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复合功能基因投递系统的构建和体内外研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 绪论第11-44页
   ·引言第11-12页
   ·脑胶质瘤第12-17页
     ·脑胶质瘤与基因治疗第12-13页
     ·RNAi 技术第13-14页
     ·EGFR-P13K-AKT 信号通路第14-17页
   ·基因载体第17-32页
     ·病毒性基因载体第17-18页
     ·非病毒类基因载体第18-27页
     ·聚阳离子基因载体介导的基因转染的一般过程第27-28页
     ·Starburst PAMAM dendrimers 树枝状聚合物基因载体第28-32页
   ·具有跨膜和磁靶向复合功能的基因投递系统的构建第32-43页
     ·趋磁性细菌与磁小体第32-40页
     ·跨膜多肽TAT 概述第40-43页
   ·本文的研究内容及意义第43-44页
第二章 磁小体理化性质的研究第44-68页
   ·引言第44-45页
   ·实验部分第45-50页
     ·实验试剂与仪器第45-46页
     ·磁小体的纯化第46页
     ·磁小体理化性质的研究第46-49页
     ·磁小体细胞毒性的研究第49-50页
   ·结果与讨论第50-67页
     ·磁小体的清洗提纯第50-51页
     ·磁小体脂质膜理化性质的研究第51-56页
     ·磁小体磁核理化性质的研究第56-60页
     ·磁小体理化性质的研究第60-64页
     ·磁小体细胞毒性的研究第64-67页
   ·本章小结第67-68页
第三章 具有复合功能基因投递系统的构建与表征第68-88页
   ·引言第68-69页
   ·实验部分第69-74页
     ·实验试剂与仪器第69-70页
     ·BMPs-PAMAM 基因投递系统的构建第70-71页
     ·Tat-BMPs-PAMAM 复合功能基因投递系统的构建第71-72页
     ·具有复合功能基因投递系统的表征第72-74页
   ·结果与讨论第74-87页
     ·构建BMPs-PAMAM 基因投递系统反应条件的优化第74-79页
     ·具有复合功能基因投递系统的表征第79-87页
   ·本章小结第87-88页
第四章 复合功能基因投递系统体外报告基因转染效率的评价第88-115页
   ·引言第88-89页
   ·实验部分第89-98页
     ·实验试剂与仪器第89-90页
     ·报告质粒的提取第90-91页
     ·凝胶阻滞实验第91-92页
     ·复合物稳定性实验第92页
     ·Dnase I 酶切保护实验第92-93页
     ·基因载体细胞毒性实验第93-94页
     ·报告质粒的转染实验第94-96页
     ·体外磁靶向跨膜定位实验第96-98页
   ·结果与讨论第98-114页
     ·报告质粒的提取与鉴定第98-101页
     ·DNA 结合实验第101-102页
     ·聚合物稳定性实验第102-104页
     ·DNA 酶切保护实验第104-105页
     ·载体的细胞毒性实验第105-108页
     ·体外转染实验第108-112页
     ·体外磁靶向跨膜定位实验结果第112-114页
   ·本章小结第114-115页
第五章 复合功能基因投递系统体内分布和跨血脑屏障功能研究-第115-127页
   ·引言第115-116页
   ·实验部分第116-119页
     ·实验试剂与仪器表第116页
     ·磁性复合功能载体的放射性标记[188]第116页
     ·磁性复合功能载体载基因体内分布第116-119页
   ·结果与讨论第119-126页
     ·放射性元素~(99m)Tc 跨血脑屏障(BBB)功能检测第119页
     ·~(99m)Tc-复合功能基因投递系统的体内分布和跨BBB 功能检测-第119-126页
   ·本章小结第126-127页
第六章 载psiRNA 复合功能基因投递系统抑制 U251 人脑恶性胶质瘤的细胞实验研究第127-163页
   ·前言第127-128页
   ·实验部分第128-140页
     ·实验试剂与仪器第128-129页
     ·细胞培养第129-130页
     ·治疗质粒的提取第130-131页
     ·基因转染第131-132页
     ·Western blot 检测相关蛋白的表达第132-135页
     ·相关抗原免疫组化染色(ABC 法)第135-136页
     ·相关抗原免疫荧光染色第136页
     ·流式细胞仪分析细胞周期第136-137页
     ·Annexin V-FITC 检测细胞凋亡第137-138页
     ·细胞增殖活性的分析第138页
     ·U251 胶质瘤细胞侵袭能力的体外实验第138-139页
     ·统计学方法第139-140页
   ·实验结果第140-159页
     ·治疗质粒的提取与鉴定第140页
     ·Western blot 检测相关蛋白的表达第140-144页
     ·细胞免疫组化与免疫荧光检测第144-147页
     ·细胞周期分析第147-148页
     ·细胞凋亡分析第148-150页
     ·MTT 实验第150页
     ·细胞侵袭能力的研究第150-159页
   ·讨论第159-162页
   ·本章小结第162-163页
第七章 载psiRNA 复合功能基因投递系统抑制 U251 人脑恶性胶质瘤的动物实验研究第163-184页
   ·引言第163-164页
   ·实验部分第164-171页
     ·实验试剂与仪器第164-165页
     ·动物模型的建立第165-167页
     ·治疗基因的提取第167页
     ·体内基因治疗第167-168页
     ·肿瘤生长情况观察第168页
     ·组织标本的常规HE 染色第168页
     ·免疫组织化学检测第168-169页
     ·原位细胞凋亡的检测第169-170页
     ·统计学处理第170-171页
   ·结果与讨论第171-180页
     ·治疗质粒的大量提取第171-172页
     ·肿瘤生长曲线第172-173页
       ·H E 染色第173-175页
     ·治疗后肿瘤相关指标变化情况第175-178页
       ·T UNEL 原位凋亡检测第178-180页
   ·讨论第180-183页
   ·本章小结第183-184页
全文结论第184-187页
参考文献第187-200页
致谢第200-201页
发表论文和科研情况第201-202页

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