程第32页
     ·多糖得率的计算方法第32页
     ·小球藻糖蛋白水提工艺第32-33页
     ·小球藻糖蛋白脱游离蛋白工艺第33页
     ·凝胶柱层析第33-34页
     ·小球藻糖蛋白纯度鉴定第34页
   ·结果与讨论第34-44页
     ·原料的基本组成含量第34-35页
     ·小球藻糖蛋白的水提工艺第35-39页
     ·小球藻糖蛋白脱游离蛋白第39-42页
     ·小球藻糖蛋白的柱层析第42-43页
     ·小球藻糖蛋白的纯度测定第43-44页
   ·本章小结第44-45页
 参考文献第45-47页
第三章 小球藻糖蛋白(CGP Ⅰ)的化学组成研究第47-55页
   ·引言第47页
   ·材料与方法第47-49页
     ·主要材料第47页
     ·CGP Ⅰ分子量测定第47-48页
     ·糖含量测定第48页
     ·蛋白质含量测定第48页
     ·氨基酸分析第48页
     ·单糖组成分析第48页
     ·紫外可见光谱(UV)分析第48页
     ·红外光谱(IR)分析第48页
     ·糖肽键测定第48-49页
   ·结果与讨论第49-53页
     ·CGP Ⅰ分子量测定第49页
     ·CGP Ⅰ蛋白质组成第49-50页
     ·CGP Ⅰ糖组成第50-51页
     ·紫外可见光谱第51页
     ·红外光谱第51-52页
     ·糖肽键第52-53页
   ·本章小结第53页
 参考文献第53-55页
第四章 小球藻糖蛋白抗氧化特性的研究第55-66页
   ·引言第55页
   ·材料与方法第55-57页
     ·主要材料第55页
     ·试剂第55页
     ·还原力的测定第55-56页
     ··OH清除率的测定第56页
     ·O~2·清除作用的测定第56页
     ·DPPH自由基清除能力的测定第56-57页
     ·烷基自由基清除能力的测定第57页
     ·统计分析第57页
   ·结果与讨论第57-62页
     ·还原力的测定第57-58页
     ·羟基自由基清除率的测定第58页
     ·O~2·自由基的清除作用的测定第58-59页
     ·DPPH自由基的清除能力的测定第59-60页
     ·烷基自由基清除能力的测定第60-61页
     ·小球藻糖蛋白抗氧化作用的机理第61-62页
   ·本章小结第62页
 参考文献第62-66页
第五章 小球藻糖蛋白靶向作用真核表达载体的构建第66-80页
   ·引言第66页
   ·材料与方法第66-74页
     ·质粒和菌株第66-67页
     ·试剂第67页
     ·主要试剂的配制第67-68页
     ·试验流程图第68-69页
     ·启动子的选择与克隆第69-71页
     ·绿色荧光蛋白(GFP)表达载体的构建第71-74页
   ·结果与分析第74-77页
     ·重组TK启动子的扩增第74页
     ·TA克隆的酶切鉴定第74-75页
     ·pTK-GFP和pARE-TK-GFP表达载体的鉴定第75页
     ·pTK-GFP/neo和pARE-TK-GFP/neo真核表达载体的鉴定第75-77页
   ·本章小结第77-78页
 参考文献第78-80页
第六章 转基因细胞模型的建立及对小球藻糖蛋白预防肿瘤的初步筛选第80-92页
   ·引言第80页
   ·材料与方法第80-84页
     ·主要材料第80页
     ·试剂第80页
     ·主要试剂的配制第80-81页
     ·HepG2细胞的培养第81页
     ·转染用质粒的制备第81-82页
     ·脂质体法转染HepG2细胞第82-83页
     ·阳性克隆的筛选第83页
     ·转基因细胞中GFP荧光与DNA含量的检测第83-84页
     ·转基因细胞模型对糖蛋白的筛选第84页
     ·统计分析第84页
   ·结果与讨论第84-89页
     ·转基因细胞模型的建立第84-85页
     ·PDTC对GFP荧光诱导效果第85-86页
     ·香菇多糖对GFP荧光诱导效果第86-87页
     ·糖蛋白GFP Ⅰ对GFP荧光诱导效果第87-88页
     ·糖蛋白干预Ⅱ相酶预防肿瘤的机理探讨第88-89页
   ·本章小结第89页
 参考文献第89-92页
主要结论第92-93页
主要创新点第93-94页
攻读学位期间发表的学术论文第94-95页
致谢第95页

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