摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 绪论 | 第11-44页 |
·引言 | 第11-12页 |
·脑胶质瘤 | 第12-17页 |
·脑胶质瘤与基因治疗 | 第12-13页 |
·RNAi 技术 | 第13-14页 |
·EGFR-P13K-AKT 信号通路 | 第14-17页 |
·基因载体 | 第17-32页 |
·病毒性基因载体 | 第17-18页 |
·非病毒类基因载体 | 第18-27页 |
·聚阳离子基因载体介导的基因转染的一般过程 | 第27-28页 |
·Starburst PAMAM dendrimers 树枝状聚合物基因载体 | 第28-32页 |
·具有跨膜和磁靶向复合功能的基因投递系统的构建 | 第32-43页 |
·趋磁性细菌与磁小体 | 第32-40页 |
·跨膜多肽TAT 概述 | 第40-43页 |
·本文的研究内容及意义 | 第43-44页 |
第二章 磁小体理化性质的研究 | 第44-68页 |
·引言 | 第44-45页 |
·实验部分 | 第45-50页 |
·实验试剂与仪器 | 第45-46页 |
·磁小体的纯化 | 第46页 |
·磁小体理化性质的研究 | 第46-49页 |
·磁小体细胞毒性的研究 | 第49-50页 |
·结果与讨论 | 第50-67页 |
·磁小体的清洗提纯 | 第50-51页 |
·磁小体脂质膜理化性质的研究 | 第51-56页 |
·磁小体磁核理化性质的研究 | 第56-60页 |
·磁小体理化性质的研究 | 第60-64页 |
·磁小体细胞毒性的研究 | 第64-67页 |
·本章小结 | 第67-68页 |
第三章 具有复合功能基因投递系统的构建与表征 | 第68-88页 |
·引言 | 第68-69页 |
·实验部分 | 第69-74页 |
·实验试剂与仪器 | 第69-70页 |
·BMPs-PAMAM 基因投递系统的构建 | 第70-71页 |
·Tat-BMPs-PAMAM 复合功能基因投递系统的构建 | 第71-72页 |
·具有复合功能基因投递系统的表征 | 第72-74页 |
·结果与讨论 | 第74-87页 |
·构建BMPs-PAMAM 基因投递系统反应条件的优化 | 第74-79页 |
·具有复合功能基因投递系统的表征 | 第79-87页 |
·本章小结 | 第87-88页 |
第四章 复合功能基因投递系统体外报告基因转染效率的评价 | 第88-115页 |
·引言 | 第88-89页 |
·实验部分 | 第89-98页 |
·实验试剂与仪器 | 第89-90页 |
·报告质粒的提取 | 第90-91页 |
·凝胶阻滞实验 | 第91-92页 |
·复合物稳定性实验 | 第92页 |
·Dnase I 酶切保护实验 | 第92-93页 |
·基因载体细胞毒性实验 | 第93-94页 |
·报告质粒的转染实验 | 第94-96页 |
·体外磁靶向跨膜定位实验 | 第96-98页 |
·结果与讨论 | 第98-114页 |
·报告质粒的提取与鉴定 | 第98-101页 |
·DNA 结合实验 | 第101-102页 |
·聚合物稳定性实验 | 第102-104页 |
·DNA 酶切保护实验 | 第104-105页 |
·载体的细胞毒性实验 | 第105-108页 |
·体外转染实验 | 第108-112页 |
·体外磁靶向跨膜定位实验结果 | 第112-114页 |
·本章小结 | 第114-115页 |
第五章 复合功能基因投递系统体内分布和跨血脑屏障功能研究- | 第115-127页 |
·引言 | 第115-116页 |
·实验部分 | 第116-119页 |
·实验试剂与仪器表 | 第116页 |
·磁性复合功能载体的放射性标记[188] | 第116页 |
·磁性复合功能载体载基因体内分布 | 第116-119页 |
·结果与讨论 | 第119-126页 |
·放射性元素~(99m)Tc 跨血脑屏障(BBB)功能检测 | 第119页 |
·~(99m)Tc-复合功能基因投递系统的体内分布和跨BBB 功能检测- | 第119-126页 |
·本章小结 | 第126-127页 |
第六章 载psiRNA 复合功能基因投递系统抑制 U251 人脑恶性胶质瘤的细胞实验研究 | 第127-163页 |
·前言 | 第127-128页 |
·实验部分 | 第128-140页 |
·实验试剂与仪器 | 第128-129页 |
·细胞培养 | 第129-130页 |
·治疗质粒的提取 | 第130-131页 |
·基因转染 | 第131-132页 |
·Western blot 检测相关蛋白的表达 | 第132-135页 |
·相关抗原免疫组化染色(ABC 法) | 第135-136页 |
·相关抗原免疫荧光染色 | 第136页 |
·流式细胞仪分析细胞周期 | 第136-137页 |
·Annexin V-FITC 检测细胞凋亡 | 第137-138页 |
·细胞增殖活性的分析 | 第138页 |
·U251 胶质瘤细胞侵袭能力的体外实验 | 第138-139页 |
·统计学方法 | 第139-140页 |
·实验结果 | 第140-159页 |
·治疗质粒的提取与鉴定 | 第140页 |
·Western blot 检测相关蛋白的表达 | 第140-144页 |
·细胞免疫组化与免疫荧光检测 | 第144-147页 |
·细胞周期分析 | 第147-148页 |
·细胞凋亡分析 | 第148-150页 |
·MTT 实验 | 第150页 |
·细胞侵袭能力的研究 | 第150-159页 |
·讨论 | 第159-162页 |
·本章小结 | 第162-163页 |
第七章 载psiRNA 复合功能基因投递系统抑制 U251 人脑恶性胶质瘤的动物实验研究 | 第163-184页 |
·引言 | 第163-164页 |
·实验部分 | 第164-171页 |
·实验试剂与仪器 | 第164-165页 |
·动物模型的建立 | 第165-167页 |
·治疗基因的提取 | 第167页 |
·体内基因治疗 | 第167-168页 |
·肿瘤生长情况观察 | 第168页 |
·组织标本的常规HE 染色 | 第168页 |
·免疫组织化学检测 | 第168-169页 |
·原位细胞凋亡的检测 | 第169-170页 |
·统计学处理 | 第170-171页 |
·结果与讨论 | 第171-180页 |
·治疗质粒的大量提取 | 第171-172页 |
·肿瘤生长曲线 | 第172-173页 |
·H E 染色 | 第173-175页 |
·治疗后肿瘤相关指标变化情况 | 第175-178页 |
·T UNEL 原位凋亡检测 | 第178-180页 |
·讨论 | 第180-183页 |
·本章小结 | 第183-184页 |
全文结论 | 第184-187页 |
参考文献 | 第187-200页 |
致谢 | 第200-201页 |
发表论文和科研情况 | 第201-202页 |